台州地区1376例育龄女性MTHFR基因多态性分析

目的分析台州地区育龄女性亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)的基因多态性及其地区遗传分布特征,为临床医生指导育龄妇女制定个体化叶酸补充方案提供科学依据。方法采用荧光定量PCR技术,检测孕前或孕期检查的1376例育龄女性的MTHFR C677T和A1298C基因位点多态性,将结果和国内多地区相关研究报道进行比较分析。结果MTHFR C677T位点的CC,CT和TT基因型频率分别为41.6%,43.9%和14.5%;MTHFR A1298C基因位点的AA,AC和CC基因型频率分别为63.8%,31.4%和4.8%;MTHFR C677T位点的等位基因C、T的频率分别为63.6%、36.4%,MTHFR A1298C位点的等位基因A、C的频率分别为79.5%、20.5%。MTHFR C677T和A1298C位点的基因型频率和等位基因频率与已报道的辽源、廊坊、烟台、南宁、琼海、新乡等地比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。本地区育龄女性MTHFR基因以基因型(MTHFR C677T/A1298C)CT/AA为主,而MTHFR正常代谢型只占36.85%。结论台州地区育龄女性MTHFR基因多态性分布具有地域特异性,MTHFR基因突变检测可指导该地区育龄妇女合理补充叶酸。

线粒体融合、分裂与心肌缺血再灌注损伤的研究进展

线粒体是真核细胞中一种高度动态变化的细胞器,这种网络结构的动态平衡受线粒体融合蛋白1/2(Mfn1/2),视神经萎缩蛋白1(OPA1)和动力相关蛋白1(Drp1)的调节,并对线粒体的结构和功能有着重要的作用。心肌细胞因其高耗能性而富含线粒体,线粒体融合、分裂的动态平衡在心肌细胞的能量代谢过程中起着关键的作用。目前的研究普遍认为,心肌细胞能量代谢障碍是心肌缺血再灌注损伤的始发环节。因此,由线粒体融合、分裂异常引起的功能障碍与心肌缺血再灌注损伤密切相关。

上皮细胞转化序列2在甲状腺乳头状癌中的表达研究

目的探讨上皮细胞转化序列2(ECT2)在甲状腺乳头状癌中的表达情况及意义。方法选取2020年5至12月于台州市中心医院手术切除的甲状腺乳头状癌组织标本35例及结节性甲状腺肿组织标本32例为研究材料。采用RT-PCR法检测两种组织中ECT2 mRNA表达水平,采用免疫组化法定性检测ECT2蛋白表达情况,采用Western blot法定量检测ECT2蛋白表达水平。结果相对于结节性甲状腺肿组织,ECT2 mRNA在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平上调(2.4327±0.0127,P<0.05)。ECT2蛋白在甲状腺乳头状癌组织表达阳性率明显高于结节性甲状腺肿组织(57.1%比6.3%,P<0.05)。甲状腺乳头状癌组织与结节性甲状腺肿组织ECT2蛋白表达水平分别为1.6542±0.0159、0.4826±0.0513(P<0.05),甲状腺乳头状癌组织ECT2蛋白表达上调。结论ECT2在甲状腺乳头状癌组织中表达上调,可能为甲状腺乳头状癌早期诊断提供分子生物学依据。

miRNA-224-5p靶向JAG1抑制乳腺癌细胞自噬活性的机制研究

目的探讨miRNA-224-5p靶向JAG1抑制乳腺癌细胞自噬活性的机制。方法收集2017年1月至2018年9月在台州市中心医院接受手术治疗的40例乳腺癌患者(乳腺癌组)及同期性别、年龄相匹配的40例健康体检者(健康对照组)的血清。采用实时定量逆转录-聚合酶链反应检测血清中miRNA-224-5p的表达;采用免疫印迹试验检测乳腺癌细胞MDA-MB-231中miRNA-224-5p的表达与自噬活性的关系。采用生物信息学的软件TargetScan 7.2和MiRDB预测miRNA-224-5p作用的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验对预测的靶基因进行验证。结果乳腺癌组血清miRNA-224-5p相对表达量为188.51±59.26,明显高于健康对照组的41.63±14.29,差异有统计学意义(P<0.05)。在MDA-MB-231细胞中,抑制miRNA-224-5p的表达后自噬活性增加。双荧光素酶报告基因实验验证JAG1为miRNA-224-5p的靶基因。结论miRNA-224-5p在乳腺癌患者血清中高表达,在MDA-MB-231细胞中miRNA-224-5p通过靶向JAG1抑制自噬活性。

