广泛耐药鲍曼不动杆菌OXA酶基因检测及OXA-23基因分析

目的研究台州学院医学院附属市立医院广泛耐药的鲍曼不动杆菌(Ab)苯唑西林酶(OXA酶)基因的分布特性及OXA-23基因特点。方法对60株Ab采用肉汤稀释法检测其最低抑菌浓度(MIC);聚合酶链反应(PCR)检测OXA酶的基因型,阳性产物进行DNA测序;对OXA-23阳性的菌株通过BamHⅠ酶切分析OXA-23以及周围基因的特性。结果 60株Ab对15种抗菌药物同时存在13种以上耐药;全部菌株检出OXA-2、OXA-10、OXA-24和OXA-58,为普遍流行;27株检测到OXA-51,为次要流行。普遍流行的OXA-2以OXA-2基因型(61.7%)和OXA-53基因型(21.7%)为主;OXA-10以OXA-10基因型(53.3%)和OXA-56基因型(23.3%)为主;OXA-24以OXA-24基因型(38.3%)和OXA-33基因型(36.7%)为主;OXA-58只有OXA-58(100%)为唯一基因型;次要流行的27株Ab OXA-51中有18株为OXA-51基因型(30.0%)。另外3株Ab属于OXA-23,都是OXA-23基因型,有关的基因结构包含转座子Tn2008和基因结构ISAba1-blaOXA-23。结论该院的OXA型β-内酰胺酶基因型以OXA-58与OXA-2为主要流行,而对于3株OXA-23及其周围基因检测表明,ISAba1与转座子Tn2008复合基因以及ISAba1与blaOXA-23的复合基因是其与众不同的特点。

多药耐药大肠杆菌OXA基因检测及聚类分析

目的研究笔者医院多药耐药的大肠杆菌OXA基因的分布特性。方法采用MIC法,用Microscan公司肉汤稀释法药敏板来检测细菌的药敏结果;PCR检测OXA-1 Cluster、OXA-2 Cluster、OXA-10 Cluster、OXA-20 Cluster、OXA-23 Clus-ter、OXA-24 Cluster、OXA-51 Cluster、OXA-58 Cluster等基因,阳性产物进行DNA测序以确定基因亚型;用SPSS 17.0软件作聚类分析。结果药敏试验结果,实验菌株对阿米卡星、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为60%～70%,对亚胺培南、美洛培能的敏感率为100%,而对头孢菌素类抗生素的敏感率较低,在30%以下;OXA基因PCR结果:以OXA-10 cluster和OXA-2 cluster流行为主,分别占检测菌株的31.3%和28.1%;测序结果:在OXA-10 cluster中以OXA-10基因与OXA-17为主,分别占3/10(30.0%),OXA-16基因次之,占2/10(20.0%);在OXA-2 cluster中以OXA-15基因为主,占4/9(44.4%),OXA-3基因和OXA-53基因次之,分别占2/9(22.2%);对分别以1,2,3,…,31,32编号的32株实验菌株OXA基因的检测结果聚类分析结果表明:实验菌株28-32-6-23-26-18-22-12-15-11株,8-30株,17-31-3株,1-24株,19-27-2-10-14-5株,4-29株,7-1株为OXA耐药基因克隆传播菌株;进一步对OXA基因测序结果作聚类分析结果表明:OXA-25、OXA-33、OXA-4、OXA-13、OXA-56基因型,OXA-10、OXA-17基因型,OXA-16、OXA-24、OXA-1、OXA-3、OXA-53基因型,OXA-15、OXA-20基因型为OXA耐药基因克隆传播的类型。结论在笔者医院存在OXA耐药基因医院内感染的趋势,并有暴发性流行的可能。

表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱在胃炎诊断中的应用研究

胃炎是常见消化道疾病之一。目前确诊主要依赖胃黏膜活检，但这种创伤性诊断会给患者造成痛苦。而现用的诸多实验室方法的假阳性较高。本研究用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术对胃炎患者、胃溃疡、胃癌和健康志愿者血清蛋白质行对比分析，以筛选可用于临床胃炎诊断的特异性生物标志。

老年患者多药耐药肺炎克雷伯菌的耐药性分析与耐药基因检测

目的了解浙江省台州地区的老年患者肺炎克雷伯菌耐药性及存在状况。方法采用VITEK-60型和VITEK-32型、肉汤稀释法测定并分析95株产AmpC和ESBLs肺炎克雷伯菌的药敏结果;对其中的46株采用PCR法测定产AmpC和ESBLs的耐药基因型、产AMEs的耐药基因型、喹诺酮类耐药的基因型。结果产AmpC和ESBLs肺炎克雷伯菌首选亚胺培南,对其他抗菌药物均有不同程度的耐药;46株菌株100.0%检测到TEM基因,86.9%菌株存在CTX-MⅠ,84.8%菌株有DHA基因,71.7%菌株包含CTX-MⅢ基因,21.8%菌株存在CTX-MⅡ基因,13.1%菌株存在SHV基因;80.4%菌株含到aac(3)-Ⅱ型基因型,65.2%菌株存在ant(3″)-Ⅰ型基因型,56.5%菌株检出aac(6′)-Ⅰ型基因型;78.3%菌株存在mdfA基因型,39.1%菌株存在qnrB基因型,32.6%菌株存在aac(6′)-Ⅰb基因型,30.4%菌株存在gyrA基因型,23.9%菌株含有qnrA基因型。结论产AmpC和ESBLs肺炎克雷伯菌表现多药耐药,碳青霉烯类亚胺培南是治疗效果最好的药物,同时存在2～6种不同类型的耐药基因。