实时荧光定量PCR检测传代培养细胞Grb10的表达

目的建立一种可靠的Grb10印迹基因实时荧光定量PCR方法,检测传代培养鼠尾成纤维样细胞中Grb10表达的差异。方法通过实时荧光PCR,选择合适的"相对标准品"绘制相对标准曲线,检测传代培养细胞中印迹基因Grb10的表达水平。结果相对标准曲线有较好的线性(r=0.999及0.984);实时荧光定量PCR方法检测出随着细胞培养代数的增加印迹基因Grb10表达水平上升。结论双标准曲线的实时荧光定量PCR法用于检测Grb10的表达准确可靠;传代培养可能影响鼠尾成纤维样细胞中印迹基因Grb10的表达水平。

不锈钢纤维支载SiO_2/PDMS-MWNTs膜固相微萃取测定水样中三苯含量

采用sol-gel法首次制备了不锈钢纤维支载SiO2/聚二甲基硅氧烷-多壁碳纳米管复合膜(SiO2/PDMS-MWNTs)固相微萃取(SPME)新型萃取头,并与气相色谱联用,检测了环境样品中的痕量苯、甲苯和二甲苯(BTX),文中研究了SiO2/PDMS-MWNTs复合膜的制备条件,并探讨和优化了测定痕量BTX的SPME条件,结果表明,最佳萃取条件:萃取温度为40℃,萃取时间为20 min,搅拌速度为300 r min-1,解吸时间为3 min,在最佳条件下,本法检出限为0.01-0.02μg mL-1,线性范围为1-1000μg mL-1,样品回收率为92.2-103.4%,比较商用萃取头,SiO2/PDMS-MWNTs复合膜萃取头具有稳定,寿命长,萃取效率高等特点,

头孢噻呋及去呋喃甲酰基头孢噻呋的四极杆轨道阱串联质谱分析及其在肉鸡体内的残留规律研究

建立了头孢噻呋及其主要代谢物去呋喃甲酰基头孢噻呋残留的超高效液相色谱-四极杆轨道阱串联质谱(UHPLC-Q-Orbitrap MS)分析方法。选用Kinetex F5 100A色谱柱(50mm×3.0mm×2.6μm)分离,在Q-Exactive高分辨质谱Full MS/dd-MS2扫描模式下采集数据进行定性定量分析。两种目标物在3种基质中相应浓度范围内的线性关系良好,相关系数r2均大于0.990,回收率为83.2%~129.7%,RSD均小于15%。通过对鸡体内头孢噻呋及其代谢物残留规律的分析表明,给药后,鸡胸肉中头孢噻呋和去呋喃甲酰基头孢噻呋均可检出,且消除时间均为12~24h;鸡肝、鸡肾中头孢噻呋可在0.5h内迅速代谢为去呋喃甲酰基头孢噻呋,鸡肝和鸡肾中去呋喃甲酰基头孢噻呋的消除时间分别为48~72h和72~120h。本研究可为保障动物源性食品安全以及鸡体内头孢噻呋最大残留限量标准和休药期的制订提供理论和实践依据。

微波消解-ICP-MS测定石阡苔茶中17种矿物质元素

建立微波消解-电感耦合等离子体质谱（ICP—MS）法测定石阡苔茶中Na、Mg、K、Ca、Cr、Mn、Fe、Co、Cu、Zn、As、Se、Mo、Cd、Sb、H卧Pb等17种矿物质元素。结果表明，17种元素在0～1000n∥mL范围内呈良好的线性关系（R≥0．9990），检出限为O．001-23．720ng／mL，加标回收率为91．63％～104．45％，相对标准偏差（RSD）为1．26％-5．34％，精密度试验结果RSD值为0．002％-8．450％，该方法快速简单、准确、灵敏度高，能满足石阡苔茶中17种矿物质元素的检测需求。石阡苔茶样品中K元素含量最高，其次是Ca元素，必需微量元素含量从大到小顺序为：Fe、Zn、Cu、Cr、Co、Se、Mo。Hg、Pb、Cd、As4种重金属元素含量均符合国家标准和农业部行业标准。

食品添加剂姜黄与姜黄素主成分的测定

食品级商业姜黄素添加剂中的姜黄素类化合物含量被准确测定,并分析三种主要活性成分姜黄素（Cur Ⅰ）、脱甲氧基姜黄素（Cur Ⅱ）、双脱甲氧基姜黄素（Cur Ⅲ）三种成分的比例关系,为商业姜黄素的使用剂量提供理论依据。样品用甲醇提取,经过0.45μm微孔过滤膜过滤后进样分析。色谱柱：CNW C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：0.1%甲酸水溶液（45%）,0.1%甲酸乙腈溶液（55%）;洗脱方式：等度,18min;检测器波长：420 nm;流速：1.0 m L/min;柱温：室温;进样量：15μL;采用外标法定量分析。结果表明,姜黄素类化合物在1-100μg/m L范围内与吸收度呈良好的线性关系（r≥0.999）,平均加标回收率在100.5%-101.2%之间,相对标准偏差（n=3）在0.2%-1.01%范围内,本方法测定姜黄素类化合物快速简单,准确、灵敏,专属性高,可用于商业姜黄素的含量测定。

禽流感(Arian Infucnja)

2003年12月,韩国清水道报道一个养鸡场暴发了禽流感,其后,在日本、越南、中国台湾、泰国、柬埔寨、印度尼西亚、巴基西坦、老挝都暴发了禽流感,2004年1月23日、1月26日,在我国的广西隆安县,湖北省的武穴市,湖南省武冈市的鸡和鸭子也相继暴发了高致病性禽流感.

