产酸克雷伯氏菌耐氧产氢及其可溶性氢酶耐氧特性研究

目的:考察产酸克雷伯氏菌(Klebsielal oxytoca HP1)耐氧产氢特性及其可溶性氢酶的氧耐受特性。方法:研究K.oxytoca HP1在不同气相氧浓度条件下利用葡萄糖(1%,m/v)、丙酮酸钠(0.5%,m/v)及甲酸(0.1%,v/v)等底物产氢活性的以及K.oxyto-ca HP1可溶性氢酶在空气及氧饱和溶液中催化产氢活性。结果:K.oxytoca HP1在葡萄糖(1%,m/v)底物中具有较高耐氧产氢活性,6h内在气相氧浓度为5%、10%和21%条件下的氢产量分别为厌氧条件下的20.9%、13.7%、8.3%;K.oxytoca HP1可溶性氢酶在空气中孵育12h后,其活性残余85.4%,在氧饱和溶液中活性损失一半约3h。结论:试验结果提示K.oxytoca HP1具有耐氧产氢特性,其可溶性氢酶具有较高氧耐受性,在氢能源的开发中具有潜在的应用前景。

发酵蔗渣糖化液产乙醇菌株的选育

利用纤维生物质生产生物燃料是解决当今世界能源和环境问题的重要途径.本研究从腐烂蔗渣、酒曲、酒糟等样品中分离到一批产乙醇菌株,通过高浓度乙醇选择性培养基筛选、TTC法复筛以及发酵乙醇能力分析,筛选得到一株发酵蔗渣糖化液能力较强的菌株.通过对菌落形态观察、电镜图片分析、18S rDNA基因序列分析,确定该菌株属于酿酒酵母属,命名为Saccharomyces cerevisiaeQ2-1.优化了S.cerevisiaeQ2-1发酵蔗渣糖化液产乙醇条件,当起始pH为5.5、发酵温度为30℃、糖化液中硫酸铵浓度为0.4%时,静置发酵60 h后,发酵率可达89.2%,蔗渣产乙醇率ω=13.6%.

灰绿曲霉β-葡萄糖苷酶的分离及特性

目的：利用灰绿曲霉EU7-22发酵产纤维素酶,从中分离到β-葡萄糖苷酶,分析其理化特性,确定其最佳活性条件。方法：灰绿曲霉EU7-22发酵液离心后,上清液经硫酸铵沉淀、Phenyl 6 Fast Flow（highsub）疏水层析和Sephacryl S-200凝胶层析,获得纯化的β-葡萄糖苷酶。结果：纯酶的比活性为5.1 IU/mg,得率为13.89%。SDS-PAGE凝胶电泳分析表明该酶是单亚基蛋白,其分子量为56.2 kDa。在pH4.0~6.0范围内,β-葡萄糖苷酶具有较高的稳定性,该酶的最适酶促反应pH为5.0。当β-葡萄糖苷酶在温度低于60℃的缓冲液中温育1 h后,酶活损失不大,表现了较好的稳定性;当该酶在温度高于60℃的缓冲液中温育1 h后,酶活迅速丧失。β-葡萄糖苷酶在70℃时具有最大催化活性。结论：灰绿曲霉EU7-22发酵产生的β-葡萄糖苷酶具有较高活性,具有分子量较小、最佳催化温度较高的特点。