构建糖尿病膀胱病豚鼠模型及其尿动力学评价

背景:糖尿病性膀胱病是糖尿病患者最常见的慢性并发症之一,建立糖尿病膀胱病动物模型为相关研究提供实验动物平台。目的:建立糖尿病膀胱病豚鼠模型并进行尿动力学评价。方法:50只英国种短毛雌性豚鼠,实验组(n=42)以单次腹腔注射链脲佐菌素法诱导糖尿病豚鼠,对照组(n=8)注射相应剂量空白枸橼酸缓冲液,分别在9周和12周时行尿动力学检查,确定膀胱功能失代偿豚鼠即糖尿病性膀胱病组和代偿豚鼠即代偿组豚鼠尿动力学特点。结果与结论:42只豚鼠有20只成功诱导出糖尿病。糖尿病豚鼠中,9周时9只糖尿病组豚鼠,6只膀胱功能代偿,3只失代偿;12周时,另外9只糖尿病组豚鼠,1只膀胱功能代偿,8只失代偿(89%)。糖尿病性膀胱病组豚鼠残余尿量增加(0.72±0.08)mL、最大逼尿肌压下降(0.63±0.05)kPa、膀胱容量增加(2.01±0.05)mL及膀胱顺应性增加(3.47±0.41)mL/kPa,与对照组及代偿组比较,差异均存在显著性意义(P<0.001)。豚鼠一般可在诱导糖尿病成功后12周发生糖尿病性膀胱病,表现出膀胱残余尿量增加等相应的尿动力学改变。

非酒精性脂肪性肝病模型大鼠饮食或二甲双胍干预后肝视黄醇结合蛋白4表达

背景:目前关于血清视黄醇结合蛋白4在非酒精性脂肪性肝病中的表达水平仍存在争议。目的:研究饮食或二甲双胍干预对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏视黄醇结合蛋白4表达的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为6组,8周对照组,正常饮食8周后处死;8周高脂组,高脂饮食8周制作非酒精性脂肪性肝病模型,随后处死;16周对照组,正常饮食16周后处死;16周高脂组,高脂饮食16周后处死;饮食干预组,8周高脂饮食后再正常饮食8周,随后处死;二甲双胍治疗组,8周高脂饮食后,继续8周高脂饮食,同时给予二甲双胍灌胃治疗,随后处死。采用ELISA法检测血清视黄醇结合蛋白4水平及生化指标,免疫组织化学法、Western blotting法、RT-PCR法检测肝脏组织视黄醇结合蛋白4表达。结果与结论:高脂饮食成功建立非酒精性脂肪性肝病大鼠模型,随造模时间延长,大鼠肝脏由单纯性脂肪肝逐渐进展成为脂肪性肝炎。饮食干预可改善高脂饮食引发的肝组织视黄醇结合蛋白4表达下降、肝功能异常、脂代谢紊乱和胰岛素抵抗,二甲双胍治疗仅改善了高脂饮食引发的肝脂肪变。结果表明肝组织视黄醇结合蛋白4表达的改变可能在非酒精性脂肪性肝病发病中起一定作用,饮食干预应作为防治非酒精性脂肪性肝病的基本措施,二甲双胍可以改善非酒精性脂肪性肝病的肝脂肪变。

脂质体介导的CD/5-FC自杀基因体系协同干扰素体内抑瘤及旁观者效应的观察

目的观察阳离子脂质体介导的CD/5-FC自杀基因体系协同γ-干扰素活体内对肿瘤的抑制效应及远端旁观者效应。方法采用阳离子脂质体介导CD基因瞬时转染小鼠肝癌H22及未转染的H22细胞,分别接种于昆明小鼠双侧前腋下皮下;向小鼠体内注射5-FC及γ-干扰素,观察在γ-干扰素协同作用下5-FC对转染瘤体的抑制作用和远处无转染瘤体的抑制即远端旁观者效应。结果5-FC对转染CD基因侧瘤体抑制明显,抑制率为79.39%(P<0.05);在γ-干扰素的协同下CD/5-FC的抑瘤作用得到了增强,抑制率为93.47%,与无γ-干扰素协同相比,对癌细胞抑制作用明显增强(P<0.05);存在远端旁观者效应,远端未转染瘤体的抑制率为54.42%(P<0.05);在γ-干扰素的协同下远端旁观者效应得到显著增强,抑制率达到88.43%。同无γ-干扰素相比有差异有显著性(P<0.05)。结论体内CD/5-FC自杀基因体系联合γ-干扰素对肝癌细胞有更好的抑制效应,对肝癌的治疗有很好的应用前景。

