免疫法粪便隐血试验用于消化系统疾病的消化道出血评估研究

目的探讨免疫法粪便隐血试验在消化系统疾病患者出血评估的临床价值。方法回顾性分析厦门大学附属中山医院2009年1月—2010年6月住院的消化系统疾病患者免疫法粪便隐血检测结果,比较不同年龄、性别、疾病部位和疾病种类的阳性率差异。结果 1 500例消化系统疾病患者粪便隐血试验阳性率为35.3%(529/1 500),其中男性阳性率为37.6%(376/999),女性为30.5%(153/501),二者差异无统计学意义(χ2=7.37,P=0.07);大于70岁患者阳性率高于70岁以下,不同年龄组患者阳性率间差异有统计学意义(χ2=13.89,P=0.03);胃、结肠与直肠肿瘤患者粪便隐血试验阳性率分别为53.0%(70/132)、61.3%(38/62)和71.1%(32/45),与同组内其他非肿瘤疾病患者比较差异有统计学意义(P<0.05);消化道外的胰腺和肝胆疾病患者粪便隐血试验阳性率达到20%左右。结论免疫法粪便隐血试验对于胃、结肠、直肠等消化道肿瘤具有一定的辅助诊断价值;对于评估胰腺、肝胆等消化道外疾病的消化道出血情况也有一定的临床应用价值。

生物样本信息资源库的国内外研究进展

标准化的生物样本信息资源库是基因组、功能基因组等生命科学研究的关键源头，是将科研成果快速转化为医疗产品，应用到临床的重要保证，也是生物医药研发自主创新体系中至关重要的环节。英国、加拿大、挪威、瑞典、冰岛等国家早已建立了自己的生物样本信息资源库。

临床实验室体液样本库建设

生物样本库是临床医学、基础医学和转化医学研究的基石和重要推动力。临床实验室(检验科)以血液等体液为日常检测对象,拥有丰富的体液标本资源,在体液样本库建设中具有显著优势。临床实验室应推进生物样本库标准操作规程文件撰写,标准化、规范化建设体液样本库,以促进医学检验学科的科研、教学的发展。

环孢素A微乳巴布膏眼贴的制备及体外透皮实验

背景:免疫性眼病如甲亢性突眼、葡萄膜炎等疾病严重危害患者的眼健康,是眼科的常见病和疑难病,目前最常见的治疗方法为口服激素和免疫抑制剂,疗效不佳、反复发作、预后差同时全身不良反应很大。此类疾病多有淋巴细胞直接或间接参与。尝试把免疫抑制剂制作成巴布膏眼贴,通过局部外用使药物进入体内,利用环孢素A微乳的淋巴靶向性能,使环孢素A作用在睑周淋巴结,从而达到治疗或控制睑周淋巴结参与反应的免疫性眼病。这种方法为局部外用,不用全身用药,针对性强,药物剂量小,如果治疗效果好,可以有效治疗免疫性眼病并规避原有药物全身应用及长期应用的不良反应。目的:制备环孢素A微乳巴布膏眼贴,研究环孢素A微乳巴布膏眼贴体外透皮吸收特性。方法:将环孢素A微乳与聚丙烯酸钠、聚乙烯醇、聚乙烯吡络烷酮、明胶、桃胶、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素等的水溶性高分子材料混合物以1 mg∶1 mL的比例充分混匀,涂布于无纺布上制备成巴布膏。Franz扩散池法测定该巴布膏在ICR小鼠腹部皮肤的通透性。高效液相色谱分析法检测环孢素A浓度,并进行皮肤刺激性和过敏性实验。结果与结论:实验成功制备了粘性适宜、透气透水性能良好、敷贴舒适、无皮肤刺激性和过敏反应的环孢素A微乳巴布膏,环孢素A含量为10 mg/片,质量浓度为1 g/L。环孢素A微乳透皮的浓度随着时间的增加而增加,具有较好的透皮效果。证实将环孢素A微乳制备成巴布膏眼贴是可行的。其在透皮性能、黏附能力、皮肤舒适方面表现良好。

