云南省双江县山羊雷公藤中毒的调查

2015年5月,云南省双江县部分区域放养的山羊发病,主要症状表现为部分或全身脱毛、消瘦、皮肤瘙痒和皮肤布满米粒大灰白色结节,部分发病羊只死亡,9月份后逐步康复,此后每年都在原发病区域反复发生该病,当地兽医使用体表寄生虫药物进行治疗,效果不佳。2018年7月,市县联合开展流行病学调查,并于2018年8—9月和2019年5—6月在双江县雷公藤生长区域开展了山羊食入性雷公藤中毒临床试验。根据发病情况、临床症状、剖检病变、流行病学调查和临床试验综合分析,诊断为山羊食入性雷公藤中毒。自2018年开始,该地采取季节性轮换放牧、合理控制养羊数量等综合防控措施,截至2022年6月,原发病区域内山羊未再次出现脱毛症状。

云南省双江县4种多足摇蚊翅膀形态特征及COI基因序列分析

明确云南省双江县布京村大勐峨组黄牛养殖场采集的4种多足摇蚊翅膀形态特征和COI基因序列分子特征。2020年4月在云南省双江县采集摇蚊标本,采用体视显微镜根据虫体形态学特征对采集到的摇蚊进行初步鉴定,选取11只摇蚊进行翅膀形态特征观察,同时提取这11只摇蚊基因组DNA,采用COI基因特异引物进行PCR扩增,测序,采用DNA Star、MEGA X等软件进行核苷酸同源性和系统进化分析。共采集摇蚊标本160只,其中雄虫9只(5.6%)、雌虫151只(94.4%)。根据翅膀淡斑和暗斑的数量、形态、大小、位置分为4类,分子鉴定结果显示本次双江采集的摇蚊也分为4种,即Polypedilum sp 3 SC(KU497064)、Polypedilum sp 2 SC(KU497084)、P.japonicum和P.scalaenum,其构成比分别为81.25%、11.25%、3.75%和3.75%。结论:双江县可能存在4种多足摇蚊属摇蚊,Polypedilum sp 3 SC(KU497064)摇蚊为优势摇蚊。

浅谈加快双江畜牧产业发展的对策

为加快双江畜牧产业发展步伐,做大做强畜牧产业,提高畜牧产业对国民经济的贡献率,作者在对双江畜牧产业发展现状进行调查的基础上,从双江实际出发,实事求是地分析了畜牧产业发展过程中存在的问题,提出了相应的解决措施。

浅谈双江县仔猪水肿病的危害及防治措施

对双江县仔猪水肿病的危害、发病特征进行分析。

发展双江自治县生猪业的思考

为做大做强双江生猪业，提高生猪业对国民经济的贡献率，作者在对双江生猪业发展现状进行调查的基础上，分析了生猪业发展过程中存在的问题、发展优势，提出了相应的对策措施。

云南省师宗县蚊虫中版纳病毒核酸检测及其序列分析

为了解云南省师宗县五龙乡和高良乡的蚊虫携带版纳病毒(BAV)情况。2013年7月在师宗县五龙乡和高良乡牛圈、猪圈、羊圈采集蚊虫标本,共采集库蚊、按蚊、伊蚊、Lufzia和阿蚊等5个属的7种蚊虫3705只,分为88批进行研磨,从蚊虫悬液中提取总RNA,反转录合成CDNA,采用版纳病毒12节段特异引物进行检测,其中1批蚊虫样本(SZ32)版纳病毒RT-PCR扩增阳性,扩增阳性产物进行测序,获得849个核苷酸(nt)序列。采用生物信息学软件进行同源性和遗传进化分析,结果显示从SZ32批蚊虫样本获得的序列与云南省和越南分离的版纳病毒位于A1基因亚型的进化分支内,核苷酸和氨基酸同源性分别在93.7%~98.4%、95.6%~98.7%,而与中国北方地区分离的版纳病毒(A2基因亚型病毒)和印度尼西亚分离的版纳病毒(B基因型)位于不同进化分支内,核苷酸同源性低于91.3%,氨基酸同源性低于93.4%,提示SZ32批蚊虫中检测到版纳病毒。表明在云南省师宗县的蚊虫存在A1基因亚型版纳病毒流行,其遗传进化关系与云南省边境地区流行的版纳病毒株较密切。

