Oncotype DX方法和Magee方程对乳腺癌预后预测价值的研究进展

全球癌症统计数据显示,乳腺癌已成为全球女性发病率最高的恶性肿瘤。随着分子生物学的迅速发展,乳腺癌标准药物治疗策略是西方国家推进乳腺癌个体化精准治疗的主要组成部分。Oncotype DX是一种成熟的、食品药品监督管理局(FDA)批准的多基因检测工具,主要用于预测恶性肿瘤复发及转移风险,可指导雌激素受体(ER)阳性/人表皮生长因子受体2(HER2)阴性早期浸润性乳腺癌患者的化疗。基于现有的病理参数和乳腺癌症生物标志物,Magee方程是一种新颖、经济高效的算法,有可能替代Oncotype DX复发评分,并且已越来越常用于乳腺癌的临床管理。笔者就Oncotype DX方法与Magee方程对乳腺癌患者预后的预测价值进行总结评论,为临床治疗提供参考。

甲状腺癌相关长链非编码RNA研究进展

甲状腺癌是最常见的内分泌恶性肿瘤。近年来,其全球发病率逐年上升,我国也表现出相同的趋势。随着研究的持续深入,越来越多甲状腺癌发生、发展的关键分子标志物被发现,如长链非编码RNA(lncRNA),且部分已经在临床诊断中开展应用,但其对甲状腺癌恶性程度的评价及预后评估尚不能满足临床诊断和治疗需求。研究表明lncRNA在包括甲状腺癌在内的各类型癌症中表达失调,但其在甲状腺癌中的作用方式和调控机制尚未明确。本文就甲状腺癌相关lncRNA的研究进展作一综述。

解耦联蛋白2对氧糖剥夺/再复供神经细胞的保护作用及机制研究

目的探讨解耦联蛋白2(UCP2)对氧糖剥夺/再复供(OGD/R)神经细胞的保护作用及其机制。方法原代培养小鼠海马神经元细胞,融合率达80%左右可进行传代培养。取对数期细胞,采用UCP2-干扰小RNA(siRNA)转染的神经细胞沉默UCP2表达;将转染后的细胞随机分为UCP2-siRNA组和阴性对照siRNA组(NC-siRNA组)。采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光染色鉴定细胞,倒置相差显微镜下观察细胞状态,细胞增殖采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测。用转染后的细胞制备OGD/R模型。两组分别于复氧复糖后即刻和12、24、48 h收集细胞,应用相应试剂盒检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、琥珀酸脱氢酶(SDH)的表达水平。结果倒置相差显微镜下观察显示,NC-siRNA组细胞饱满,折光性强,胞核明显,突起清晰;海马神经元细胞经UCP2-siRNA转染干扰沉默UCP2后,细胞皱缩,折光性差,核质不清,突起不清晰。MTT法检测细胞增殖情况提示,两组细胞增殖水平均随接种时间延长呈升高趋势,从接种后48 h开始,UCP2-siRNA组各时间点细胞增殖水平均明显低于NC-siRNA组,以接种96 h时最为明显〔吸光度(A)值:1.617±0.008比1.828±0.048,P<0.05〕。随复氧复糖时间的延长,两组细胞ATP和SDH表达均呈下降趋势,ROS表达呈升高趋势,其中UCP2-siRNA组复氧复糖后即刻及12、24、48 h的ATP和SDH表达水平均明显低于NC-siRNA组,ROS表达水平均明显高于NC-siRNA组,以复氧复糖48 h时最为明显〔ATP(RLU):0.33±0.09比0.50±0.11,SDH(U/mg):0.30±0.08比0.57±0.08,ROS(μmol/L):194.54±6.64比177.29±9.35,均P<0.05〕。结论UCP2对OGD/R神经细胞存在保护作用,UCP2可能通过改善能量代谢、抗氧化等方面达到对OGD/R神经细胞的保护作用。

