远程病理会诊的建立及应用

病理诊断是疾病诊断的最后诊断,病理诊断决定了患者的治疗方案选择和预后的预测。但目前由于病理医生的短缺,尤其是基层医院病理医生的严重短缺,病理诊断水平的参差不齐,制约了基层医院临床诊疗水平的提高和发展。病理会诊是解决基层医院病理诊断困难的重要手段之一,但传统的病理会诊方式费时、费钱,效率低,上级医院会诊明确后,患者即从基层医院流失,不利于分级诊疗和基层医院的进步和发展。随着数字切片技术的不断发展以及网络传输速度的提高,远程病理会诊应用得到极大的发展,其应用日益广泛,可以解决组织病理学、术中冰冻切片及细胞学等远程病理会诊,还可进行远程教学。远程病理会诊及时、高效、灵活等优势确保了病理诊断质量,解决了基层医院病理资源短缺和病理诊断水平参差不齐的问题,减轻患者经济负担,同时对提高基层医院临床的诊疗水平和降低了医疗风险起到积极的作用。

不同温度及染色方法对细胞DNA倍体诊断的影响

目的通过介绍3种Feulgen染色法,以经典的标准Feulgen染色法作为对照,评估温度及染色方法对细胞DNA倍体诊断的影响。方法根据细胞病理学TBS诊断标准,将收集的标本划分为未见上皮内病变/恶性肿瘤(NILM)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)两组,采用标准Feulgen染色法(25℃)、改良Feulgen染色法(40℃)、快速Feulgen染色法(55℃)对这两组涂片分别染色,用MotiCytometer全自动细胞图像分析系统测定各倍体[二倍体(2c)、四倍体(4c)、多倍体(> 4c)]细胞核积分光密度(IOD)及其变异系数(CV)值,绘制酸解曲线图,并对测量结果进行统计分析。结果 3种染色法细胞核染色深,核轮廓清晰,胞浆及玻片背景干净。标准Feulgen染色法最佳水解时间为40~70 min。改良Feulgen染色法最佳水解时间为15~30 min。快速Feulgen染色法反应迅速,平台期短,在0.5~3.0 min IOD差异存在显著统计学意义(F=12.40,P <0.01),而1.0~2.0 min IOD差异无统计学意义(F=0.34,P> 0.05),故1.0~2.0 min可作为最佳水解时间。3种染色法2c细胞核IOD最大值分别为127、128、127,差异无统计学意义(F=0.00,P> 0.05),4c及> 4c细胞3种染色法反应最大值差异均无统计学意义(P> 0.05)。同一温度下正常细胞、病变细胞最佳反应时间一致。结论不同温度下的Feulgen染色方法各具优劣,病理诊断工作者在选择染色温度时,应综合考虑水解、染色之间的关系,根据实验室的需求选用适宜的染色方法。

细胞DNA图像自动扫描与分析(DNA-ICM)技术在胸科恶性肿瘤诊断中的应用

目的通过对DNA图像分析(DNA image cytometry,DNA-ICM)技术在胸科恶性肿瘤病变诊断应用的研究,寻找该技术在相关病变诊断方面潜在的优势。方法选取安徽省胸科医院2015年5月~2017年5月间送检的4 402例胸科疾病患者,选取其中701例符合要求的标本进行DNA-ICM计算机扫描与自动分析,根据分析结果区分阳性、可疑、阴性诊断,与活检结果及临床基线数据进行对比分析。结果明确恶性肿瘤病变患者的细胞倍体出现异常者可达65%,未明确诊断恶性肿瘤但提示有恶性可能的患者细胞倍体异常率为64%,而在非恶性肿瘤病变患者中则仅为8%。综合评估显示,细胞DNA倍体诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为73%、93%、71%、94%。OR分析发现恶性肿瘤病变比非恶性肿瘤病变引起倍体异常的风险比是23.236。结论 DNA-ICM技术对于胸科常见恶性肿瘤诊断有重要的临床应用价值。