牛结节性皮肤病病毒检测及蠓、蚊携带病毒调查

【目的】了解牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)在自然感染状况下病牛的带毒状况及其潜在的传播媒介种类,为牛结节性皮肤病防控提供参考依据。【方法】于2021年7月在云南省文山市采集疑似发病牛不同组织类型标本,2020年8月和2021年7月~2021年8月分别在云南省昆明市、文山市和双江县采集疑似LSDV感染的牛圈舍蠓、蚊标本,并进行形态学鉴定。采用实时荧光定量PCR方法检测发病牛不同组织及库蠓、库蚊标本中LSDV核酸;采用LSDV127基因特异引物对皮肤结节标本进行PCR扩增及测序;利用DNAStar和Mega 6.0等软件进行核苷酸序列相似性比对和系统进化分析。【结果】3头发病牛全血、血清、鼻拭子和皮肤结节标本中均检测到LSDV核酸,且皮肤结节标本中LSDV核酸扩增曲线信号最强;LSDV127基因序列分析结果显示,3份皮肤结节标本(17、18和19)的病毒核苷酸序列相似性为100%,与俄罗斯、泰国、越南和南非等LSDV分离株聚为一支,亲缘关系较近,核苷酸序列相似性在99.7%~100%之间。共采集鉴定条带库蠓、连斑库蠓和尖喙库蠓3种,库蠓标本4822只,库蚊标本150只。所有采集自发病牛圈舍的库蠓和库蚊标本LSDV核酸检测结果均为阴性。【结论】在自然感染LSDV的牛中,血液、鼻分泌物和皮肤结节等不同部位都可能为节肢动物媒介获得并传播LSDV提供很好的感染源;蠓、蚊等节肢动物媒介是否参与了当地LSDV的传播有必要进一步调查。

提高猪人工授精授胎率的技术环节

为提高猪人工授精授胎率，提出了相应的技术环节。

山羊传染性胸膜肺炎的诊断防治

山羊支原体肺炎,又称山羊传染性胸膜肺炎(Contagious caprine pleuropneumonia),俗称“烂肺病”,是由支原体引起的一种高度接触性传染病。临床表现为高热、咳嗽、呼吸高度困难,流浆液性或脓性鼻液。病变为浆液性和纤维性渗出性肺炎和胸膜炎为特征。笔者就山羊传染性胸膜肺炎诊断治疗达312只,在此方面取得很好经验,就山羊传染性胸膜肺炎的流行特点、临床表现、特征性病理变化、特效治疗方案、有效防治措施作详细阐述,供兽医同仁参考应用。

猪源假结核耶尔森氏菌的分离与鉴定

2014年8月26日云南省富宁县某生猪散养户饲养的中大猪群发生疑似猪丹毒疫情,送检病死猪组织样品经猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒II型的Real-time PCR检测,结果均为阴性。同时进行病原体的分离培养,从淋巴结中分离获得1株革兰氏染色阴性杆菌,呈两极浓染,经昆明小白鼠致病性实验、本动物回归实验、细菌生化实验鉴定,该病原体为假结核耶尔森氏菌。药敏实验结果显示该菌株对氧氟沙星、庆大霉素、诺氟沙星、头孢噻肟高度敏感,对呋喃唑酮、头孢曲松钠、四环素中度敏感,对氨苄青霉素低度敏感,对青霉素耐药。

一起番鸭感染鸭瘟、新型番鸭细小病毒、鸭圆环病毒的诊断

对昆明郊县的番鸭病例诊断,根据发病情况、临床症状、剖检病变,结合实验室细菌分离培养、病原学检测、基因序列测定等实验方法,确定养殖场该批次番鸭为鸭瘟(DP)、新型番鸭细小病毒(N-MDPV)、鸭圆环病毒(DuCV)感染。

云南亚热带地区牛蓝舌病血清学研究

云南省德宏州是典型的亚热带地区,长期以来一直存在多种血清型蓝舌病感染,由于没有进行过系统的血清学研究,蓝舌病存在状况不清楚。为了获得准确的蓝舌病分布数据,本研究采用血清学方法对该地区蓝舌病感染情况进行调查,采集了该地区内365份不同饲养方式、不同地理来源牛血清,通过竞争性酶联免疫吸附试验(C-ELISA)进行检测,获得了蓝舌病在群体、圈养、放养中的感染率数据,通过血清微量中和实验(SNT)确定存在血清型以及优势BTV血清型的情况。该研究成果对蓝舌病防控和虫媒病毒流行病学研究有一定的意义。

云南省边境地区口蹄疫3ABC抗体调查

在云南与缅甸、老挝接壤或邻近的9个边境县(市)散养户、养殖场、交易市场采集牛血清3 129份、猪血清269份,应用口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体检测间接ELISA试剂盒进行检测并统计分析。统计分析结果显示,其中四个县(市)牛口蹄疫3ABC抗体阳性率分别为55%、54.44%、56.31%、44.38%,明显偏高;其中黄牛3ABC抗体阳性率为33.83%,水牛和奶牛分别为16.16%、0;放养牛3ABC抗体阳性率为27.65%,圈养牛3ABC抗体阳性率为15.05%;入境水牛和境内水牛口蹄疫3ABC抗体阳性率分别为14.66%和18.22%,差异不显著,入境黄牛和境内黄牛口蹄疫3ABC抗体阳性率分别为54.55%和33.74%,入境黄牛3ABC抗体水平显著偏高,存在口蹄疫传入风险。

