环保试剂改善病理科工作环境

2013年医院进行三级甲等医院复评，病理科生物安全管理和职业防护，成了三甲复评的检查重点，其中病理废气、废液、医疗垃圾等的排放及其对环境造成污染的问题，包括病理废液必须交由具备相关资质的公司集中处置，均为检查重点。病理科的空气会受到相当程度的生物与化学制剂污染，其中甲醛、二甲苯等试剂是最常见、最主要和危害最大的污染源。因此，如何减轻病理科的空气污染是一个重要的研究课题。

基于微流控芯片技术的创伤弧菌特异性引物的筛选及验证

目的探讨适用于创伤弧菌的特异性引物,通过微流控芯片技术进行一站式检测,为快速检测出病原体奠定基础。方法通过NCBI网站获取靶基因序列,采用MEGA7.0软件对齐后设计出19对引物,BLAST确定引物的特异度,再通过引物性能、灵敏度、快速变温实验筛选适用于微流控的引物,最后对引物的特异度与灵敏度进行评价。结果成功筛选出1对适用于微流控的引物vvhA10,微流控检测结果发现其特异度与灵敏度较高。结论筛选出适用于微流控芯片的引物,用于全自动微流控检测可以满足应急检测或现场快速检测等方面的使用需求。

不同标本类型在非小细胞肺癌基因检测中的应用及意义

目的研究分析不同标本类型在非小细胞肺癌(NSCLC)患者的驱动基因检出率,并分析表皮生长因子受体(EGFR)、间变性淋巴瘤激酶(ALK)、C-ros原癌基因1-受体酪氨酸激酶(ROS1)、Kristen鼠肉瘤病毒原癌基因同源体(KRAS)、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌基因同源体B(BRAF)等驱动基因异常情况及与临床病理特征关系。方法收集2021年1月—2021年12月我院病理科明确诊断为NSCLC样本180例,包括手术切除标本25例,肺活检标本80例,恶性胸腔积液细胞蜡块标本29例,转移病灶标本46例,采用扩增阻滞突变系统(ARMS)法检测驱动基因突变状态。结果5种驱动基因的总突变率为53.33%(96/180),驱动基因突变可在不同标本类型中检出,不同标本间突变率比较差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR基因突变率40.56%(73/180),性别及组织类型突变率比较差异有统计学意义(P<0.05),年龄类型突变率比较差异无统计学意义(P>0.05);KRAS基因突变率6.11%(11/180),其中性别类型突变率比较差异有统计学意义(P<0.05),年龄与组织类型突变率比较差异无统计学意义(P>0.05);ALK融合基因突变率4.44/%(8/180),年龄、性别及组织类型突变率比较差异无统计学意义(P>0.05);BRAF基因突变率1.11%(2/180),ROS1融合基因突变率1.11%(2/180)。结论不同标本类型均可检出驱动基因,增加了临床基因检测的取样途径。NSCLC患者EGFR基因突变率明显高于其他驱动基因,EGFR基因突变与患者性别及组织类型有差异,KRAS基因突变与患者性别有差异;ALK、ROS1、BRAF基因突变率较低,但指导NSCLC治疗有重要意义。多基因联合检测可一次获取更多驱动基因突变信息,能够更快、更全面地指导临床治疗。

BRAFV600E基因突变与甲状腺微小乳头状癌临床病理特征的相关性

目的 探讨BRAF V600E 基因突变情况与甲状腺微小乳头状癌(papillary thyroid microcarcinoma,PTMC)临床病理特征的关系。方法 应用突变扩增阻滞系统(amplification refractory mutation system,ARMS)法检测173例PTMC的BRAFV 600E 基因突变情况,并分析其结果与PTMC患者的性别、年龄、肿瘤大小、病灶数、有无钙化、腺外浸润、淋巴结转移等临床病理特征的相关性关系。结果 173例PTMC患者中BRAF V600E 基因突变的突变率为60.12%(104/173),BRAF V600E 基因突变结果与肿瘤大小和淋巴结转移呈正相关(均 P <0.05),与患者的性别、年龄、病灶数、有无钙化和腺外浸润情况无关(均 P >0.05)。结论 BRAF V600E 基因突变可能与PTMC侵袭性生物学行为具有相关性,可为临床上手术方式的选择和患者预后判断提供一定参考价值。

