厦门地区β地中海贫血基因突变类型及产前基因诊断研究

目的分析厦门地区β地中海贫血基因突变类型及其频率,探讨β地中海贫血产前基因诊断的意义。方法2006年3月至2007年2月,对在本院遗传咨询门诊就诊,怀疑有地中海贫血的249例患者,应用聚合酶链反应反向斑点杂交(PCR-RDB)技术进行β地贫基因检测,对夫妻双方均确诊为β地贫的孕妇采用超声介导下羊膜腔穿刺术或脐血穿刺术进行产前基因诊断。结果249例患者中检测到7种基因突变类型,其中654M/N 26例,占42.6%,41-42M/N 25例,占41.0%,17M/N 4例,占6.5%,71-72M/N 2例,占3.2%,-28M/N 2例,占3.2%,-29M 1例,占1.6%,27/28M1例,占1.6%。发现三对已妊娠的夫妻均患有轻型β地贫,并进行β地贫产前基因诊断,确诊2例胎儿为重型β地贫,1例为轻型β地贫。结论研究结果为在厦门地区开展β地中海贫血的遗传咨询和产前诊断提供了有价值的基础资料,产前诊断是阻止该病重症患儿出生的最有效手段。

高水平血清HCMV IgM在低龄儿童原发性HCMV感染诊断中的作用

目的：探讨血清人巨细胞病毒（HCMV）IgM水平在低龄儿童中诊断原发性HCMV感染的意义。方法收集临床诊断为HCMV感染的患儿血标本56例，年龄为0.5-1岁，采用全自动化学发光法分别定量检测血清HCMV IgG、IgM抗体水平，以及IgG亲和力指数。结果 HCMV IgG＋患儿亲和力检测结果发现，其中IgM-/IgG＋的5例患者都为高亲和力IgG，而IgM＋/IgG＋的42例患者中25例是低亲和力IgG，占59.5%。根据IgM定量检测结果进一步将此47例HCMV IgG＋患儿由低至高分成5组，分别为IgM阴性组（〈30 AU/mL），30-100 AU/mL组，100-170 AU/mL组，170-240 AU/mL组以及大于240 AU/mL组。随着IgM抗体水平的增加，低亲和力样本所占比例呈增高趋势，经卡方检验，差异有统计学意义（χ2=12.72，P〈0.05）。结论在0.5-1岁婴儿中，HCMV IgM水平与HCMV原发感染呈正相关，临床同时参考IgM定量检测和HCMV IgG亲合力检测结果，将对0.5-1岁以内婴幼儿近期HCMV感染发生时间的判定起到有益的互补作用。先进行HCMV IgM定量检测，再进行阳性病例的IgG亲和力检测是低龄儿童原发HCMV感染实验室诊断的可行方案。

胎儿颈项透明层增厚在产前诊断中的研究进展

大量的临床实践与案例研究发现胎儿的颈项透明层(NT)增厚不仅与染色体病相关,还和胎儿的染色体微缺失/微重复综合征、胎儿结构异常、某些遗传综合征、胎死宫内等不良妊娠结局密切相关。随着新的基因检测技术的引入,对超声发现NT增厚的胎儿,在产前单基因层面发现胎儿NT增厚的遗传学发病原因,准确评估胎儿病情和预后,为夫妻的再次生育提供理论依据。为了进一步明确胎儿NT增厚在产前诊断中的临床意义以及相应的诊断路径,本文就国内外文献对胎儿NT增厚在产前诊断中的进展进行综述。

一例罕见复杂染色体重排产前诊断

目的 探讨细胞遗传及荧光原位杂交(FISH)技术产前诊断一例罕见新发复杂染色体重排(CCR)的应用价值。方法 对1例产前胎儿复杂异常染色体重排应用细胞遗传及FISH技术初步确定其来源和结构。结果 经鉴定胎儿核型为46,XY,ins(2;3)(p13;p13p23),der(4)ins(4;9;2)(q25;q32q33;p13pter),der(9)ins(9;4)(q32;qterq25)dn。结论 FISH技术及分子细胞遗传学技术有助于对产前罕见复杂染色体重排染色体的准确识别及鉴定,并为进一步分子细胞检测如SNP、WES、WGS等指明方向。