CO_2气腹对腹膜炎大鼠的肠道内毒素细菌移位的影响

目的探讨不同程度CO2气腹对腹膜炎大鼠肠道内毒素细菌移位的影响。方法采用PUC18质粒载体大肠杆菌(JM109)示踪法,将质粒菌JM109定植于大鼠肠道后,腹腔内注入盐酸建立无菌的急性腹膜炎大鼠模型,48只大鼠随机均分为3组,分别为对照组、5mmHgCO2气腹组、15mmHgCO2气腹组。每间隔1h抽股静脉血测内毒素含量;气腹3h后,取门静脉血、肠系膜淋巴结作细菌培养,对耐氨苄青霉素菌株进行酶切分析及琼脂糖凝胶电泳;并测回肠黏膜及门静脉血中分泌型免疫球蛋白A含量。结果气腹1h后,15mmHgCO2气腹组股静脉血内毒素含量开始显著升高(P<0.01),并随气腹时间延长而进行性升高;气腹3h后,15mmHgCO2气腹组门静脉血和肠黏膜SIgA含量明显低于对照组(P<0.01),肠道大肠杆菌(JM109)至门静脉血的移位率分别为0、25%、50%,至肠系膜淋巴结的移位率分别为12.5%、25%、75%。结论CO2气腹能够促进腹膜炎大鼠的肠道内毒素细菌移位,CO2气腹压为15mmHg时作用更明显。

大肠癌ER、PR表达和DNA倍体、p53基因的检测及其临床意义

目的:探讨大肠癌(Colorectal cancer)、雌激素受体(Estrogen receptor,ER)、孕激素受体(Progesterone receptor,PR)表达和DNA倍体、p53基因的检测结果与临床分类、预后评估的关系。方法:采用RBA法、免疫组织化学方法和流式细胞术对286例大肠癌标本分别进行ER、PR表达和p53基因检测及DNA倍体分析并结合患者的临床资料进行分析。结果:ER、PR表达和p53基因检测及DNA倍体分析与大肠癌患者预后均有明显相关,差异有极显著性意义(P<0.01)。DNA二倍体、p53基因表达越低其患者预后越好;ER、PR的表达越强说明肿瘤与激素依赖性越强,肿瘤的生物学行为较好。结论:大肠癌ER、PR表达和p53基因检测及DNA倍体分析有助于大肠癌患者的临床分类及预后评估。

靶向性双自杀基因治疗载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK构建的初步研究

目的构建由癌胚抗原启动子(CEA promoter,Cp)驱动的靶向性双自杀基因治疗载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK,并观察其在CEA阳性大肠癌细胞中专一性表达和对增殖的影响。方法采用PCR分别扩增出Cp、CD、TK三种目的基因并采用双酶切、连接依次将Cp、CD、TK基因插入pcDNA3.1(-)质粒;将靶向性载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK分别转染CEA阳性的人大肠癌SW480细胞和CEA阴性的Hela细胞,采用RT-PCR检测CD-TK基因的表达。用MTT法检测转染pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK后的SW480细胞对化疗前药5-氟胞嘧啶(5-Fc)和丙氧鸟苷(GCV)的敏感性。结果Cp基因片段、CD基因片段和TK基因均克隆正确。靶向性基因治疗载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK经凝胶电泳和DNA测序证实构建正确。转染了靶向性载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK的SW480细胞经过RT-PCR鉴定证实有CD-TK基因的表达,CEA阴性Hela细胞则没有CD-TK基因的表达。细胞培养试验中,转染了靶向性载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK的SW480细胞对前药5-Fc和GCV敏感。结论正确构建了靶向性双自杀基因治疗载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK,靶向性双自杀基因治疗载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK能够使CD-TK基因在CEA阳性细胞中专一性表达,达到靶向杀伤大肠癌细胞目的。