肺上皮样血管内皮瘤的临床病理特征及预后

目的探讨肺上皮样血管内皮瘤(pulmonary epithelioid hemangioendothelioma,PEH)的临床病理特征、诊断及预后。方法对1例原发性PEH进行光学显微镜观察和免疫组织化学标记,并复习相关文献。结果本例以"脊柱畸形"收入院,患者无任何肺部症状。CT检查双肺多发结节,行肺部肿物切除活检术镜下见肿瘤呈边界清楚的嗜酸性结节,肿瘤细胞呈漩涡样排列,主要分布于结节周边,细胞边界不清,胞质丰富且为嗜酸性或嗜双色性,其内有大小不一的空泡,核多呈圆形或类圆形,核分裂相罕见,结节中央见片状分布的类似淀粉样变或玻璃样变组织,结节旁肺组织中肺泡腔扩张,部分肿瘤细胞伸入肺泡腔呈乳头状、肾小球样增生,间质血管增生、扩张、充血伴炎细胞浸润。肿瘤细胞表达CD34、CD31等血管内皮细胞标记。结论 PEH是一种罕见的肺低度恶性肿瘤,临床表现特异性不强,但其病理形态具有一定的特征性。本病预后与患者是否存在肺部血管浸润有关。

恶性心包积液细胞块病理检查的意义(附30例分析)

目的:通过心包积液中肿瘤细胞制作的细胞块进行疾病诊断和肿瘤来源的鉴别诊断,评价心包积液对临床诊断的价值。方法:30例恶性肿瘤并发恶性心包积液患者,心包穿刺引流积液送病理制作细胞块进行肿瘤来源的诊断,验证临床疾病的诊断。结果:30例恶性心包积液细胞块鉴别诊断病因中,肺癌21例,其中腺癌17例,鳞癌3例,小细胞未分化癌1例;乳腺癌4例;食管癌1例;结肠癌2例;红细胞太多,无法制作细胞块2例。结论:恶性心包积液细胞块留取对疾病的诊断有重要临床意义,对晚期肿瘤转移性心包积液确定原发灶提供病理诊断和临床肿瘤的治疗有积极的作用。

胃窦炎性纤维性息肉1例临床病理分析

炎性纤维性息肉（inflammatory fibroid polyp,IFP）,由黏膜下增生的梭形细胞、小血管及混合性炎性细胞组成,富于肥大细胞及嗜酸性粒细胞,血管或腺体周围出现“同心圆状”网状纤维为特征[1].Vanek[2]以“胃肠道黏膜下肉芽肿伴酸性粒细胞浸润”首次进行该现象的描述.Helwig等[3]第一次用IFP的名称,详细描述了其组织学特征.炎性纤维性息肉（IFP）非常罕见,Susann等[4]对120 000多例病人、约6 600枚胃息肉的研究显示,仅6例为IFP,在所有胃息肉中发病率＜0.1％.本文报道1例胃窦炎性纤维性息肉,并结合文献复习对其临床病理特征、病理学特点和鉴别诊断进行探讨.

膀胱绒毛状腺瘤1例临床病理分析

绒毛状腺瘤是一种发生于胃肠道的常见肿瘤,具有较高的恶变率,当瘤体长径≥2 cm时,恶变率高达50%[1]。而原发于膀胱的绒毛状腺瘤较为罕见,膀胱绒毛状腺瘤（villous adenoma of bladder）临床症状不典型,故临床易误诊为膀胱癌。为加深对本病的认识,本文报道我院收治的1例膀胱绒毛状腺瘤,结合文献总结分析其临床和病理学特点。