荧光定量PCR技术应用于产前诊断常见染色体非整倍体实验室检测质控规范

20世纪90年代始,基于染色体短串联重复序列(short tandem repeat,STR)的荧光定量PCR(quantitative fluorescence PCR,QF-PCR)技术开始应用于临床。二十多年来,该技术以其快速、成本低、通量高、不需要细胞培养等优点,迅速成为产前辅助诊断的重要检测手段。国内外有关学会已出台相关临床应用指南与专家共识,大大促进了该技术的临床应用。但这些指南和共识多从临床医生视角出发,对技术的临床适应证、结果解释和遗传咨询等阐述较详细,具体对技术应用的实验室要求、操作流程、质量控制等规范不多。

荧光原位杂交技术在复杂染色体异常产前诊断中的应用

目的探讨荧光原位杂交技术（fluorescenceinsftuhybridization，FISH）在复杂染色体异常产前诊断中的应用价值。方法对8例羊水、3例脐血常规G显带具有复杂染色体异常的产前诊断孕妇，应用FISH技术确定其复杂染色体重排及标记染色体的组成。结果FISH技术证实了G显带平衡易位的结果，同时明确了3例羊水中衍生染色体的组成、2例脐血中标记染色体的来源。结论FISH技术具很高的敏感性和特异性，是明确染色体异常重要的分子细胞遗传学工具，其在产前诊断中的应用，可为临床提供更准确全面的实验依据。

闽西南地区地中海贫血筛查及产前诊断的研究

目的:探讨闽西南地区开展地中海贫血筛查及产前诊断的意义。方法:综合采用Gap-PCR、反向斑点杂交和基因测序等分子生物学技术,对地中海贫血高风险患者进行基因检测,对夫妇双方携带同类型地中海贫血孕妇进行产前诊断。结果:2006年3月～2007年12月,对地中海贫血高风险患者共627例进行基因诊断,检出α-地中海贫血基因携带者219例,β-地中海贫血基因携带者149例,α合并β地中海贫血9例。对夫妇双方均为同类地中海贫血基因携带者的孕妇进行产前诊断,共检出13例,其中重度贫血7例。结论:闽西南地区具有较高的地中海贫血基因携带率,广泛地开展地中海贫血的筛查及产前诊断具有重要意义。

产前诊断中胎儿新发生染色体异常的临床结局与遗传咨询

目的分析在产前诊断中胎儿新发生染色体异常的检测结果和临床结局，为胎儿新发生染色体异常的遗传咨询积累有价值的临床资料。方法2006年1月至2009年12月，在2583例产前诊断的细胞染色体核型分析中，共发现12例新发生的胎儿染色体异常，回顾性分析这12例胎儿的细胞和（或）分子细胞遗传学检测结果、产前超声检查结果、妊娠结局和出生后的随访结果。结果12例新发生染色体异常的胎儿有10例是非平衡性染色体异常，2例平衡性染色体异常。10例非平衡染色体异常的胎儿中有8例引产终止妊娠，有2例足月顺娩，其中l例是标记染色体异常出生后随访未见异常，另1例出生后随访至2周岁发现语言功能发育迟缓。2例平衡性染色体异常的胎儿均足月顺娩，出生后随访未发现异常。结论新发生染色体异常的胎儿表型可通过详细的染色体核型分析以及进一步的分子细胞遗传学检测所提供的染色体成分进行预测，产前超声结构畸形检查可为妊娠结局的评估提供有力的参考依据。