20例犬细小病毒病的临床表现和白细胞分类计数变化特点的分析

通过每天观察和记录患细小病毒病住院病犬的临床症状变化,进行白细胞分类计数检查,分析并总结了患细小病毒病的20例犬的临床表现和白细胞分类计数的变化特点,以期为临床诊治提供参考。

扶桑绵粉蚧超微结构扫描电镜观察

采用扫描电镜技术研究扶桑绵粉蚧(Phenacoccus solenopsis Tinsiley)泌蜡腺体、蜡泌物、触角、足、腹部的超微结构。结果显示,扶桑绵粉蚧的主要分泌蜡腺体为管腺和三格腺;触角感受器主要为毛状感受器;口器喙着生6对刺形感受器;足及爪冠着生刺形感受器;腹部主要分布毛状感受器,三格腺和管腺分布较多。

一株甲基对硫磷降解菌——米曲霉JMUPMD-2的分离与鉴定

对一株新分离的、能以甲基对硫磷为唯一磷源生长的菌株——JMUPMD-2利用形态观察和rDNA ITS序列分析对JMUPMD-2进行鉴定;用气相色谱法检测培养过程中甲基对硫磷浓度的变化,确定甲基对硫磷降解速率。该菌株的rDNA ITS序列与米曲霉(Aspergillus oryzae)的同源性为99%,菌落形态和显微形态都与米曲霉特征相符,因此鉴定为米曲霉;以350μg/L甲基对硫磷为唯一磷源和350μg/L甲基对硫磷及1 g/L K2HPO4组成的混合磷源分别培养该菌株,200 h后的分解量分别为189μg/L及28μg/L。该菌株的胞内提取液具有明显的甲基对硫磷降解酶活性。

反腐倡廉与法治政府建设

本文基于反腐倡廉和法治政府建设之间的逻辑关系,从反腐败立法、信息公开和监督机制三个层面展开论述,认为在制度设计上,行政立法和反腐败立法使权力职责"规范化",政务信息公开和官员财产信息公开使权力运行"透明化",多层次的监督机制使权力监督"立体化"。以上三个层面的工作是互相衔接、相辅相成、"三位一体"的。

氟虫腈对PC12细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究氟虫腈对神经细胞凋亡的影响并初步探讨其神经毒作用机制.方法 设3.13×10^-6、1.25×10^-5、5.00×10^-5mol/L 3个氟虫腈染毒组和1个对照组,用荧光显微镜检测各组PC12细胞凋亡荧光强度并用流式细胞仪对凋亡率进行测定,并对3个染毒组Bcl-2蛋白表达进行荧光强度检测.结果 细胞凋亡荧光强度检测发现,3.13×10×10^-6mol/L染毒组细胞凋亡率为17.00%±0.57%,5.00×10×10^-5mol/L染毒组细胞坏死率为13.95%±1.95%,均明显高于对照组（分别为9.80%±0.30%、3.10%±0.40%）,差异均有统计学意义（P〈0.05）.对Bcl-2蛋白表达含量进行定性检测,结果显示,3.13×10^-6mol/L染毒组Bcl-2蛋白表达明显低于对照组,其他染毒组Bcl-2蛋白表达与对照组比较无明显差异.结论 氟虫腈在较低剂量时可能是通过影响Bcl-2蛋白表达来诱导PCI2细胞凋亡,而在较高剂量时可能通过其他非细胞凋亡途径直接致细胞坏死发生.

茶叶浸出液中农药残留表面拉曼光谱检测与初步定量分析

选取甲基对硫磷和水胺硫磷为研究对象,改良了传统的QuEChERS前处理工艺,以自制纳米金溶胶为增强基底,利用表面增强拉曼光谱(SERS)技术,对茶叶浸出液中的农药残留进行检测。通过比对两种有机磷农药的拉曼特征峰进行定性分析。同时,选取570,1034,1107和1202 cm^-1等拉曼位移附近的特征峰光谱数据,利用微分等数学手段,结合偏最小二乘法(PLSR)建立回归方程,预测样品中农药残留含量。所得预测数值与气相色谱-质谱联用(GC-MS)法检测值对比,验证本方法的可行性与可信度。结果表明:基于SERS技术对上述两种有机磷农药的检出限可达0.05 mg/L;通过数学模型分析建立回归方程,其线性相关系数范围为0.9077~0.9824,预测均方根误差(RMSEP)范围为0.77%~2.68%;利用回归方程得到的预测值与GC-MS检测结果基本接近,相对误差范围-5.16%~9.03%,回收率为81.4%~115.1%,说明可以用SERS技术对茶叶浸出液中的有机磷农药残留进行定性和初步定量分析。