SD胎鼠脑内WWOX表达与神经干细胞及神经元发育相关性初探

目的探讨胚胎期SD胎鼠脑内WWOX表达与神经干细胞及神经元的发育的相关性。方法通过免疫组织化学染色、尼氏染色及Western blot等方法,检测不同发育时段胎鼠脑内WWOX的表达及神经干细胞和神经元的发育特点。结果尼氏染色及免疫组织化学染色结果显示,E11-E13胎鼠脑发育仍处于神经管阶段,神经管上皮组成细胞多为神经干细胞及神经元前体细胞,WWOX表达呈下降趋势;E15天后,神经干细胞多已分化成神经元及神经胶质细胞等,神经干细胞迅速减少,神经元及神经胶质细胞等细胞成分在脑内迅速发育、增多,此期在SD胎鼠脑内新生的神经胶质细胞及脉络组织中的WWOX表达呈缓慢上升趋势,并维持至成年。结论在胎鼠脑发育过程中WWOX与神经干细胞的分化存在一定的相关性,但与神经元的发育没有直接的相关性。

微电流脉冲体外诱导神经干细胞增殖分化的研究

目的探讨微电流脉冲对神经干细胞体外增殖分化的诱导作用。方法采用联合培养和微电流脉冲技术改变神经干细胞生长的微环境,通过免疫细胞化学技术及电子显微镜技术观察神经干细胞增殖分化情况。结果骨骼肌成肌细胞及微电流脉冲均可诱导神经干细胞分化(细胞ChAT阳性率分别为5.90%和6.48%),与神经干细胞自然分化组相比差异显著(细胞ChAT阳性率为4.03%)。结论微电流脉冲对神经干细胞的体外增殖分化具有一定的诱导作用。

抑癌基因WWOX对Lewis肺癌细胞c-jun蛋白表达及其转录活性的影响

目的研究抑癌基因WWOX对Lewis肺癌细胞c-jun蛋白表达及其转录活性的影响,探讨WWOX基因的抑癌机制。方法采用脂质体转染法将WWOX基因重组真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞,RT-PCR和Western blot法检测WWOX基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平;免疫组化法检测WWOX基因转染后Lewis细胞中c-jun蛋白的表达水平;半定量RT-PCR法检测c-jun调控的4种肿瘤相关基因p21、cyclinD1、FasL及VEGF mRNA的转录水平。结果重组真核表达质粒pcDNA4.0/Myc-His-WWOX转染Lewis细胞后,WWOX基因在mRNA和蛋白水平上均得到表达;与未转染细胞和空载体转染细胞相比,WWOX基因转染细胞胞浆中c-jun蛋白的表达量升高,而细胞核中c-jun蛋白的表达量未见明显差异;p21基因mRNA的转录水平升高,cyclinD1、FasL和VEGF基因mRNA的转录水平降低。结论WWOX基因可在Lewis细胞中表达,其转染Lewis肺癌细胞后,不直接调控c-jun蛋白的表达量,但可影响其转录活性。