区域灌注加腹腔低渗热化疗预防胃癌术后复发和转移的临床研究

目的探讨区域灌注加腹腔低渗热化疗对预防胃癌术后复发和转移的价值。方法将136例实行根治术的胃癌患者随机分成两个组。治疗组(68例):术后行区域动脉灌注化疗加腹腔低渗热化疗;对照组(68例):术后行全身静脉化疗,比较两组疗效。结果随访5年,治疗组1、3、5年生存率分别为94.1%(64/68)、77.9%(53/68)、54.4%(37/68);对照组分别为75.0%(51/68)、51.5%(35/68)、29.4%(20/68)。治疗组局部复发率、腹膜转移率、肝转移率和骨髓抑制发生率分别为10.3%(7/68)、19.1%(13/68)、22.1%(15/68)、17.6%(12/68);对照组分别为25.0%(17/68)、45.6%(31/68)、47.1%(32/68)、36.8%(25/68)。两组指标比较,有非常显著性差异(P<0.01)。结论区域动脉灌注化疗结合腹腔低渗热化疗能有效防治胃癌术后局部复发和腹膜转移、肝转移,疗效好于全身静脉化疗,且副作用小。

生长激素加营养支持对COPD发作期病人营养及免疫功能的影响

目的探讨生长激素加营养支持对慢性阻塞性肺病(COPD)发作期病人营养及免疫功能的影响。方法将126例COPD病人分成两组,A组营养支持加生长激素治疗,B组传统的标准饮食。A组炎症控制3天后开始应用生长激素(GH),每天5IU,连续应用1周。2周后测定病人的多项营养指标及T细胞亚群。结果2周后A组病人转铁蛋白、前白蛋白、视黄醇结合蛋白明显高于B组(t>2.36,P<0.05)有显著差异。T细胞亚群亦增加,与B组比较(t>2.26,P<0.05)有显著差异。结论COPD病人营养支持能迅速改善病人营养状态,减少并发症,适量应用生长激素能促进蛋白合成,增强免疫功能。

肺心病病人外周血血小板活化状况的研究

目的研究肺心病血小板活化与外周血的关系。方法应用单克隆抗体法并在流式细胞仪上对血小板活化因子CD62P、P10进行检测,同时跟踪检测病人血气和呼吸功能,以了解它们之间关系。结果肺心病病人血小板异常活化,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。血小板活化程度与PaO2、呼吸功能呈显著负相关。结论血小板异常活化能加重肺心病病情,应用抑制血小板活化药物和适当抗凝可能有利于肺心病疗效的提高。

脑AVM的治疗时机和方法的选择

目的探讨脑AVM的治疗时机和方法的选择。方法对63例脑AVM的治疗时机和方法进行分析。手术切除50例,除部分急诊手术外均在显微镜下完成;对重要功能区的脑AVM行血管内栓塞8例,3例术前栓塞,3例栓塞完全,2例栓塞不全行伽玛刀治疗;直接行γ-刀治疗2例。结果44例全切,6例部分切除,均经病理检查证实为脑AVM。8例血管内栓塞治疗显示畸形血管3例消失、5例缩小50%以上;γ-刀治疗4例,见AVM血管影变淡、缩小,周围残留放射反应区。全组随访3个月-9年,效果良好41例,占65.1%;轻残13例,占20.6%;重残6例,占9.5%;术后死亡3例,占4.8%。结论显微手术是脑AVM的主要治疗方法。血管内栓塞是主要而获显效的方法之一,对大型、复杂的AVM栓塞与手术结合是较佳方案。对小型、深部、功能区难以切除及不能接受手术或栓塞者γ-刀治疗更具有治疗适应证。