基层医院病理科病理远程会诊

目的探究病理远程会诊在基层病理科的应用价值。方法通过对海沧医院2014年4月—2017年7月在卫健委中国数字病理诊断与质控平台上申请会诊的127例病例进行回顾性分析。综合分析病理诊断的系统分类、报告耗时、确诊率等,评估病理远程会诊在基层病理科的应用价值。结果127例会诊病例中,按系统分类前三位的是呼吸系统(占比17.3%),妇产科(占比15.7%),消化系统(占比12.6%),97.6%的病例在48小时内获得报告,其中明确性诊断57例(占比44.9%),不能完全肯定性诊断55例(占比43.3%),描述性诊断15例(占比11.8%)。其中倾向或明确恶性诊断61例(占比48.0%),交界性或癌前病变23例(占比18.1%),良性或炎性反应性改变43例(占比33.9%)。在97例已有初步诊断的病例中82例(占比84.5%)初步诊断与二次诊断基本符合。结论远程病理会诊已逐渐成为基层医院病理科解决疑难病例诊断的重要解决方法之一,但不能彻底取代基层医院的所有病理诊断工作。而基层医院病理科的规范化建设和人才培养的加强,也将进一步促进远程病理会诊更广泛和深入的发展。

Feulgen-EA双重染色固定液应用评价

目的对Feulgen-EA染色再固定环节进行应用评价。方法运用细胞图像分析系统对经过冰醋酸(乙酸)、AF、改良AF、Clarke、Bohm-Sprenger 5种固定液再固定后的细胞切片进行扫描,比较细胞核积分光密度(IOD)、变异系数(CV)、Area的差异,获得适合核DNA再固定的固定液,同时探讨温度对固定的影响,通过EA对细胞浆染色,比较胞浆着色效果。结果 DNA再固定宜选用AF或Bohm-Sprenger固定液反应30 min,当温度过低时,影响DNA的固定,相应地延长固定时间,EA对胞浆染色效果良好。结论 AF、Bohm-Sprenger固定液能满足Feulgen-EA双重染色的要求。

实用化改良Feulgen染色法的研究

目的：探讨一套具有重复性强、染色稳定、耗时短、可大规模推广的改良Feulgen染色法（TEM35），为临床科研的应用提供方法学指导。方法选取该所2014年3~4月收集的符合实验条件的21例液基宫颈标本，每例宫颈标本混匀后制成2张片子，将42张片子分为两组，每组各21张，采用TEM35、经典Feulgen染色法（TEM25）分别对两组涂片染色，采用Motic DNA图像分析系统测量二倍体细胞核的积分光密度（IOD）及其变异系数（CV），并对测量结果进行统计学分析。结果 TEM25所得的整体IOD平均值为114.554，而TEM35所得平均值为112.933，IOD一致性较好（Kendall′sτ=0.692，P＜0.01）。TEM25所得CV值为8.166，而TEM35所得CV值为7.732，CV一致性略好（Kendall′s τ=0.568，P＜0.01）。结论实用化的TEM35所获结果与TEM25所获结果高度一致，且TEM35耗时短、染色特异性好。

宫颈细胞DNA定量分析在筛查宫颈病变中价值

目的探究宫颈细胞DNA(脱氧核糖核酸)定量分析在宫颈病变筛查上的临床价值。方法选取2015年3月—2018年3月期间接受宫颈病变筛查的1 620例受检者,先后为其采取液基细胞学检查与宫颈细胞DNA定量分析,以病理诊断结果作为金标准,将两种方法的检查结果分别与病理诊断结果进行对比,计算两种方法的阳性检出率。结果液基细胞学检查的阳性检出率为3.70%,宫颈细胞DNA定量分析的阳性检出率为6.91%,后者高于前者,差异有统计学意义(χ^2=62.342,P=0.000<0.05)。结论与液基细胞学相比,宫颈细胞DNA定量分析于宫颈病变筛查中有着更高的临床诊断价值。

细胞DNA倍体分析对降低宫颈癌筛查假阴性率的作用

目的探讨细胞DNA倍体分析法对降低宫颈癌筛查假阴性率的作用。方法收集厦门农村妇女宫颈细胞学标本19 174例,取材后同时采用细胞DNA倍体分析技术和常规细胞学双盲检测,并以阴道镜下活体组织检查结果为金标准。结果在19 174例受检者中,常规细胞学诊断阴性18 629例(97.16%),阳性545例(2.84%);DNA倍体分析阴性18 358(95.74%)例,阳性813例(4.24%)。收集到的300例有活检结果以≥子宫颈上皮非典型增生(CIN)Ⅱ级为参照,常规细胞学阳性预测值和阴性预测值为(61%vs 65%);DNA倍体分析的阳性预测值和阴性预测值为(66%vs 100%)。两者联合诊断可以提高敏感性和阴性预测值。结论细胞DNA倍体分析可以降低常规细胞学筛查宫颈癌的假阴性率。

