橙皮素调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路对D-半乳糖诱导的白内障大鼠氧化应激损伤的影响

目的:探究橙皮素对D-半乳糖诱导的白内障大鼠氧化应激损伤的影响以及调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路的机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、橙皮素低、高剂量组、橙皮素高剂量+Nrf2抑制剂ATRA组,除假手术组,其余组均通过皮下注射200mg/kg的D-半乳糖建立白内障大鼠模型。阳性对照组灌胃复明胶囊(30mg/kg),橙皮素低、高剂量组分别灌胃橙皮素(50mg/kg、150mg/kg),橙皮素高剂量+ATRA组先灌胃橙皮素(100mg/kg),再腹腔注射ATRA(10mg/kg)。裂隙灯观察双眼晶状体组织浑浊程度;HE观察各组晶状体上皮组织形态学变化;TUNEL法检测晶状体上皮组织细胞凋亡率;ELISA测定晶状体中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;Western blotting检测晶状体中Keap1、Nrf2、HO-1蛋白的表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠模型组晶状体上皮组织出现细胞排列紊乱、水肿、间隙增大等病变;晶状体浑浊程度、上皮细胞凋亡率、Keap1、细胞质Nrf2蛋白表达升高,SOD、CAT、GSH-Px活性、细胞核Nrf2、HO-1蛋白表达均降低(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组和橙皮素低、高剂量组大鼠晶状体上皮损伤减轻;晶状体浑浊程度、上皮细胞凋亡率、Keap1、细胞质Nrf2蛋白表达降低,SOD、CAT、GSH-Px活性、细胞核Nrf2、HO-1蛋白表达均升高(P<0.05)。Nrf2抑制剂ATRA可显著减弱高剂量橙皮素对白内障大鼠晶状体损伤的改善作用。结论:橙皮素可减轻D-半乳糖诱导的白内障大鼠氧化应激损伤,可能通过抑制Keap1表达,促进Nrf2/ARE通路活化实现。

山奈酚调节PI3K/Akt信号通路对亚硒酸盐致白内障大鼠晶状体组织损伤的影响

目的:研究山奈酚(KAE)通过调节磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对亚硒酸盐致白内障大鼠晶状体组织损伤的影响。方法:亚硒酸盐诱导法建立白内障大鼠模型。将大鼠分为对照组(NC组),模型组(M组),KAE低剂量(KAE-L)、中剂量(KAE-M)、高剂量(KAE-H)组(5、25、50 mg·kg^(-1)),KAE高剂量+通路抑制剂LY294002(H+LY294002)组(1.5 mg·kg^(-1))。十字格法检测晶状体透明度;HE染色检测晶状体病理学变化;TUNEL检测晶状体上皮细胞凋亡;试剂盒检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平及晶状体中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;蛋白质印迹法检测凋亡蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(C-Caspase)-12、C-Caspase-3、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达。结果:与NC组相比,M组大鼠晶状体浑浊程度高,出现上皮细胞减少等损伤,上皮细胞凋亡率,MDA、IL-6、TNF-α水平,Bax、C-Caspase-12、C-Caspase-3表达显著增高(P<0.05),SOD水平、GSH-PX水平、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt显著下降(P<0.05)。与M组相比,KAE-M、H组大鼠晶状体透明度恢复,病变显著好转,上皮细胞凋亡率,MDA、IL-6、TNF-α水平,Bax、C-Caspase-12、C-Caspase-3表达显著下降(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值上调(P<0.05)。LY294002明显减弱了KAE激活PI3K/Akt信号通路对白内障大鼠晶状体的保护作用。结论:KAE可能通过激活PI3K/Akt信号通路,改善亚硒酸盐致白内障大鼠晶状体组织损伤。