基于荧光PCR技术构建MGMT基因甲基化定性检测方法

该文利用高通量测序技术的优点构建了一种MGMT基因甲基化的荧光PCR定性检测方法。该方法提取41例神经胶质瘤石样本基因组DNA并进行亚硫酸氢盐修饰转化,采用高通量测序技术分析样本的亚硫酸氢盐转化效率和MGMT基因CpG位点的甲基化水平,采用荧光PCR技术评估样本MGMT基因的甲基化状态。试验结果如下:样本的基因组DNA平均转化效率达到99.65%;对CpG位点的甲基化水平进行双向聚类分析,筛选出第58号~64号、第66号CpG位点区域用于研发MGMT基因甲基化荧光PCR检测试剂盒。以平均甲基化水平5%为阈值线,采用2种方法检测后发现,有40例样本的结果完全一致。综上所述,借助高通量测序技术成功构建了MGMT基因甲基化的荧光PCR定性检测方法,该方法适用于临床MGMT基因甲基化状态常规化检测,可以为个体化治疗提供指导。

肿瘤基因甲基化检测的临床应用价值与临床评价方法探究

基因甲基化作为一种重要的表观遗传修饰,能够通过调控基因表达影响细胞的生物学行为,在肿瘤的发生和发展中起着关键作用。本文以肿瘤DNA甲基化标志物检测为切入点,探究甲基化检测的临床应用价值。同时,结合甲基化检测的法规提供临床评价方法的建议。

基于荧光PCR法的RASSF1A基因甲基化定性检测方法开发

目的:使用高通量测序法辅助开发RAS相关区域家族1A(Ras-Association Domain Family 1A,RASSF1A)基因甲基化定性检测试剂盒(荧光PCR法)。方法:提取37例肺癌血浆样本DNA进行亚硫酸氢盐修饰转化,使用高通量测序方法检测样本的亚硫酸氢盐转化效率和RASSF1A基因CpG位点的甲基化水平,之后使用荧光PCR法检测样本RASSF1A基因的甲基化状态。结果:高通量测序显示样本DNA的平均转化效率为99.47%;根据CpG位点甲基化水平的双向聚类分析结果,筛选出第26~30号CpG位点作为荧光PCR法的检测位点,以甲基化水平5%作为阈值线,ΔCt Cut-off值为9,得出两种检测方法对37例样本的测定结果一致。结论:本研究借助高通量测序技术成功构建基于荧光PCR法的RASSF1A基因甲基化定性检测方法,操作简便、成本低、效率高,适用于临床RASSF1A基因甲基化状态常规化检测。

试论医疗器械生产质量管理体系相关问题

在现代化医疗发展过程中,医疗器械的使用非常重要,有助于提高我国现代化医疗水平,满足临床需求。在医疗器械前期生产环节,相关管理人员需要加强对质量控制的重视程度,落实精细化的工作原则,严格按照医疗器械生产质量管理规范的要求,约束好不同的工作行为,减少医疗器械质量问题的发生概率,使医疗器械生产质量管理效果能够符合预期的要求,为后续使用奠定坚实的基础。