甲状腺细针穿刺细胞学病理诊断86例分析

甲状腺结节是临床多发性甲状腺疾病,根据其病变性质可分为良性结节、恶性结节2种,病变形式主要为甲状腺瘤、甲状腺肿以及甲状腺恶性肿瘤(甲状腺癌)。甲状腺结节好发于女性群体,而早期准确诊断结节良恶性是治疗疾病的关键所在[1]。细针穿刺细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)在近年来甲状腺结节良恶性诊断中被广泛应用,具有操作简便、创伤小、诊断准确率高等优势[2]。本研究就细针穿刺细胞学病理诊断在86例甲状腺结节患者中应用效果进行如下探讨。

细胞图像DNA倍体分析结合高危型HPV、支原体和衣原体检查与宫颈上皮内瘤变相关性研究

目的 探讨宫颈细胞DNA倍体、高危型HPV、支原体和衣原体检测结果与宫颈上皮内瘤变的相关性,以期结合宫颈感染情况,预测宫颈筛查结果阳性妇女真正罹患宫颈癌前病变的风险,避免宫颈过度治疗.方法 将参加筛查的285名育龄妇女分别采用宫颈细胞图像DNA倍体分析（DNA-ICM）、高危型HPV检查（PCR法）、支原体（UU/Mh）以及衣原体（CT）检查.以阴道镜下宫颈活检的病理学诊断为金标准,分别计算了各种检查方式,对宫颈病变诊断的敏感性、特异性、预测值等.结果 在285个病例的活检结果中,共有慢性炎症179例,CIN Ⅰ级60例,CIN Ⅱ级20例,CINⅢ级25例;癌1例.Logistic回归分析显示,细胞DNA倍体异常与宫颈癌及癌前病变相关性最为显著,其次为高危型HPV感染.UU/Mh和CT感染均无明显相关性.所有存在微生物感染患者中,CINⅠ罹患者中32.43％为双因素感染,而CIN Ⅲ患者为56％.而在CIN Ⅱ中单独出现HR HPV感染的占50.00％,而CIN Ⅲ中占40％.结论 宫颈细胞DNA倍体阳性合并高危型HPV感染者应高度警惕为癌变高危人群,若同时出现UU/Mh感染,将有助于提高诊断的准确性.

无醛固定液与醛类固定液对细胞核DNA及细胞质着色的影响

目的旨在探究无醛固定液与醛类固定液对细胞核DNA及细胞质着色的影响。方法通过运用DNA定量分析系统(ICM)对分别经过8种不同固定液固定的细胞核DNA含量(IOD)、离散系数(CV)、DNA指数(DI)、细胞核面积进行测量,联合细胞学染色,分析不同固定液对核DNA及细胞质染色的影响。结果醛类固定液优于无醛固定液,固定液中的甲醛对Feulgen-eosin联合染色有重要影响。结论采用醛类固定液进行后固定,硫堇对细胞核DNA染色,与细胞学染色相结合,获得了良好的染色效果,为后续的多技术联合诊断提供依据。

FE染色及DNA倍体分析技术在宫颈癌早期筛查中的应用

目的探讨FE染色及DNA倍体分析技术在宫颈癌早期筛查中的价值。方法选取厦门市海沧区2015年宫颈癌筛查的标本5 000例,分别采用巴氏染色和人工阅片以及FE染色和DNA倍体分析后阅片两种方法对同一例标本进行诊断,并追踪活检结果及人乳头状瘤病毒(HPV)检测结果。比较两种阅片方法诊断的效率性和非典型细胞及以上病变(ASC+)的检出率,分析同一病例两种阅片方法诊断的差异性,以及与活检结果的符合率、敏感性和特异性。结果 FE染色和DNA倍体分析后阅片效率提高150%。FE染色和DNA倍体分析后阅片ASC+检出率较人工阅片有所提高,但差异无统计学意义(P>0.05),在对同一病例人工阅片为未见上皮内病变或恶性病变(NILM)、意义不明确的非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)和不除外高级别鳞状上皮内病变的非典型鳞状上皮病变(ASC-H)中,部分阴性病例在FE染色及DNA倍体分析后阅片为阳性,不确定诊断的病例分流至明确的诊断。比较两种阅片方法细胞学与组织学的符合率,在诊断为NILM中FE染色和DNA倍体分析后阅片符合率较人工阅片高(P<0.05),在诊断为ASC-US、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)时两者的符合率差异不大。FE染色和DNA倍体分析后阅片的敏感性较人工阅片敏感性高(P<0.05)。结论 FE染色和DNA倍体分析后阅片相比传统的人工阅片具有更高的筛查敏感性,对不确定的诊断具有一定的分流作用,提高了诊断的准确性。