以临床病例为中心的形态学实验教学改革的实施与反馈

目的为了探讨以临床病例为中心的形态学实验教学方法对提高病理及形态学实验技术教学质量的影响,进行了相关教学新模式的改革探索。形态学实验教学中融入形态学实验技术教学,让医学本科生尽早学习科研方法,使学生在人才培养和科学研究上得到双向提升。方法收集厦门医学院附属第二医院心胸外科2021年3月-2021年10月送检的20例肺鳞癌标本行石蜡、半薄及超薄切片。通过对石蜡切片技术、生物电镜技术基本原理、操作方法进行讲授,让学生掌握肺鳞癌光镜与电镜下图像。结果肺角化型鳞癌石蜡及半薄切片于光镜下可见癌细胞间形成良好的细胞间桥;非角化型鳞癌细胞间则无细胞间桥。超薄切片于电镜下可见,肺鳞癌无论高、中、低分化,细胞间均有多少不等的张力原纤维和/或桥粒,偶见少数癌细胞内含黏液颗粒。结论以临床样品为实例,以大型科研仪器为支撑,让医学本科生尽早跟随老师进入实验室,学习形态学常用技术的基本原理、相关仪器的操作步骤、样本的制备方法、实验结果的分析处理等知识,在实践中开拓学生科研思维、增强学生创新实践能力,提升对人体组织形态学的认识。

羟基红花黄色素A对肾小管上皮细胞冷缺氧/复氧损伤的保护作用

目的观察羟基红花黄色素A(HSYA)对人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)冷缺氧/复氧(H/R)损伤的作用。方法HK-2细胞常规培养后分3组:对照组(sham组)、冷H/R组即细胞冷缺氧4 h后复氧4 h、HSYA预处理组即缺氧前0.5 h给予不同剂量(15、25、35、45、55、65、75μmol·L^(-1))的HSYA处理,其余同冷H/R组。倒置相差显微镜观察各组细胞形态;CCK-8法检测各组细胞存活率;电镜观察各组细胞超微结构。结果与sham组比较,冷H/R组细胞变圆,贴壁细胞数量减少,但经HSYA(25μmol·L^(-1))处理后细胞形态有所恢复,贴壁细胞数量增多;与sham组比较,冷H/R组细胞存活率明显下降[(100.00±0.09)%比(59.00±3.80)%,P<0.05];与冷H/R组比较,HSYA(25μmol·L^(-1))处理组细胞存活率显著增加[(59.00±3.80)%比(74.00±5.50)%,P<0.05];sham组见细胞质内线粒体、糖原较丰富,冷H/R组细胞质内见线粒体肿胀或固缩,次级溶酶体中含残存细胞器,糖原散在、减少,明显扩张的内质网;而HSYA预处理(25、35、55μmol·L^(-1)亚组)后细胞质内见自噬小体增多,其他4个亚组(15、45、65、75μmol·L^(-1)组)见糖原数量有所恢复且部分聚集。结论HSYA预处理对人肾小管上皮细胞冷H/R损伤具有保护作用,其最佳预处理浓度为25μmol·L^(-1),其作用机制可能与调节细胞自噬、线粒体功能和直接抗氧化有关。

羟基红花黄色素A对缺血再灌注损伤保护机制的研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)常见于创伤性休克、外科手术、器官移植等情况,严重影响患者的疾病预后。羟基红花黄色素A(HSYA)是中药红花中含量最高的有效单体成分,具有通经活血、止痛化瘀、抗炎、抗氧化、抗凋亡、抗血小板聚集等药理学作用,在心肌、脑、肝脏、脊髓等的IRI中具有保护作用。HSYA对IRI的保护作用与多个信号通路、多种机制有关,了解这些作用机制和信号通路不仅可以为IRI的发病机制研究提供理论基础,也可为今后的临床治疗提供新思路。

N-乙酰半胱氨酸调节低氧诱发因子1a／一氧化氮合酶信号通路对大鼠心脏移植缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察低氧诱发因子1a（hypoxia inducible factor 1a，HIF-1a）/一氧化氮合酶（iNOS）信号通路对大鼠心脏移植心肌缺血再灌注损伤的影响及N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）对供心的保护作用的可能机制。方法同系Lewis雄性大鼠60只，随机分为3组，每组各20只：对照组：获取供体心脏或受体大鼠移植前30 min，经供体或受体大鼠腔静脉注射0.9%盐水0.3 ml；NAC供体预处理组：获取供体心脏前30 min经供体大鼠腔静脉注入NAC 300 mg/kg.w；NAC受体预处理组：移植前30 min经受体大鼠腔静脉注入NAC 300 mg/kg.w。建立移植模型，移植后24 h后获取移植物。免疫组织化学法和Real time-PCR法检测供心心肌组织的iNOS、HIF-1a蛋白和mRNA表达。结果移植物中HIF-1a蛋白表达供、受体NAC预处理组与对照组比较差异有统计学意义（2.72±0.17、2.24±0.23 、3.14.±0.16，F＝56.26，P＝0.000），且均低于对照组（P均〈0.05），iNOS蛋白表达供、受体NAC预处理组与对照组比较差异有统计学意义（1.52±0.18、1.61±0.19 、3.30± 0.18，F＝232.345，P＝0.000），且均低于对照组（P均〈0.05）；移植后24 h移植物心肌组织HIF-1a、iNOS mRNA供、受体NAC预处理组及对照组比较，差异均有统计学意义（F值分别为7.467、16.490，P值分别为0.003、0.000），且NAC受体预处理组iNOS mRNA表达较对照组明显降低（P〈0.05）。结论HIF-1a/iNOS信号通路可以调控大鼠心脏移植缺血再灌注损伤，NAC对供体心脏的保护作用可能通过此通路起作用。