病理科常规技术工作中常见问题及防范对策

在医疗工作中,活体组织检查是诊断疾病最可靠的方法。病理学诊断能够明确疾病的性质,可以用于指导临床医生选择最佳治疗方案,并对患者预后判断有决定性意义。

miR-10b靶向PARK2调控乳腺癌对PD1抑制剂的敏感性

目的:探讨mi R-10b靶向结合E3泛素蛋白连接酶(PARK2)对乳腺癌细胞应用程序性死亡蛋白1(PD1)抑制剂敏感性的影响。方法:回顾性收集联勤保障部队第九〇九医院2010年1月—2015年12月收治的146例乳腺癌患者的病例资料。PCR实验分析癌组织和癌旁组织中mi R-10b相对表达量;根据癌组织中mi R-10b表达水平中位数将146例乳腺癌患者分为mi R-10b高表达组和mi R-10b低表达组,绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析癌组织中mi R-10b表达水平与患者预后相关性;荧光素酶实验分析mi R-10b与PARK2的关系,Person线性回归分析癌组织中mi R-10b表达水平与PARK2表达水平相关性;根据癌组织中PARK2表达水平中位数将146例乳腺癌患者分为PARK2高表达组和PARK2低表达组,Western blot方法分析PARK2低表达组与PD1蛋白水平性相关性;培养人乳腺癌细胞系,转染mi R-10b mimic(模拟物)使细胞中PARK2处于低表达,再通过转染mi R-10b mimic(模拟物)和mi R-10b inhibitor(抑制物)将细胞分为PARK2低表达+mi R-10b mimics组和PARK2低表达+mi R-10b inhibitor组,MTT法分析调控mi R-10b表达水平对乳腺癌细胞增殖能力和对PD1抑制剂敏感性的影响。结果:mi R-10b在乳腺癌组织中表达水平高于对应的癌旁组织(1.61±0.77比1.35±0.98,P<0.01);乳腺癌组织中mi R-10b高表达提示预后不良(P<0.01);mi R-10b靶向结合PARK2,乳腺癌组织中mi R-10b表达量与PARK2表达量呈负相关(r=-0.419,P<0.01);PARK2低表达组中PD1蛋白质表达较PARK2高表达组上调(灰度比值1.44±0.79比1.05±0.98,P<0.01);mi R-10b高表达使乳腺癌细胞系增殖能力上调(P<0.01),对PD1抑制剂敏感性下调(P<0.01)。结论:高表达mi R-10b提示乳腺癌预后不良,并降低对PD1抑制剂敏感性,机制可能与PARK2信号通路相关。

肺癌胸水细胞块与组织学EGFR基因扩增检测对比研究

目的:对比肺癌胸水细胞块与组织学中EGFR基因扩增情况,探讨非小细胞肺癌患者阳性胸水细胞块检测EGFR基因扩增情况及临床意义。方法:收集60例非小细胞肺癌患者阳性胸水离心获取肿瘤细胞制作成石蜡细胞块,其中有28例的组织学对照,免疫组化分型后进行FISH检测EGFR基因,荧光显微镜观察基因扩增情况。结果:28例细胞块有组织学EGFR基因检测对照,在有组织学对照细胞块EGFR基因检测相符率100%。肺腺癌31例中,EGFR基因簇状扩增4例(12.9%),点状扩增14例(45.2%),无扩增13例(41.9%),肺腺癌扩增率为58.1%;肺鳞癌25例中,EGFR基因簇状扩增2例(8.0%),点状扩增9例(36.0%),无扩增14例(56.0%),肺鳞癌扩增率为44.0%;其他类型NSCLC患者4例中2例点状扩增,扩增率为50%。结论:肺腺癌及肺鳞癌胸水细胞块EGFR检测结果与组织学一致,EGFR基因在肺腺癌的扩增率高于肺鳞癌。应用FISH技术检测胸水细胞块中的EGFR基因扩增情况具有临床应用价值。

血性胸腔积液细胞块制作方法研究及其应用

目的:探讨一种适合血性胸腔积液的细胞块制作方法。方法:收集细胞学涂片中见到肿瘤细胞的血性胸水48例,分别用直接离心沉淀法、去红细胞离心沉淀法和富集有核细胞层沉淀法制作细胞块,对三种方法获得的细胞块的HE染色效果、免疫组化效果及提取DNA的合格率进行比较。结果:直接离心沉淀法、去红细胞离心沉淀法、富集有核细胞层沉淀法制作细胞块的提取DNA合格率分别为72.9%(35/48)、85.4%(41/48)和93.8%(45/48),富集有核细胞层沉淀法提取DNA的合格率明显高于直接离心沉淀法,两者合格率差异有统计学意义(P<0.01)。富集有核细胞层沉淀法提取DNA的合格率高于去红细胞离心沉淀法,但两者合格率差异无统计学意义(P>0.05)。HE、免疫组化效果富集有核细胞层沉淀法最好,去红细胞离心沉淀法次之,直接离心沉淀法最差。结论:血性胸水细胞块推荐的方法依次是富集单个核细胞层沉淀法、去红细胞离心沉淀法、直接离心沉淀法。

