维生素D对母胎界面肾素的调节作用研究

目的探讨子痫前期(preeclampsia,PE)病理过程中维生素D对母胎界面局部肾素血管紧张素系统(reninangiotensin system,RAS)的调节作用及机制。方法用RT-PCR和Western blot检测正常妊娠和重症PE胎盘蜕膜中肾素mRNA和蛋白的表达;体外使用活性与非活性维生素D处理正常蜕膜组织48 h,用RT-PCR和Western blot检测肾素和维生素D去活化酶CYP24A1的表达;分离纯化并用细胞免疫化学染色鉴定正常蜕膜基质细胞和腺上皮细胞,用RT-PCR分别检测两种细胞以及蜕膜组织中维生素D相关分子mRNA的表达;在体外使用活性与非活性维生素D分别处理两种细胞,用RT-PCR和Western blot检测肾素和维生素D去活化酶CYP24A1的表达;使用PKA通路激动剂forskolin或抑制剂H89处理蜕膜腺上皮细胞,探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)通路与维生素D在肾素表达调控过程中的相互作用。结果肾素的mRNA和蛋白质水平在重症PE胎盘蜕膜中的表达较正常对照升高(P<0.05);维生素D处理可使正常蜕膜组织中肾素表达下调(P<0.05),CYP24A1表达增加(P<0.001);从蜕膜组织中成功分离蜕膜基质细胞和腺上皮细胞,相比于蜕膜基质细胞,腺上皮细胞内维生素D相关分子mRNA水平与蜕膜组织更相似;活性或非活性维生素D处理使腺上皮细胞肾素表达抑制(P<0.05),但是蜕膜基质细胞中肾素表达不受影响,两种维生素D处理使两类细胞中的CYP24A1均上调(P<0.001);活性维生素D可以显著抑制forskolin对肾素的上调作用,并可与H89协同抑制肾素表达。结论PE患者胎盘蜕膜肾素表达上调,母胎界面局部RAS系统的活化可能参与PE的发病;维生素D可以特异性地在人蜕膜腺上皮细胞中通过与PKA通路竞争下调肾素表达,补充维生素D可能对PE的临床干预具有潜在价值。