磁共振成像在未婚女性多囊卵巢综合征诊断中的应用

多囊卵巢综合征（PCOS）是一种以稀发排卵或无排卵、不孕、肥胖等为主要表现的综合征.鹿特丹PCOS会议[1]提出的PCOS卵巢多囊样改变（PCO）的超声诊断标准为：单侧或双侧卵巢含有12个或以上直径2～9 mm的卵泡和/或卵巢体积≥10 ml.经阴道超声检查（TVUS）被用于PCOS的诊断;但对于未婚（无性生活史）女性的PCOS患者,TVUS并不适用.本研究主要探讨MRI在未婚女性PCOS诊断中的应用.

斑点追踪技术评价心房颤动患者左心房重构及预测射频消融术疗效的研究

目的应用斑点追踪技术评价持续性心房颤动（房颤）患者左房结构功能变化，并对经导管射频消融术6个月后房颤复发的可能性进行临床预测研究。方法对25例健康志愿者和45例持续性房颤患者的左房结构功能及应变率进行分析，分别于经导管射频消融术前1周、术后24h、术后3个月、术后6个月测量并计算左房前后径（LADI）、左房面积（LAAI）、左房最大容积（LAVImax）、左房射血分数（LAEF）和左室收缩期左房应变率（SRs）、左室舒张早期左房应变率（SRe）、左房收缩期应变率（SRa）及左房壁15节段的平均应变率。结果①与对照组相比，房颤组LADI、LAAI、LAVImax均明显增大，LAEF、左房壁SRs、SRe及左房壁平均SRs、SRe均明显减低，左房壁SRa及平均SRa均消失。②房颤组术后恢复窦性心律并随访至6个月，LADI、LAAI、LAVImax逐渐减小，LAEF、左房壁SRs、SRa、SRe及平均SRa、SRs、SRe均逐渐增高。③平均SRs预测房颤术后维持窦性心律的优势比、95％CI及校正P值分别为0．607、0．471-0．819、0．017。结论斑点追踪技术可定量评价持续性房颤患者射频消融术前后左房功能的动态演变过程；反映左房整体储存功能的左房平均SRs可以预测持续性房颤患者射频消融术后近期疗效。

甲磺酸阿帕替尼片引起间质性肺疾病致死亡

1例53岁女性各型驱动基因阴性晚期肺癌患者接受培美曲塞二钠+顺铂方案2个周期(21 d为1个周期)化疗无效后,给予甲磺酸阿帕替尼片(阿帕替尼)500 mg/d口服。22 d后因患者出现手足皮肤反应而将阿帕替尼减至250 mg/d维持治疗。治疗7个月后,患者肺部肿瘤病灶缩小,但出现气促,CT检查显示双肺间质纤维化。停用阿帕替尼并给予激素治疗,患者症状进行性加重。停药第32天,复查CT显示患者双肺间质纤维化加重,出现Ⅰ型呼吸衰竭,给予甲泼尼龙500 mg/d静脉滴注及吸氧等处置,病情仍恶化。停药第37天,患者死亡。

干细胞、肿瘤干细胞与肿瘤

干细胞是一种具有自我更新、无限增殖和多向分化能力的细胞。而多数肿瘤是由不同增殖潜能的不均一性细胞构成。随着对干细胞的研究不断深入,使人们对肿瘤的发生机制重新进行了审视,并在造血系统、脑、肺、乳腺等部位肿瘤中发现极少量的具有与干细胞非常类似生物学特性的细胞,称之为肿瘤干细胞,它们很可能是肿瘤细胞的起源.肿瘤干细胞的提出,使得靶向性杀伤肿瘤干细胞从而使根治肿瘤和防止肿瘤复发和转移成为可能。所以研究肿瘤干细胞的起源及其与肿瘤的发生关系,成为当前研究和治疗肿瘤领域的新热点。本文就肿瘤干细胞的存在证据、干细胞与肿瘤干细胞的异同点及它们与肿瘤发生之间的关系作简要的综述。