新型靶向治疗人表皮生长因子受体2过表达乳腺癌

乳腺癌（breast cancer）是一种多基因参与、多步骤发生的高度异质性肿瘤,其病理和组织学分类相同的患者对同一治疗的疗效反应存在很大的差别。随着分子生物学的发展,乳腺癌诊断从传统的病理学和组织学分类,走向了以分子标志物为基础的预测方案。乳腺癌的分子特征更精确预测疾病复发风险,指导治疗用药选择。

多重RT-PCR联合毛细管电泳法检测BCR-ABL融合基因

目的：建立多重逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）联合毛细管电泳法检测BCR-ABL融合基因，以期应用于慢性粒细胞白血病（CML）辅助诊断。方法采用重叠延伸法构建BCR-ABL融合基因阳性模板，设计并优化检测BCR-ABL融合基因的多重RT-PCR联合毛细管电泳体系，对检测体系进行初步的性能评估。结果多重RT-PCR技术检测BCR-ABL融合基因（e1a2、e13a2和e14a2）的最低检测限在102～103拷贝/μL；50例临床确诊CML的患者应用该法检测BCR-ABL融合基因的阳性率为86．0％，其中e13a2型（20．0％），e14a2型（66．0％）；本方法与骨髓细胞培养染色体核型分析相比，阳性符合率为97．6％，阴性符合率为75．0％，总符合率为94．0％，2种方法具有较高的一致性（Kappa＝0．765，P＞0．05）。结论成功建立检测BCR-ABL融合基因的多重RT-PCR联合毛细管电泳方法。该方法操作简单快捷、特异性好、灵敏度高，适合于临床上CML的辅助诊断和分子分型。

新型环状引物荧光定量PCR检测乳腺癌组织HER2基因mRNA表达方法的建立

目的研究建立一种基于实时荧光定量PCR技术和新型环状引物的简捷、准确、廉价、易于标准化检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2（HER2）基因mRNA表达水平的方法，为临床上肿瘤个性化分子靶向药物治疗提供用药指导。方法设计HER2和内参基因的新型特异性环状引物，通过Excel在乳腺癌组织标本中随机抽取5份标本检测候选内参基因的表达，同时用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件筛选和评估乳腺癌组织中稳定表达的内参基因，设置Mg“浓度和引物浓度梯度对PCR体系进行优化，建立乳腺癌HER2基因mRNA表达水平的新型环状引物EvaGreen染料实时荧光定量逆转录（FQRT）一PCR检测方法（以下简称“自建FQRT。PCR”法），并对其灵敏度、特异性、稳定性进行评价；同时用自建FQRT—PCR法与免疫组织化学（IHC）法平行检测2008至2012年厦门大学附属中山医院普外科收集的55份乳腺癌组织和其中32份同一患者匹配的正常组织（距癌组织1〉5cm）中HER2基因的表达水平，并评价自建FQRT—PCR法对乳腺癌的诊断效能。结果自建FQRT—PCR法对HER2基因和核糖体蛋白L37a（RPL37A）基因的最低检测限均为10^6拷贝／μl，线性范围均为10。～10。拷贝／pJ（r=0．997）；HER2和RPL37A基因的高、低浓度标准品（10^6拷贝／μl和10^1拷贝／μl）批内变异系数（CV）分别为（5．93±0．57）％和（5．11±0．59）％、（2．49±0．81）％和（2．984-0．97）％；批间CV为（5．76±0．58）％和（7．71±0．61）％、（3．75±0．76）％和（4．40±0．96）％。FQRT—PCR法与IHC法平行检测87份乳腺癌组织标本HER2基因表达水平，FQRT—PCR法的敏感度为96．36％（53／55），特异度为78．13％（25／32），阳性预测值为88．33％（53／60），阴性预测值为92．59％（25／27），与IHC检测结果总符合率为89．66％（78／87）。且与IHC法具有较高的一致性（Kappa=0．770，P〉0．05）。结论成功建立了FQRT—PCR检测乳腺癌HER2基因mRNA表达水平的方法，该方法敏感度高、特异度好且快速、价廉，适合临床检验实验室进行肿瘤标本的HER2基因表达检测。