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地高辛标记探针检测5种葫芦科作物病毒的斑点杂交方法
被引量:
9
1
作者
孟娟
古勤生
+4 位作者
林石明
彭斌
刘丽锋
田延平
李莉
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期2741-2746,共6页
【目的】探索5种葫芦科作物病毒即小西葫芦黄花叶病毒(Zuccini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、番木瓜环斑病毒西瓜株系(Papaya ringspot viruswate...
【目的】探索5种葫芦科作物病毒即小西葫芦黄花叶病毒(Zuccini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、番木瓜环斑病毒西瓜株系(Papaya ringspot viruswatermelon strain,PRSV-W)和南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)的斑点杂交检测技术,为葫芦科作物种子带毒的快速准确鉴定、流行病学研究和转基因检测等提供技术和方法。【方法】以构建的重组质粒为模板,用PCR方法合成了相应的地高辛标记的cDNA探针。通过斑点杂交检测西葫芦病叶汁液来考察探针的灵敏性和特异性。同时设计了3种不同长度的SqMV探针(0.55、1.6、2.7kb)对杂交效果进行了研究。【结果】ZYMV、WMV、CMV、PRSV-W和SqMV的5种探针检测各自侵染西葫芦病汁液的稀释低限分别为1﹕160、1﹕160、1﹕320、1﹕160、1﹕320,而每种探针与健康西葫芦和其它4种病毒的反应均为阴性。不同长度的SqMV探针杂交结果相同。【结论】用PCR方法合成的地高辛标记的探针,能够直接在植物组织中将5种病毒检测出来,具有较好的灵敏性、特异性和重复性。探针的长度对杂交的灵敏性和特异性没有影响。
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关键词
聚合酶链反应(PCR)
地高辛标记探针
斑点杂交
ZYMV
WMV
CMV
PRSV-W
SqMV
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职称材料
题名
地高辛标记探针检测5种葫芦科作物病毒的斑点杂交方法
被引量:
9
1
作者
孟娟
古勤生
林石明
彭斌
刘丽锋
田延平
李莉
机构
中国农业科学院郑州果树研究所
厦门山入境检验检疫局
出处
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期2741-2746,共6页
基金
国家重大基础研究"973"前期专项(2005CCA01700)
国家质检总局课题(2005IK0061)
文摘
【目的】探索5种葫芦科作物病毒即小西葫芦黄花叶病毒(Zuccini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、番木瓜环斑病毒西瓜株系(Papaya ringspot viruswatermelon strain,PRSV-W)和南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)的斑点杂交检测技术,为葫芦科作物种子带毒的快速准确鉴定、流行病学研究和转基因检测等提供技术和方法。【方法】以构建的重组质粒为模板,用PCR方法合成了相应的地高辛标记的cDNA探针。通过斑点杂交检测西葫芦病叶汁液来考察探针的灵敏性和特异性。同时设计了3种不同长度的SqMV探针(0.55、1.6、2.7kb)对杂交效果进行了研究。【结果】ZYMV、WMV、CMV、PRSV-W和SqMV的5种探针检测各自侵染西葫芦病汁液的稀释低限分别为1﹕160、1﹕160、1﹕320、1﹕160、1﹕320,而每种探针与健康西葫芦和其它4种病毒的反应均为阴性。不同长度的SqMV探针杂交结果相同。【结论】用PCR方法合成的地高辛标记的探针,能够直接在植物组织中将5种病毒检测出来,具有较好的灵敏性、特异性和重复性。探针的长度对杂交的灵敏性和特异性没有影响。
关键词
聚合酶链反应(PCR)
地高辛标记探针
斑点杂交
ZYMV
WMV
CMV
PRSV-W
SqMV
Keywords
PCR
Digoxigenin-labelled cDNA probe
Dot-blot hybridization
ZYMV
WMV
CMV
PRSV-W
SqMV
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
地高辛标记探针检测5种葫芦科作物病毒的斑点杂交方法
孟娟
古勤生
林石明
彭斌
刘丽锋
田延平
李莉
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007
9
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