运用Logistic回归分析探讨胎儿生长受限的高危因素

目的：探讨胎儿生长受限的影响因素及其与妊娠结局的关联性。方法：以厦门市妇幼保健院2011年1月1日至2011年12月31日的分娩临床资料作为样本进行病例对照研究，数据经χ2检验、独立样本t检验和多因素非条件Logistic回归进行分析。结果：胎儿生长受限的影响因素有：孕妇年龄（ P=0．047，OR =0．949，CI 0．901～0．999）、贫血（P=0．008，OR =1．354，CI 0．164～0．766）、羊水过少（P =0．034，OR =2．530，CI 1．074～5．964）及胎盘异常（P=0．015，OR=2．337，CI 1．180～4．626）等。结论：贫血、胎盘异常、羊水过少是与胎儿生长受限有关的主要因素，针对相关因素积极干预有助于防治胎儿生长受限。

利用母血胎儿游离DNA进行单基因病无创产前诊断研究进展

母血中胎儿游离DNA的发现为单基因遗传病的无创产前诊断提供了新途径。过去10年来，相继发展了多种技术（实时荧光PCR技术、焦磷酸解激活的聚合反应技术、质谱技术、数码PCR技术）用于母血胎儿游离DNA的检测，推动了单基因遗传病无创产前诊断研究的发展。现将相关技术的基本原理、存在优缺点等方面作一综述，以期对单基因遗传病无创产前诊断的发展有所帮助。

厦门地区11118例无创产前基因检测结果回顾性分析

目的探讨无创产前基因检测技术在产前筛查和产前诊断临床应用中的适用性和准确性。方法对厦门市妇幼保健院11118例孕妇的无创产前基因检测结果进行回顾性分析,将孕妇分为高龄组和非高龄组,非高龄组再分为高风险A组、中风险B组和首选无创C组,对无创检测结果异常的孕妇建议进行介入性产前诊断,行胎儿染色体核型分析。结果11118例孕妇共有124例检测结果异常,检出率1.12%,其中高风险A组的检出率最高,达1.76%。最终有1 06例孕妇接受介入性产前诊断,确诊胎儿染色体异常78例,阳性预测值73.58%,其中确诊21三体47例,阳性预测值92.16%;确诊18三体11例,阳性预测值91.67%;确诊13三体4例,阳性预测值36.36%;确诊性染色体异常16例,阳性预测值59.26%。结论对于高龄孕妇和唐氏筛查高风险或临界风险的孕妇而言,无创产前基因检测技术具有较高的临床实际应用价值,可作为传统产前诊断技术的有效辅助手段。但存在假阳性率,必须通过胎儿染色体核型加以验证。

唐氏综合征的无创产前诊断研究进展

唐氏综合征是最常见的染色体非整倍体遗传病,该病尚无有效治疗手段,出生干预是预防该病的有效措施。传统的产前筛查与产前诊断均具有一定的缺陷,无创产前诊断是未来发展的趋势。本文从母血胎儿细胞、母血胎儿游离DNA、母血胎儿游离RNA三个角度对目前唐氏综合征的无创产前诊断研究作一综述,以期对相关领域的研究发展有所帮助。

产前诊断一例伴有鼻骨缺失的罕见新发21q(21q22.1→qter)部分三体综合征

目的对1例超声提示鼻骨缺失的胎儿进行产前诊断。方法联合应用常规G显带核型分析、单核苷酸多态性微阵列分析(single nucleotide polymorphismarray,SNP-array)技术对胎儿进行产前诊断,并采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术进行验证,应用G显带和FISH技术对胎儿父母行遗传学分析。结果胎儿的核型初步结果为46,XN,add(21)(p11.2),SNP-array提示胎儿在21q22.12q22.3区(hg19:36762648-48093361)有11.3 Mb的重复,FISH结果证实了上述发现,其父母核型及FISH检测均未发现明显异常。胎儿的核型结果最终确定为46,XN,der(21)t(21;21)(p11.2;q22.1),为新发生的21q(21q22.1→qter)部分三体。结论在产前诊断中联合应用多种检测技术,可得出更为精准的检测结果,为产前诊断及遗传咨询提供更为科学的遗传学信息。

