急性氨氮胁迫对于草鱼sod和hsp90基因表达及鳃部结构的影响(英文)

实验通过测定草鱼的24h半致死浓度,鳃的细胞结构以及sod和hsp90的表达模式研究了草鱼在组织学和分子生物学水平上对高浓度氨氮暴露的响应。经过半致死实验确定的氨氮24h LC50为243 mg/L试验中草鱼被置于5个浓度的处理组中(50、72、104、151、220 mg/L),之后取鳃组织进行组织切片分析,取肝脏、肠和鳃来测定sod和hsp90的表达情况。经过高浓度的氨氮暴露处理,鳃组织的细胞排列和结构产生了明显的变化,并且sod和hsp90的表达受到了显著的上调。这些结果表明,高浓度的氨氮能够损害鳃部的细胞结构并且诱导应激蛋白的表达。这个结果同样显示出,sod和hsp90可以作为评估草鱼氨氮暴露水平的良好指标。

绵羊白细胞介素2基因的克隆与表达载体构建

从绵羊血中分离白细胞,提取绵羊白细胞RNA,利用RT-PCR、PCR扩增绵羊白细胞介素2(OvineIL-2)基因。将OvineIL-2PCR产物与TE载体定向连接,用SaLI和BamHI双酶切重组TE,利用低溶点胶回收500bp大小的片段;将其补平后与PPSD质粒连接,用EcoRI酶切鉴定,找出正向连接重组质粒。用BamHI酶切重组PPSD质粒,低熔点胶回收2500bp大小的片段;将其与经BamHI酶切去磷酸化的PME290表达质粒连接,筛选出阳性重组PME290,即为OvineIL-2基因表达载体。