死亡相关蛋白激酶1及结节性硬化复合物蛋白2基因在胰腺癌组织中的表达及与预后的关系

目的通过生物信息学方法研究死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)和结节性硬化复合物蛋白2(TSC2)基因在胰腺癌中的表达情况,并探讨分析其与预后的关系。方法利用来自癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库的胰腺癌患者数据进行Kaplan-Meier分析,进而深层次探讨DAPK1和TSC2基因表达水平与患者总生存期或无进展生存期(PFS)的关系,同时,对影响预后的因素进行Cox多因素分析,以及分析胰腺癌中DAPK1和TSC2基因启动子的甲基化水平。此外,通过双荧光素酶报告基因检测系统,验证靶向DAPK1的微小RNA(miR),并应用定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法验证在胰腺癌细胞中miR-324-5p负调控DAPK1的表达。结果多因素分析显示,肿瘤分级(P=0.005)、R0切除(P<0.001)及TSC2表达情况(P=0.005)是影响胰腺癌患者PFS的独立危险因素;肿瘤部位(P=0.006)、病理类型(P=0.002)及分子靶向治疗(P<0.001)是影响胰腺癌患者总生存期的独立危险因素。DAPK1基因低表达且TSC2基因高表达的胰腺癌患者具有更好的总生存期(P=0.024)。DAPK1和TSC2甲基化水平与相应的mRNA表达水平均呈负相关(r=-0.69、-0.37,均P<0.05)。体外实验结果证实,过表达的miR-324-5p显著抑制了胰腺癌Pa Ca-2和PANC-1细胞DAPK1 mRNA和蛋白的表达[mRNA:(0.37±0.02)比(1.00±0.02)、(0.53±0.01)比(1.00±0.06);蛋白:(0.54±0.06)比(1.04±0.12)、(0.63±0.11)比(1.01±0.11)](均P<0.05)。结论DAPK1基因联合TSC2基因的表达情况可以预测胰腺癌患者的预后;在胰腺癌组织中,DAPK1和TSC2启动子的低甲基化水平是DAPK1和TSC2高表达的重要因素;miR-324-5p负调控DAPK1的表达,有望成为胰腺癌靶向治疗的新靶点。

miR-324-5p通过靶向调控DAPK1降低胰腺癌细胞的放射敏感性

目的:探讨死亡相关蛋白激酶1(death-associated protein kinase 1,DAPK1)在胰腺癌(pancreatic cancer,PaC)细胞放射敏感性中的作用,验证miR-324-5p通过靶向调控DAPK1影响胰腺癌细胞放射敏感性的机制。方法:通过生物信息学预测靶向DAPK1的miRNAs,并利用双荧光素酶报告基因检测miR-324-5p对DAPK1的调控作用。在PANC-1和MIA PaCa-2细胞中过表达miR-324-5p和DAPK1或抑制miR-324-5p后,对各细胞株进行放射诱导,检测细胞增殖和凋亡情况,以及凋亡相关分子的表达情况。结果:GEO数据集结果显示,胰腺癌组织中miR-324-5p的表达水平高于正常组织。与正常胰腺导管上皮细胞系(HPDE6-C7)相比,胰腺癌细胞系(Capan-1、Bxpc-3、PANC-1和MIA PaCa-2)中miR-324-5p表达水平更高(P均<0.001)。双荧光素报告基因检测结果表明,miR-324-5p靶向DAPK1的3'UTR,并且可下调DAPK1的表达。细胞实验结果证实,过表达miR-324-5p通过靶向调控DAPK1降低放射诱导的细胞凋亡和DNA的损伤,进而降低了胰腺癌细胞的放射敏感性。结论:miR-324-5p通过负调控DAPK1降低胰腺癌细胞对放射的敏感性,从而影响DNA修复和细胞凋亡。miR-324-5p/DAPK1途径可能为胰腺癌的靶向治疗提供了潜在的治疗靶点。