台州地区呼吸道感染患儿的肺炎支原体检测结果分析

目的分析台州地区呼吸道感染患儿中的肺炎支原体感染情况,为临床诊断治疗提供依据。方法采用实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)对2018年5月-2019年5月在台州市中心医院(台州学院附属医院)诊治的1 533例15岁以下呼吸道感染儿童的肺炎支原体核酸检测,并对其检测结果进行统计学分析。结果 1 533例呼吸道感染患儿中MP-RNA阳性为296例,总阳性率为19.30%,不同性别MP-RNA阳性率差异无统计学意义(χ^2=0.693,P> 0.05)。不同年龄患儿的MP-RNA阳性率在7.32%~47.74%,且随着年龄的增长阳性率呈逐渐上升的趋势,各年龄组阳性率比较差异有统计学意义(χ^2=190.105,P <0.05)。不同季节患儿的MP-RNA阳性率为10.40%~24.71%,夏季阳性率最高为24.71%,四季阳性率比较差异有统计学意义(χ^2=34.750,P <0.05)。结论台州地区MP-RNA的阳性率在不同年龄和不同季节有所不同,SAT技术是目前临床上早期诊断肺炎支原体感染的有效方法。

流式微珠阵列检测Th1／Th2细胞因子谱在感染性疾病早期诊断中的应用

病原微生物引起的感染性疾病一直是发热的主要病因，早期确定病原菌，防止抗生素的滥用是有效治疗感染性疾病、改善患者预后的关键。实验室检查在发热病因及感染病原体鉴别上有重要意义，其中微生物培养是诊断细菌的金标准，但存在耗时长、敏感性低的缺点。Th1／Th2是辅助性T淋巴细胞亚群，可分泌多种细胞因子。

miR-1246在肝癌血清中的表达及对肝癌 HepG2细胞生物学功能的影响

目的探讨miR-1246在肝癌患者血清中的表达及其对HepG2细胞生物学功能的影响。方法应用荧光定量PCR检测miR-1246在正常对照者和肝癌患者血清中的表达;将miR-1246 mimics和NC mimics分别转染至HepG2细胞,采用Transwell小室法、划痕实验和细胞克隆形成实验检测miR-1246对HepG2细胞生物学功能的影响,荧光定量PCR检测NFE2L3、Vimentin、GAS1基因的表达改变。结果 miR-1246在正常对照者和肝癌患者血清中的表达量分别为1.079(0.740,1.534)、0.132(0.068,0.324),差异有统计学意义(P<0.001);miR-1246 mimics转染HepG2细胞后,HepG2细胞穿过基质胶的细胞数为128.000±9.900,较NC mimics组(251.500±24.749)明显减少(P=0.023),划痕48 h后HepG2细胞相对迁移率为(24.833±3.351)%,较NC mimics组(31.859±7.194)%明显减慢(P=0.046),Vimentin、GAS1、NFE2L3基因相对表达量分别为0.318±0.213、0.479±0.157、0.755±0.044,较NC mimics组(1.000±0.000)表达均明显下调(P=0.046、0.043、0.030)。结论肝癌患者血清中miR-1246表达下调;miR-1246可能通过下调Vimentin、GAS1、NFE2L3基因抑制HepG2细胞的侵袭、迁移能力。

原花青素对三阴性乳腺癌增殖和糖酵解的影响

目的探讨原花青素对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和糖代谢的影响。方法加入不同浓度原花青素处理的三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和乳腺细胞MCF-10A,24 h后CCK-8试剂盒检测2株细胞活性;分别检测原花青素处理后,MDA-MB-231细胞乳糖和ATP的生成以及己糖激酶和丙酮酸激酶活性;蛋白质印迹法检测与有氧糖酵解相关酶包括乳酸脱氢酶A(LDHA)、己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶2(PKM2)以及Akt、mTOR和STAT3信号通路蛋白表达变化情况。结果原花青素能明显抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,而对乳腺细胞无影响;原花青素能显著抑制MDA-MB-231细胞乳糖、ATP的生成和己糖激酶以及丙酮酸激酶活性,抑制HK、PKM2和LDHA蛋白的表达,降低Akt、mTOR和STAT3蛋白磷酸化水平。结论原花青素能抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和糖代谢,抑制Akt、mTOR和STAT3信号通路活性可能是原花青素抑制三阴性乳腺癌细胞糖酵解的机制。