基于NMR技术对Wilson病模型大鼠血清代谢组学研究

目的:以基于核磁共振(NMR)的代谢组学方法对Wilson病大鼠模型及正常对照组大鼠血清进行研究,分析血清中小分子代谢物的变化,从小分子代谢物层面上探讨Wilson病的内在机制,以更加清楚的认识本病。方法:22只雄性Wistar大鼠,体重(180±20)g,随机被分为模型组(n=11)和健康对照组(n=11),采用铜负荷法制作Wilson病大鼠模型,以核磁共振(NMR)技术对大鼠血清进行检测。采用MestRe-C 2.3软件及自编软件对谱图进行手动调相、基线校正和谱峰对齐。对样品进行分段积分,将积分数据归一化后构成数据矩阵,并利用PCA方法对数据矩阵进行统计分析。结果:相对于正常对照组,模型组大鼠血清甜菜碱(betaine)、氧化三甲胺(TAMO)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、葡萄糖(glucose)含量有显著降低,胆碱(choline)、胆碱磷酸(phosphorylcholine)的含量有所降低,乳酸(lactate)、谷氨酰胺(glutamine)、糖蛋白(glycoprotein)有显著升高,肌氨酸+肌氨酸酐(creatine+creatinine),精氨酸(arginine)有所升高。这些发生改变的代谢物可以作为WD的小分子代谢标志物,为进一步研究WD的内在代谢机制提供参考。

基于NMR技术对中药干预Wilson病模型大鼠的代谢组学研究

目的:以基于核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)的代谢组学方法对Wilson病(Wilson'sdisease,WD)模型大鼠及中药干预后的WD模型大鼠血清进行代谢组学研究,分析中药干预后大鼠血清中小分子代谢物的变化,从小分子代谢物层面上探讨中药治疗Wilson病的内在机制。方法:33只雄性Wistar大鼠,体重180±20g,随机被分为健康对照组(n=11),WD模型组(n=11)和中药干预组(n=11)。健康对照组自由摄水饮食,WD模型组和中药干预组采用铜负荷法制作Wilson病大鼠模型,以肝豆灵治疗中药干预组大鼠。采用NMR技术对大鼠血清进行检测,以MestRe-C 2.3软件及自编软件对谱图进行手动调相、基线校正和谱峰对齐。对样品进行分段积分,将积分数据归一化后构成数据矩阵,并利用PCA(Principle ComponentAnalysis)方法对数据矩阵进行统计分析。将健康对照组和WD模型组相对比,WD模型组和中药给药组相对比,以分析中药给药之后大鼠血清内小分子代谢物的变化。结果:相对于健康对照组,WD模型组大鼠血清甜菜碱(betaine),氧化三甲胺(TAMO)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、葡萄糖(glucose)含量有显著降低,胆碱(choline)、胆碱磷酸(phospho-rylcholine)有所降低,乳酸(lactate)、谷氨酰胺(glutamine)、糖蛋白(glycoprotein)有显著升高,肌酸酐(creatinine),精氨酸(arginine)有所升高。相对于WD模型组,中药干预组大鼠血清糖蛋白(glycopro-tein)、3-羟基丁酸(3-hydroxybutyrate)、脂质(Lipid,mainly VLDL/LDL)、葡萄糖(glucose)、胆碱(cho-line)、磷酸胆碱(phosphorylcholine)有显著升高,亮氨酸(leucine)、异亮氨酸(isoleucine)有所升高,乳酸(lactate)显著下降,谷氨酰胺(glutamine)、肌氨酸+肌氨酸酐(Creatine+creatinine)、精氨酸(arginine)有所下降。结论:这些发生改变的代谢物可以作为中药干预WD的小分子代谢标志物参考,为进一步研究中药治疗WD的内在代谢机制提供思路。

基于NMR技术对Wilson病模型大鼠尿液的代谢组学研究

目的:以基于核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)的代谢组学方法对Wilson病(Wilson's Disease,WD)铜负荷模型大鼠及正常对照组大鼠的尿液进行研究,分析模型大鼠尿液中代谢物的变化,继而从小分子层面探讨铜过量对机体的损伤机制,以更加清楚的认识本病。方法:28只雄性Wistar大鼠,体重(180±20)g,随机被分为模型组(n=14)和健康对照组(n=14)。采用铜负荷法制作Wilson病大鼠模型,以NMR技术对大鼠尿液进行检测。采用MestRe-C 2.3软件及自编软件对谱图进行手动调相、基线校正和谱峰对齐。对样品进行分段积分,将积分数据归一化后构成数据矩阵,并利用PCA方法对数据矩阵进行统计分析。结果:相对于正常对照组,模型组大鼠尿液醋酸盐(acetate)含量有显著升高,柠檬酸盐(citrate)、苯乙酰甘氨酸(PAG)、琥珀酸盐(succinate)、甲胺(methylamine)、肌氨酸+肌氨酸酐(creatine/creatinine)、丙酮酸盐(pyruvate)、二甲基甘氨酸(DMG)、丙氨酸(alanine)含量有所升高,胆碱(choline)、牛磺酸(taurine)含量有所降低。这些发生改变的代谢物可能是潜在的WD铜负荷小分子代谢标志物,可为进一步研究WD的铜过量代谢机制提供参考。