荧光原位杂交技术在自然流产胚胎组织染色体分析中的应用探讨

目的探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)在自然流产胚胎组织中染色体分析的应用价值。方法运用FISH技术对临床102例自然流产胚胎组织进行检测,并对其中24例标本同时进行细胞培养和核型分析。结果 FISH检测共发现46例染色体异常,异常率为:45.09%(46/102);异常类型有:单体型、三体型、三倍体型及其嵌合体、性染色体异常嵌合型。24例染色体核型分析结果中,17例(70.83%)与FISH结果相符,另外检出FISH方法所不能覆盖的染色体异常7例(29.17%),分别为三体型5例、染色体结构异常2例。结论大部分的自然流产胚胎组织异常染色体结果可通过FISH技术检出,该技术具有检测速度快,实验成功率高等优点。但基于FISH技术探针检测区域的局限,研究中仍有部分流产胚胎组织异常染色体结果需通过核型分析检出,提示核型分析在有关研究中仍具重要作用。

产前诊断新发46,X,psu dic(Y)/45,X嵌合体胎儿两例

目的应用分子-细胞遗传学技术分别对1例颈项透明层(nuchal translucency,NT)增厚和1例无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)提示性染色体数目减少的胎儿进行产前诊断。方法联合应用常规G显带核型分析、单核苷酸多态性微阵列分析(single nucleotide polymorphism array,SNP-array)技术对胎儿进行产前诊断,并采用荧光原位杂交技术进行验证,应用G显带和SNP-array技术对胎儿父母行遗传学分析。结果两例胎儿的核型结果均为46,X,+mar/45,X嵌合,SNP-array的检测结果为:例1为Yp11.31q11.223区段22.0 Mb的重复和Yq11.223q11.23区段3.9 Mb的缺失,例2为Yp11.31q11.221区段16.9 Mb的重复和Yq11.222q11.23区段8.1 Mb的缺失;荧光原位杂交结果证实了上述发现。两例胎儿父母的核型及SNP-array检测均未发现明显异常。结论在产前诊断中联合应用多种技术,可为临床提供更为准确的遗传学信息。

我国假肥大肌营养不良征防控的技术路径与优生策略选择

1背景介绍假肥大型肌营养不良征(Duchenne and Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)是全球最常见的X-连锁隐性致死性基因疾病之一,男婴发生率约为1/3500[1]。临床上根据发病年龄及病程差异,将患者分为杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)和贝氏肌营养不良(Becker

高分辨微阵列比较基因组杂交技术在临床复杂染色体异常遗传诊断中的应用

目的评估高分辨微阵列比较基因组杂交技术（ArrayCGH）在临床复杂染色体异常遗传诊断中应用的可行性。方法选取2010年12月至2011年12月厦门市妇幼保健院遗传咨询门诊患者2例、产前诊断门诊患者2例。2例遗传咨询患者按无菌要求、EDTA抗凝，采集2～4ml外周血；2例产前诊断患者，经遗传咨询、术前检查后，于手术室B超引导下抽取约2～3ml脐血。对4份标本分别进行染色体核型分析，同时提取4份标本的全基因组DNA，应用ArrayCGH进行亚显微水平分析。ArrayCGH结果最后通过荧光原位杂交技术（FISH）进行验证。结果ArrayCGH检测发现4例患者在多条染色体上均出现不同程度的复制和缺失，这些复制和缺失大多数没有被核型分析检测到。1号病例为4p16．3-4p15．31复制、4p16．3端粒区缺失；2号病例为Xpll．22-Xq11．1复制；3号病例为2q37．3缺失、4p16．3-4p15．32复制；4号病例为2q14．3-2q21．1缺失、2q21．2-2q32．1复制。FISH检测与ArrayCGH结果相吻合。结论ArrayCGH可以准确检测亚显微的微小片段缺失、复制等拷贝数变化，且能确定断裂位点，可为临床遗传诊断提供依据。（手华检验医学杂志，2013，36：46-49）

