响应面法优化芽孢杆菌CJPE209产角蛋白酶发酵培养基的研究

采用响应面法对芽孢杆菌(Bacillus sp.)CJPE209产角蛋白酶的发酵培养基组分进行优化。在前期单因素优化的基础上利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响产酶的2个显著性因素:羽毛粉、蔗糖。在此基础上,采用最陡爬坡试验确定中心复合试验的中心点,然后对其他不显著因素进行最低添加量试验以降低生产成本和简化培养基组分。利用中心复合试验,得到预测最佳培养基组成为羽毛粉5.6 g/L、蔗糖13.6 g/L、尿素5.0 g/L、KH_2PO_4 0.4 g/L、MgSO_4 1.44 g/L、CaCl_2 1.1 g/L、NaCl 5.0 g/L,预测角蛋白酶酶活为501.9 U/m L。用预测最佳培养基来进行发酵验证试验,结果实际角蛋白酶酶活为503.5 U/m L,表明模型能较好的预测发酵后酶活。

富含谷氨酸酿酒酵母的筛选及发酵培养基优化

从农家自酿葡萄酒中筛选出一株富含谷氨酸酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)F-5,其26S rDNA核苷酸序列与S.cerevisiae TY12的26S rDNA核苷酸序列同源性为100%。以胞内谷氨酸含量为目标,采用响应面法对其发酵培养基进行了优化,建立糖蜜、工业蛋白胨和KH2PO4的二次回归模型,确定培养基最佳配方为:糖蜜(含30%蔗糖)100 mL/L、酵母浸粉10 g/L、工业蛋白胨20 g/L、MgSO_4·7H_2O 1 g/L、KH_2PO_4 0.5 g/L、FeSO_4·7H_2O 2 g/L。在此优化培养基中发酵培养24 h,胞内游离谷氨酸达到了3.29%,比优化前提高了87.8%。

富含巯基化合物酿酒酵母的筛选及发酵培养基优化

从实验室保藏的菌种中筛选出一株富含巯基化合物酿酒酵母YC-5,在初始培养基中胞内巯基含量最高为1.14%。采用响应面法对酿酒酵母YC-5的培养基配方进行优化,建立糖蜜、蛋白胨和(NH4)2SO4用量的二次回归模型,确定培养基最佳配方为:糖蜜,70mL/L;酵母浸粉,5g/L;蛋白胨,8g/L;MgSO4·7H2O,0.8g/L;KH2PO4,0.6g/L;(NH4)2SO4,0.2g/L。在通过响应面法优化后的最适培养基中发酵12h,胞内巯基含量最高可达1.82%,比未优化前提高了60%。

李子果酒澄清技术研究

采用6种单一澄清剂和2种复合澄清剂对李子果酒原酒进行澄清试验。结果表明,单一澄清剂中壳聚糖澄清效果最好,最佳加入量为0.8 g/L,澄清5 d后李子果酒透光率为89.7%,色度为0.402。单宁和明胶复合澄清剂澄清效果显著,但有色度降低的现象,单宁和明胶最佳加入量分别为0.2 g/L和0.3 g/L,此时果酒原酒透光率为92.1%,色度为0.238。壳聚糖和明胶复合澄清剂具有添加量少、澄清时间短、效果显著、不改变酒体风味和颜色的特点,壳聚糖和明胶加入量分别为0.4 g/L和0.2 g/L时,李子果酒透光率可达93.8%,色度为0.392。

转运基因对大肠杆菌利用木糖产L-乳酸的影响

为加强大肠杆菌(Escherichia coli)WL210利用混合糖产L-乳酸的能力,通过RED同源重组技术敲除了甲基半乳糖苷转运系统基因mglB、半乳糖转运系统基因galP,构建双缺陷乳酸工程菌WL230。结果表明:与出发菌株WL210相比,以6%混合糖(3%葡萄糖和3%木糖)为碳源,mglB/galP双基因缺陷菌株WL230同时可利用葡萄糖和木糖,其木糖利用速率和乳酸生产强度分别提高了298.92%、42.63%,且转化率高达90.21%。