胸水细胞块EGFR基因突变检测在非小细胞肺癌中的临床意义

目的探讨应用实时荧光定量PCR方法检测非小细胞肺癌阳性胸水细胞块EGFR突变的临床意义。方法收集具有组织标本作为对照的非小细胞肺癌阳性胸水60例,制作细胞块,提取DNA,应用实时荧光定量PCR法同时对细胞块和组织标本的EGFR第19外显子(19-Del)和21外显子(L858R)突变进行检测,分析细胞块与组织标本的EGFR突变率的差异。结果胸水细胞块中EGFR突变率为35%(21/60),其中19-Del突变11例,L858R突变9例,19-Del和L858R双突变1例;组织标本中EGFR突变率为36.7%(22/60),其中19-Del突变12例,L858R突变9例,19-Del和L858R双突变1例。两种标本的EGFR突变率差异无统计学意义(P>0.05);胸水细胞块EGFR突变类型与其对应的组织标本相一致。结论胸水细胞块与组织样本在EGFR基因突变上具有较高的一致性。

液基薄层细胞涂片在胸腹水诊断中的应用价值

目的探讨液基薄层细胞涂片法在胸腹水诊断中的应用价值。方法选取临床科室送检的可疑阳性胸腹水107例,分别采用液基薄层细胞涂片法和传统细胞涂片法制片,必要时分别行免疫细胞化学染色,比较两种方法的涂片质量及恶性肿瘤的确诊率。结果应用液基薄层细胞涂片技术获得的细胞涂片及免疫细胞化学染色效果均优于传统涂片法,统计结果显示液基薄层细胞涂片法的恶性肿瘤确诊率为30.8%,高于传统细胞涂片法的11.2%,两组确诊率差异有统计学意义(P<0.05)。结论液基薄层细胞涂片法在胸腹水诊断中可以提高恶性肿瘤确诊率,且涂片质量、染色效果均优于常规涂片法。

TTF-1、CK7在胸水细胞块中鉴别肺腺癌诊断的应用

目的探讨TTF-1、CK7在胸水细胞块中鉴别肺腺癌中表达的敏感性和特异性及在肺腺癌诊断中的应用。方法临床资料和影像学资料诊断为肺癌的病人,胸水离心涂片中见到癌细胞,胸水再离心制成细胞块,HE显微镜观察有肿瘤细胞,进行免疫组化Max Vision法检测TTF-1及CK7等抗体。结果10例肺癌中有7例肺腺癌和1例肺小细胞癌都表达TTF-1、CK7;2例肺鳞癌中TTF-1、CK7不表达。结论 TTF-1、CK7在肺腺癌中表达有较高的敏感性和特异性,胸水细胞块诊断后,可作为鉴别肺腺癌的可靠标记抗体。

肺腺癌胸腔积液上清液和细胞块EGFR基因突变检测的临床意义

目的比较应用高分辨率熔解曲线(HRM)方法检测肺腺癌胸腔积液上清液和细胞块表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状态,为寻找有效的胸腔积液成分进行EGFR基因突变检测提供依据。方法收集2010年9月—2013年5月临床送检肺腺癌胸腔积液标本43例的上清液和细胞块,分别提取DNA,应用HRM方法检测其EGFR基因第18、19、20、21外显子突变情况。结果胸腔积液上清液与细胞块EGFR基因突变率差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR基因突变均为第19、21外显子突变,第21外显子基因突变上清液与细胞块结果完全一致。第19外显子基因突变两者略有不同。结论肺腺癌胸腔积液上清液和细胞块均可用于检测其EGFR基因突变状态,但存在假阴性的可能和肿瘤异质性,故建议EGFR检测前兼顾细胞学及HE结果。

不同固定方法对胸水细胞块组织形态及免疫细胞化学的影响

目的:探讨不同固定液对细胞块的固定效果和免疫细胞化学标记的影响,寻找一种理想的细胞块的固定液及制作方法。方法:利用4%中性甲醛、乙醇乙醚(1∶1)混合固定液、丙酮三种不同固定液对同一阳性胸水进行固定,制作出细胞块3μm切片,行HE和免疫细胞化学染色,观察染色效果和抗体标记情况。结果:4%中性甲醛固定细胞块HE染色鲜艳清晰,细胞无变性,免疫标记定位准确清晰;乙醇乙醚固定HE染色鲜艳,细胞略有变性,免疫标记欠佳;丙酮固定HE染色鲜艳,细胞略有萎缩变性。结论:在病理制片过程中,固定相当重要,在细胞块的固定液选择中,通过对比,4%中性甲醛是胸水离心细胞块最理想的固定液。

