基质金属蛋白酶-9在胃癌组织中的表达及其基因沉默胃癌细胞克隆株的构建

目的观察基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在胃癌发生、发展中的作用；构建MMP-9基因沉默质粒；建立MMP-9基因沉默的BGC823细胞。方法采用免疫组织化学法在46例人胃癌新鲜标本中检测MMP-9的蛋白表达水平，采用化学合成的方法合成3条沉默MMP-9的寡聚核苷酸序列，插入到短发卡RNA（shRNA）表达载体pGenesil上，运用荧光显微镜、明胶酶电泳、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分别检测3条质粒的沉默效率；选取沉默效率最佳的1个质粒转染BGC823进行稳定细胞株的筛选及鉴定。结果46例胃癌组织MMP-9蛋白阳性率为100％，其中57％（26／46）呈增强表达；筛选到1条MMP-9沉默最为显著的shRNA表达质粒；成功构建MMP-9基因沉默的BGC823胃癌细胞克隆。结论MMP-9基因在胃癌发生、发展及浸润、转移过程中可能扮演重要角色。