敲除TRPC6对MPTP诱导小鼠神经炎性损伤的影响

目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑质区域的小胶质细胞,并通过蛋白质免疫印迹的方法检测TRPC6的表达。在构建CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠后,通过免疫荧光的方法检测MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及多巴胺能神经元的损伤。同时结合蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR的方法,在MPTP模型中检测TRPC6敲除后cryαB蛋白水平和炎症因子表达。结果在MPTP注射的小鼠中,小胶质细胞中TRPC6通道的表达显著上调。另外,在注射MPTP的CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠中,小胶质细胞中的cryαB蛋白水平被上调。同时,MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及炎症因子表达增强被抑制,而多巴胺能神经元的损伤得到缓解。结论小胶质细胞中TRPC6通道表达在MPTP模型中上调,而TRPC6的敲除可增加小胶质细胞中cryαB蛋白水平,并降低炎症因子的表达,从而减少多巴胺能神经元的损伤。

妊娠并发心脏病患者自然分娩的心血管风险评估体系的构建

目的构建适用于临床的妊娠并发心脏病患者自然分娩心血管风险评估体系,用于医护人员在妊娠并发心脏病患者自然分娩前进行评估,判断相关心血管疾病发生的可能性。方法选择2014年6月至2017年6月中国人民解放军第175医院自然分娩的200例妊娠并发心脏病患者心血管数据为研究对象。参照世界卫生组织(WHO)风险评估系统,通过前期对妊娠并发心脏病患者自然分娩进行问卷调查、专家访谈、文献查证和Meta分析,形成妊娠并发心脏病患者自然分娩心血管风险评估指标体系,采用改良德尔菲法对10位专家进行咨询和重要性评分,用Excel和SPSS软件计算各指标的权重并最终确定风险评估体系。结果依据妊娠并发心脏病患者心血管相关的风险因素,初步构建了由4个一级指标以及下设的31个二级指标的妊娠并发心脏病患者自然分娩心血管风险评估指标体系,其中Ⅰ度风险评估指标下设7个二级风险评估;Ⅱ度风险评估指标下设9个二级风险评估;Ⅲ度风险评估指标下设7个二级风险评估;Ⅳ度风险评估指标下设8个二级风险评估。结论初步建立了妊娠并发心脏病患者自然分娩心血管风险评估指标体系,能据此指标体系进行风险评估,从而根据不同患者的具体情况,有针对性地制定护理方案,最终达到预防和减少妊娠并发心脏病患者自然分娩心血管疾病的发生。

巨噬细胞LSD1抑制H3K9Me2水平增强动脉粥样硬化中血清炎症因子的表达

目的:检测动脉粥样硬化患者巨噬细胞中组蛋白第9位赖氨酸的二甲基化(histone H3 lysine 9 dimethylation,H3K9Me2)的表达并探究其对炎症因子表达的影响及其机制。方法:选择厦门大学附属东南医院收治的动脉粥样硬化患者(n=20)与健康对照人群(n=22)作为研究对象,采用蛋白免疫印迹方法检测巨噬细胞中H3K9Me2的表达,并通过酶联免疫吸附的方法检测其血清炎症因子表达。随后,通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减赖氨酸特异去甲基化酶1A(lysine-specific demethylase 1A,LSD1)后,在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoproteins,ox-LDL)诱导的巨噬细胞中结合白免疫印迹和染色质免疫共沉淀的方法检测细胞整体H3K9Me2的表达及炎症因子启动子区H3K9Me2水平。同时,分析巨噬细胞中上清中炎症因子表达变化。结果:动脉粥样硬化病人巨噬细胞中H3K9Me2水平显著下调,并与血清中炎症因子表达呈负相关。在敲减LSD1后,ox-LDL诱导的巨噬细胞中H3K9Me2整体水平以及炎症因子启动子区H3K9Me2水平下调均被抑制。同时,核因子-κB(NF-κB)结合启动子区介导的炎症因子表达增强也被抑制。结论:巨噬细胞中H3K9Me2的表达与动脉粥样硬化病人血清中炎症因子的表达成负相关,而组蛋白去甲基化酶LSD1很可能在其中参与H3K9Me2水平调控,并通过影响NF-κB与启动子区结合调节炎症因子表达。