基于TCGA数据库分析FNDC3B基因在胰腺癌中的表达及预后意义

目的探讨FNDC3B基因在胰腺癌组织中的表达情况及预后意义。方法下载癌症基因组图谱(TCGA)的公开数据,评估FNDC3B基因在胰腺癌组织中的表达情况。筛选后共采集了141个胰腺癌样本,根据FNDC3B的表达量中位数将样本分为FNDC3B低表达组及FNDC3B高表达组。采用Kaplan-Meier法对胰腺癌患者进行生存分析,采用Log-Rank检验以及Cox回归模型分析胰腺癌患者预后的影响因素,同时利用基因集富集分析(GSEA)方法预测调控通路。结果FNDC3B高表达的患者,具有更多的淋巴结转移,差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示,FNDC3B高表达的胰腺癌患者预后更差(P<0.05)。单因素分析中,T分期、N分期、分子靶向治疗、放射治疗及FNDC3B影响胰腺癌患者的总生存。多因素分析中,FNDC3B表达(HR:1.861,95%CI:1.147~3.019,P=0.012)、分子靶向治疗(HR:0.363,95%CI:0.216~0.611,P<0.001)及肿瘤分级(HR:1.948,95%CI:1.198~3.167,P=0.007)是胰腺癌总生存的3个独立危险因素。GSEA结果表明,FNDC3B基因主要与癌症相关信号通路、胰腺肿瘤、ECM受体相互作用、白细胞跨内皮迁移、黏着斑、调节肌动蛋白细胞骨架、细胞因子和细胞因子受体相互作用、细胞黏附分子、黏附连接等信号通路相关。结论FNDC3B、肿瘤分级及分子靶向治疗是影响胰腺癌患者总生存的独立危险因素。FNDC3B可能是胰腺癌患者不良预后的潜在生物标志物,为今后治疗胰腺癌提供了潜在的靶点。

三种不同优化方法在局部晚期宫颈癌腔内联合组织间插植近距离治疗计划中的剂量学比较

目的 比较分析局部晚期宫颈癌腔内联合组织间插植近距离治疗计划3种优化方法的剂量学差异。方法 回顾性选取局部晚期宫颈癌患者20例，对每例患者根据不同优化方法，分别制定3种计划，分别为手动计划组，基于图形优化；逆向1计划组，基于模拟退火优化算法；逆向2计划组，在逆向1组基础上增加了靶区（CTV）最大剂量限定。比较计划中CTV的体积剂量参数V200、V150、V100、D100、D90、均匀性指数（HI），以及直肠、膀胱、乙状结肠的剂量参数D0.1 cm3、D1 cm3、D2 cm3。结果 CTV方面，手动组和2个逆向组的D100参数差异无统计学意义（P〉0.05），但2个逆向组的V200、V150、V100、HI参数明显优于手动组（t=-3.422～9.910，P〈0.05）。逆向1组的V100和D100优于逆向2组（t=7.238、5.032，P〈0.05）。危及器官（OARs）方面，与手动组相比，2个逆向组中直肠、膀胱、乙状结肠的D0.1 cm3、D1 cm3和D2 cm3明显降低（t=2.235～5.819，P〈0.05）。结论 对于局部晚期宫颈癌腔内联合组织间插植技术，基于3组优化方法的计划均能满足临床需求，且使用逆向优化方法保证了靶区剂量覆盖，同时减少直肠、膀胱、乙状结肠的最大受量。

硼中子俘获治疗头颈部肿瘤临床试验进展

硼中子俘获治疗(boron neutron capture therapy,BNCT)是结合靶向治疗和重离子治疗的先进二元放疗技术。其原理是利用含有10B同位素的硼药在肿瘤细胞中靶向聚集,随后中子束流外部照射肿瘤部位,发生10B(n,α)7Li核反应,释放出杀伤范围为一个细胞大小(5~9μm)的高传能线密度α粒子和7Li粒子杀死肿瘤细胞。BNCT具有精准的肿瘤靶向性,对正常组织损伤小,分割次数(1~3次)少于传统放疗(30次)等优点。BNCT使用的中子由反应堆或加速器产生,临床使用的硼药包括BPA和BSH两种。本文介绍国内外开展的头颈部肿瘤BNCT临床试验及取得的重要进展。BNCT对于头颈部肿瘤治疗具有良好疗效。随着加速器中子源的推广应用和新型硼药的研发,BNCT将会在临床放射治疗领域发挥更大的作用。