HRM方法检测肺腺癌患者癌性胸水上清液EGFR基因突变的临床意义

目的:探讨应用HRM方法检测肺腺癌患者癌性胸水上清液EGFR基因突变状况及EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂治疗的可行性。方法:收集43例肺腺癌患者癌性胸水上清液标本,提取DNA,应用HRM方法检测EGFR基因第18、19、20、21外显子突变状况。统计分析HRM方法与基因测序法检测EGFR突变率的差异。结果:43例肺腺癌患者癌性胸水上清液中,HRM法检测EGFR基因突变共17例,总突变率为39.53%,其中第19外显子突变14例,第21外显子突变3例。基因测序结果显示:EGFR突变14例,总突变率为32.56%,均为第19外显子突变。HRM方法检测第21外显子突变阳性的患者其基因测序结果均为阴性。这可能与HRM方法检测的灵敏度优于测序方法有关。两者突变率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对难以获取组织标本的肺腺癌患者而言,应用HRM方法检测其癌性胸水上清液,是了解其EGFR基因突变状况的可靠途径,对临床筛查靶向治疗药物具有一定的参考价值。

不同类型人乳头瘤病毒多重感染与宫颈病变的相关性研究

目的探讨不同类型人乳头瘤病毒(HPV)多重感染与宫颈病变的相关性。方法应用基因芯片技术对200例宫颈病变患者石蜡组织标本进行24种HPV基因型进行检测,以组织病理学诊断作为宫颈病变确诊的金标准为依据。结果 200例标本中,HPV总感染率为51.50%(103/200),其中慢性宫颈炎、鳞状上皮内低度病变(CIN1)、鳞状上皮内高度病变(CIN3)和宫颈鳞状细胞癌的HPV感染率分别为22/57(38.60%)、12/33(36.36%)、44/81(54.32%)、25/29(86.21%),与宫颈病变密切相关(P<0.01);不同宫颈病变中单一HPV感染率明显高于多重HPV感染率(P<0.05);高危型单一感染组HPV感染率与宫颈病变不相关(P>0.05),多重感染、高危型感染、高危型多重感染、低危型多重感染、高低混合型多重感染的各组HPV感染率在不同级别宫颈病变差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HPV感染率与宫颈病变的不同程度密切相关,持续高危型感染HPV和多重感染HPV是加重宫颈病变的重要因素。

K-ras、Livin在不同胃黏膜病变中的表达及临床意义

目的探讨K-ras、Livin在不同胃黏膜组织中的表达,并分析其与胃癌发生发展及预后的关系。方法采用SP免疫组化方法检测胃癌90例及高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变、肠上皮化生、浅表性胃炎、正常胃黏膜各30例的6组不同胃黏膜组织K-ras、Livin表达,进行临床病理相关性分析。结果 1随着胃组织的病变发展,在浅表性胃炎、肠上皮化生、上皮内瘤变、胃癌中K-ras、Livin的阳性表达率均呈逐渐增加(0,23.3%,28.3%,68.9%,P<0.001;0,13.3%,23.3%,57.8%,P<0.001),但低级别上皮内瘤变组低于肠上皮化生组(13.3%vs 23.3%;10.0%vs 13.3%),而低级别上皮内瘤变、肠上皮化生、浅表性胃炎、正常胃黏膜四组之间差异不显著(13.3%,23.3%,0,6.7%,P>0.05;10.0%,13.3%,0,13.3%,P>0.05),高级别上皮内瘤变明显高于低级别上皮内瘤变(43.3%vs 13.3%,P<0.05;36.7%vs 10.0%,P<0.05)。2在90例胃癌中K-ras、Livin阳性表达率显著高于低级别上皮内瘤变、肠上皮化生、浅表性胃炎和正常胃黏膜(P<0.01),明显高于高级别上皮内瘤变(P<0.05);在胃癌中K-ras、Livin表达与年龄、分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。3240例不同胃黏膜病变中K-ras与Livin二者之间表达呈正相关(P<0.001),K-ras(+)Livin(+)者在胃癌浸润深度T3-T4和淋巴结转移的比率最高,且明显高于K-ras(-)Livin(-)者(P<0.05)。结论 K-ras、Livin表达均与胃癌的发生发展及预后有关,二者可作为较为理想的肿瘤标志物,用于胃癌早期诊断和转移的预警。