三例22号染色体异常胎儿的产前遗传学分析

目的应用超声以及多种遗传学检测技术对3例产前筛查提示染色体可能异常的胎儿进行分析,为遗传咨询提供依据。方法对3例孕妇进行胎儿超声检查、核型分析、单核苷酸多态性微阵列芯片(single nucleotide polymorphism-based microarray,SNP-Array)检测,并通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)对结果进行验证。结果三例胎儿均发现22号染色体存在异常。例1在22q13.2q13.33区存在7.1 Mb的杂合缺失,涉及SHANK3、FBLN1等54个OMIM基因;例2为嵌合体核型,约12%的细胞22q13.31q13.33区存在6.6 Mb的杂合缺失,覆盖SHANK3、PPARA等48个OMIM基因,另有5%的细胞22q11.1q13.2区存在26.1 Mb的拷贝重复,覆盖285个OMIM基因;例3在22q11.1q11.21区存在1.7 Mb的二次重复,涉及CECR1、CECR2、ATP6V1E1等10个OMIM基因。三例胎儿父母的核型及SNP-Array检测结果均未见异常,提示胎儿为新发变异。结论22号染色体微缺失/微重复所致疾病的严重性不仅与其范围有关,还与染色体结构、基因剂量及环境等密切相关。在产前诊断中综合运用超声和多种遗传学检测技术可以显著提高表型变异较大的遗传学异常的检出率。

无创产前基因检测与胎儿染色体结果不一致的临床分析

目的分析无创产前基因检测(NIPT)在目前临床实践中的表现,探讨NIPT与胎儿染色体结果不一致的原因,为基于无创产前基因检测的遗传咨询积累有价值的临床资料,为NIPT检测技术更加规范有序地开展提供临床依据。方法2016年1月-2018年12月,共有268例孕妇因NIPT检测结果异常(包括高风险和有非报告性提示结果),采用细胞染色体核型分析和/或染色体微阵列分析(CMA)检测进行验证。同时收集同期发现的NIPT结果呈假阴性的6例孕妇的临床资料和胎儿染色体结果进行分析。结果在所有异常NIPT结果中,高风险占49.25%,非报告性提示占50.75%;验证结果显示21-三体综合征的阳性预测值77.65%,18-三体综合征72.73%,13-三体综合征20.00%,性染色体62.42%,非常见染色体异常24.31%,染色体微缺失微重复50.23%。6例NIPT结果正常的孕妇因超声检查异常,经染色体核型分析和/或CMA检测,均证实胎儿染色体异常。结论当前临床实践中NIPT对常见非整倍体异常的检出率并不像之前文献发表的那么高;NIPT结果正常,当超声发现异常时,应考虑介入性产前诊断验证,有助于假阴性结果的发现;NIPT可以发现额外的细胞遗传学异常,应建议结果可疑的孕妇接受介入性产前诊断进行验证。

细菌人工染色体微珠技术标记在胎儿染色体疾病诊断中的应用价值研究

目的探讨细菌人工染色体微珠标记技术(Bobs)在胎儿染色体疾病诊断中的应用价值。方法对1 056例行羊膜腔穿刺术的胎儿羊水细胞行染色体核型分析及Bobs检测,对部分Bobs检测阳性样本行染色体微阵列、荧光原位杂交方法验证。结果 Bobs准确验证了核型分析发现的所有16例染色体非整倍体异常、1例Wolf-Hirschhorn综合征以及3例性染色体异常嵌合体,此外在核型正常样本中检出2例22q11微重复以及1例母体细胞污染病例。结论相较于染色体核型分析,Bobs具有通量高、检验快速及分析简便的优势,适宜作为介入性产前诊断的常规补充项目。