脂联素及其受体在肝细胞性肝癌组织中的表达

目的 探讨脂联素及其受体——脂联素受体1（AdipoR1）、脂联素受体2（AdipoR2）和T-钙黏蛋白（T-cadherin）的表达与肝细胞性肝癌（HCC）临床病理特征的关系.方法 免疫组织化学法检测脂联素及其受体在42例HCC交界组织（含癌组织及癌旁组织）的表达.结果 脂联素（2.88±1.06比5.98 ±0.95）、AdipoR1（2.36±1.38比5.43±1.04）、AdipoR2（2.29±1.55比5.14±1.22）及T-cadherin（2.17±1.34比5.21±1.18）在HCC癌组织中的表达低于癌旁组织,且在伴有癌栓的癌组织中表达亦显著降低.脂联素（2.30±1.16比3.06 ±0.98）、AdipoR2（1.20±1.48比2.63±1.43）在伴卫星灶的癌组织表达低于不伴卫星灶的癌组织;直径＞5 cm的癌组织中T-cadherin表达（1.59±1.33）低于直径≤5 cm的癌组织（2.56±1.23）.结论 脂联素及其受体表达下调可能在HCC肝内转移过程中起一定作用.

盐酸埃克替尼致便血

1例68岁女性患者因肺癌并全身多发骨转移口服盐酸埃克替尼0．125mg，3次／d。第2天患者出现少量鲜血便，约20ml，遂自行停药。第3天便血停止。第4天，遵医嘱再次按原剂量口服盐酸埃克替尼。第5天，患者排鲜血便3次，出血量约100～150ml，实验室检查示PLT43×10^9／L（服药前37×10^9／L），Hb119g／L（服药前132g／L）。再次停用盐酸埃克替尼，观察4d，患者未再便血。

肝干细胞来源的研究进展

从广义上讲，肝干细胞并非特指某一类细胞，而是与肝脏胚胎发育及再生有关的各类具有干细胞特性细胞类型的总称，是一种具有分化为成熟肝细胞和胆管细胞能力和自我更新能力的多潜能干细胞。根据其起源的不同，通常可分为肝源性肝干细胞和非肝源性肝干细胞。

二甲双胍对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织T-钙黏蛋白表达的影响

目的探讨二甲双胍对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织T-钙黏蛋白表达的影响,为临床研究提供参考。方法雄性SD大鼠40只随机分组,NC1组:8周正常饮食组;NC2组:16周正常饮食组;HFD1组:8周高脂饮食组;HFD2组:16周高脂饮食组;HFD+M组:二甲双胍治疗组,即16周高脂饮食同时给予二甲双胍治疗8周。免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肝组织T-钙黏蛋白的蛋白和mRNA表达水平。结果 HFD+M组大鼠肝组织的NAFLD活动度评分(NAS)较HFD2组明显降低(P<0.01),T-钙黏蛋白的蛋白和mRNA表达亦明显下降(P<0.05)。肝组织T-钙黏蛋白表达的免疫组化评分与肝组织的炎症分级、脂肪变百分比和气球样变程度均呈正相关(P<0.01)。结论二甲双胍可能通过下调肝组织T-钙黏蛋白的表达发挥对NAFLD的治疗作用。

垂体促甲状腺激素瘤的临床特点分析和治疗

目的探讨垂体促甲状腺激素瘤(垂体TSH瘤)导致中枢性甲亢的临床特点及治疗,为临床治疗提供参考。方法回顾性分析5例垂体TSH瘤患者的临床和实验室检查资料,5例均有不同程度的高代谢症状伴或不伴鞍区占位效应,且血清FT4、FT3水平升高,TSH升高或正常,均经垂体磁共振(平扫+增强)检查为大腺瘤。结果 4例行经鼻蝶神经内镜鞍区占位切除术,1例行开颅垂体瘤切除术,术后病理证实均为垂体腺瘤,免疫组化TSH阳性。结论甲亢患者血清TSH不被抑制时要警惕有无垂体TSH瘤的可能,需及时行垂体磁共振检查,若发现垂体腺瘤尽早手术治疗。