高效抗逆转录病毒治疗后不同病毒载量艾滋病患儿T细胞亚群及其CD127表达的横断面研究

目的观察高效抗逆转录病毒治疗（HAART）后不同病毒载量艾滋病患儿T细胞亚群及其CD127表达情况。方法选择年龄小于18周岁、人免疫缺陷病毒1（HIV—1）抗体阳性、符合儿童／婴幼儿WHOHIV感染临床分期体系Ⅲ～Ⅳ期标准，并接受HAART治疗1年以上、无乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒合并感染的儿童艾滋病患者194例，抽取外周血，用流式细胞术检测CD4＋、CD8＋T细胞数，以及CD8＋CD45RA＋CD127＋-、CD8＋CD45RO＋CD127＋-、CD4＋CD45RA＋CD127＋-和CD4＋CD45RO＋CD127＋-T细胞比例，RT．PCR检测血浆HIVRNA病毒载量，根据病毒载量将艾滋病患儿分为病毒载量〈400copies／ml组和病毒载量〉1400copies／ml组。并检测52名健康儿童作为正常对照，流式细胞术检测上述CD4＋和CD8＋T细胞亚群及CD127表达。采用单因素方差分析进行统计学分析。结果艾滋病组记忆型（CD45RO＋）CD4＋T细胞比例为（45．73±8．85）％，低于对照组（53．97％±8．31％）（P〈0．05），初始型（CD45RA＋）CD4＋和记忆型CD8＋T细胞比例分别为（60．44±5．01）％和（54．69±7．71）％，均高于对照组（46．03％±9．75％、42．93％±9．25％）（P〈0．01），其中病毒载量〈400copies／ml组初始型CD4＋T细胞比例为（65．57±5．33）％，高于病毒载量／〉400copies／ml组（53．21％±5．92％）（P〈0．01）。病毒载量〈400copies／ml组艾滋病患儿CD4＋T细胞CD127＋平均比例为84．57％±3．31％，高于病毒载量／〉400copies／m1组（P〈0．05），其中记忆型CD4＋T细胞CD127＋平均比例，病毒载量〈400copies／ml组为82．35％±2．31％，高于病毒载量≥400copies／ml组（P〈0．01），低于对照组（P〈0．01），而初始型CD4 ＋T细胞CD127＋平均比例三组间差异无统计学意义。艾滋病患儿CD8＋T细胞及其记忆型和初始型亚群CD127＋平均比例分别为50．78％±7．73％、48．33％±6．54％和65．87％±5．37％，均低于正常对照组（P〈0．01）。结论HAART对艾滋病患儿CIM＋T细胞亚群的恢复与病毒载量的抑制程度有关，有效HAART治疗可以显著提高初始型CD4＋T细胞的比例，并减少记忆型CD4＋T细胞的死亡。

DC-SIGN启动子活化信号通路对HIV-15’LTR活性的影响

目的研究诱导DC-SIGN启动子活化的信号通路对HIV-15’LTR活性的影响。方法PCR法扩增DC-SIGN启动子及HIV-15’LTR序列，通过双酶切重组到荧光素酶报告质粒中，构建DC-SIGN启动子和HIV-15’LTR荧光素酶报告质粒。以PMA分化的THP-1细胞作为细胞模型，分别转染DC-SIGN启动子和HIV-15’LTR荧光素酶报告质粒，并以相应的信号通路阻断剂处理，以1000IU／ml的IL-4诱导24h后检测荧光素酶活性。结果HIV-15’LTR荧光素酶报告质粒的活性明显弱于DC-SIGN启动子，IL-4诱导可以使DC-SIGN启动子和HIV-15’LTR荧光素酶报告质粒的活性升高至2倍以上。ERK、JAK-STAT和NF-KB信号通路阻断剂均能够降低DC-SIGN启动子荧光素酶报告质粒的活性，其中ERKl／2抑制剂抑制活性最强，几乎完全阻断了IL-4的诱导效应。对于HIV-15‘LTR荧光素酶报告质粒，NF-κB信号通路阻断剂阻断效果最明显，阻断效率为52．32％，ERK信号通路阻断剂阻断效率为43．31％。结论IL-4诱导的信号通路在活化DC-SIGN启动子的同时，对HIV-15’LTR也具有一定的活化作用，并主要通过NF-κB和ERK信号通路实现。