牲畜特丁磷中毒的特效治疗方法

特丁硫磷（俗称特丁磷）被广泛用于农作物种籽、种苗的保种杀虫，由于保管不善或放牧时管理不严，使牲畜误食拌有特丁磷种籽或种苗而发生中毒，双江县仅2008年1月至9月份就发生牲畜误食特丁磷农药中毒11起，中毒牲畜46头，经治疗无效死亡4头，其中：牛中毒41头，猪中毒5头。笔者治疗中毒牛26头，无一死亡，取得理想的治疗效果，现将特效治疗方法总结如下。

浅谈牛瓣胃阻塞的防治

瓣胃阻塞又名瓣胃秘结，中兽医称为百叶干，是由于前胃运动机能障碍，瓣胃收缩力降低，其内容物停滞，水分被吸收而干涸，以致形成阻塞的一种疾病。2010--2015年，诊断治疗病牛18头，经治疗治愈15头，死亡3头。

论畜禽特丁磷中毒的特效治疗方法

畜禽特丁磷中毒是畜禽误食了拌有特丁磷种子、种苗或喷洒过特丁磷杀虫剂的植物而发生中毒,甚至有的是人为投毒（属有机磷农药中毒）。1发病情况特丁硫磷（俗称特丁磷）被广泛用于农作物种子、种苗的保种杀虫。

浅谈捻转血矛线虫病对牛的危害与防治

牛捻转血矛线虫病是由寄生于牛真胃和小肠的毛园科线虫的血矛属的捻转血矛线虫引起胃肠黏膜损坏、胃肠炎、贫血、消瘦、自体中毒的一种寄生虫病。

浅谈捻转血矛线虫病对牛的危害与防治

本文对捻转血矛线虫病对我县牛的危害、临床症状、病理变化、防治等作了详细的阐述，并提出有效的防治措施。

云南省连斑库蠓形态学和分子生物学鉴定

目的采用形态学和分子生物学方法,系统鉴定在云南省采集的连斑库蠓。方法2020—2021年在云南省江城、勐腊、广南、双江县用灯诱法采集蠓虫,根据形态特征在显微镜下挑选出初步鉴定为连斑库蠓的蠓虫,采用无损伤形态的方法提取库蠓基因组DNA,扩增COI基因部分序列和ITS-1基因全长序列,使用Mega 6和MegAlign软件进行分析,同时用压片法对库蠓进行系统形态学鉴定。结果共采集到连斑库蠓5只,其中雌虫4只、雄虫1只。鉴别特征:雌虫翅径5室有1个淡斑,通常呈“V”型,凹口朝远端,臀室的3个淡斑由1条淡色带相连接;雄虫第9腹板后缘中部凹陷宽而深,阳茎中叶近锥形,抱器基节的背、腹踝较细而长,抱器端节细长向内侧弯曲。形态特征符合连斑库蠓鉴别特征。5只连斑库蠓COI基因序列375 bp,ITS-1基因全长序列396 bp,在COI基因和ITS-1基因的进化树上,云南省的连斑库蠓与中国和其他国家的连斑库蠓处于同一进化分支,COI基因核苷酸同源性为97.6%~100.0%,ITS-1基因核苷酸同源性99.0%~100.0%。COI基因和ITS-1基因种内平均遗传距离分别为0.005(0.000~0.021)和0.004(0.000~0.012)。结论通过形态学鉴定和COI基因、ITS-1基因鉴定相结合的方法对连斑库蠓雌虫、雄虫进行了全面鉴定,3种鉴定方法互为佐证,为今后连斑库蠓的鉴定提供了依据。

猪盖塔病间接ELISA检测方法的建立与应用

为建立一种快速、准确、敏感性高、特异性好的猪盖塔病检测方法,采用超速离心纯化的灭活盖塔病毒(Getah virus,GETV)作为抗原包被ELISA板,分别用GETV免疫小鼠腹水和正常小鼠腹水作为阳性、阴性对照,建立检测猪盖塔病的间接ELISA方法。采用棋盘滴定法确定最佳抗原包被质量浓度,为7.795ng/mL;通过对70份阴性猪血清的检测,确定判定标准;特异性试验表明,该方法与同属病毒以及其他易感病毒之间无血清学交叉反应,具有良好的特异性;用所建立的ELISA方法与血清中和试验(SNT)、间接免疫荧光试验同时检测不同GETV抗体效价的猪血清,结果表明该间接ELISA敏感性最高,且检测用时最短;用金标准SNT检验所建立的ELISA方法,结果显示这2种方法的一致性为88.89%,Kappa为0.776,具有较高的一致性。用建立的GETV间接ELISA方法对双江县90份临床样品进行检测,阳性率为47.78%,提示双江县猪群中存在GETV感染,盖塔病对养猪业存在潜在风险。结果表明,成功建立了猪盖塔病间接ELISA检测方法。