巨噬细胞炎性蛋白-3α在乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭患者中的表达及其诊断价值

目的筛选乙型肝炎相关的慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)血清蛋白标志物并评价其在诊断中的应用价值。方法用HBV-ACLF中国诊断标准研究(COSSH-ACLF)队列,应用细胞因子抗体芯片对HBV-ACLF患者、慢性乙型肝炎(CHB)患者和正常健康志愿者(n=5/组)的血清样本进行检测,通过微阵列显著性分析和微阵列预测分析法寻找差异表达蛋白,初步筛查诊断HBV-ACLF的血清学标志物。通过酶联免疫吸附法(ELISA)、受试者操作特征曲线下面积(AUROC)分析以及肝组织免疫组织化学等方法进行验证,发现诊断HBV-ACLF的潜在标志物。用Student t检验或Mann-Whitney U检验比较两组间的连续计量数据,用方差分析和Kruskal-Wallis检验比较多组间的连续计量数据。结果通过细胞因子抗体芯片初始筛选,发现巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)、肝细胞生长因子、E-选择素、骨桥蛋白、生长分化因子15和癌胚抗原相关细胞黏附分子1这6个细胞因子在HBV-ACLF组中的表达水平显著升高。其中,MIP-3α的表达水平经132例HBV-ACLF患者、91例CHB患者和72名正常健康志愿者血清ELISA验证,在HBV-ACLF组中显著高表达(分别为CHB组的99.6倍、正常对照组的146.9倍,P<0.0001)。AUROC分析显示,MIP-3α在HBV-ACLF患者中的高表达可作为区分HBV-ACLF和CHB的标志物,AUROC为0.995(95%CI:0.990~1.000),灵敏度和特异度分别为95.5%和98.9%。免疫组织化学显示MIP-3α在HBV-ACLF来源的肝组织中表达为阳性,在CHB来源的肝组织和正常肝组织中表达为阴性。结论血清MIP-3α水平与HBV-ACLF病理特征密切相关,MIP-3α有潜力作为HBV-ACLF诊断的血清学标志物。

D-二聚体有助于乙型肝炎慢加急性肝衰竭的诊断与预后

目的探讨D-二聚体水平对乙型肝炎相关的慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者诊断和预测预后的价值。方法利用HBV-ACLF诊断中国标准研究(COSSH-ACLF)开放队列,随机纳入142例ACLF患者为研究对象,比较ACLF患者和非ACLF患者,不同ACLF等级患者血浆D-二聚体水平,并分别以28 d和90 d为终点比较生存组和病死组患者的D-二聚体水平;研究D-二聚体和其他实验室指标以及预后评分之间的相关性;通过受试者操作特征曲线下面积(AUROC)评估D-二聚体预测ACLF患者预后的价值。并利用外部125例ACLF患者进行验证。用Student t检验或Mann-Whitney U检验比较两组间的连续计量数据,用Kruskal-Wallis检验比较多组间的连续计量数据。结果ACLF组中血浆D-二聚体水平[2588.5(1142.8,5472.8)μg/L]与非ACLF组中的[1385.5(612.0,3840.3)μg/L]差异有统计学意义(P<0.001)。ACLF-3级患者的D-二聚体水平明显高于ACLF-1/2级(ACLF-3对比ACLF-1,P<0.001;ACLF-3对比ACLF-2,P<0.05)。28/90 d病死患者的D-二聚体水平显著高于生存组的患者(P<0.001)。D-二聚体水平与凝血酶原时间、国际标准化比值、高密度脂蛋白C等指标以及各项预后评分(COSSH-ACLFs、CLIF-C ACLFs、CLIF-OFs、MELDs)呈显著正相关。D-二聚体预测ACLF患者28 d和90 d预后的AUROC分别为0.751(95%可信区间:0.649~0.852)和0.787(95%可信区间:0.695~0.878),与其他评分的预测能力相比,差异无统计学意义(P>0.05)。125例外部验证组验证了类似结果。结论D-二聚体水平在ACLF患者中显著增高,同时是影响ACLF患者28 d和90 d预后的独立预测因素。

乙型肝炎慢加急性肝衰竭前期的临床特征及预后评分模型的建立

目的探讨乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)前期患者的临床特征,并建立相应的预后评分模型。方法利用HBV-ACLF中国诊断标准研究(COSSH-ACLF)队列,回顾性分析725例乙型肝炎相关慢加急性肝功能障碍(HBV-ACHD)患者的临床特征,采用多因素COX回归分析90 d预后的相关独立危险因素并建立预后评分模型,并利用内部500例和外部390例HBV-ACHD患者进行验证。结果在725例HBV-ACHD患者中,男性为主(76.8%),96.8%患者有肝硬化基础,并发症以腹水(66.5%)多见,器官衰竭以凝血功能衰竭(4.1%)为主,90 d病死率为9.2%。多因素COX回归分析得出,总胆红素(TBil)、白细胞计数(WBC)、碱性磷酸酶(ALP)是HBV-ACHD患者90 d病死率的最佳预测指标,并建立评分模型COSSH-ACHDs=0.75×ln(WBC)+0.57×ln(TBil)-0.94×ln(ALP)+10,其受试者工作特征曲线下面积(auROC)显著高于终末期肝病模型(MELD)、MELD-Na、CTP及CLIF-C ADs(P<0.05),500例内部随机选择组和390例外部验证组均验证了类似结果。结论HBV-ACHD患者是一组以肝硬化失代偿为主、合并少量器官衰竭的人群,其90 d病死率为9.2%,COSSH-ACHDs具有更高的预测HBV-ACHD患者90 d预后的效能,为临床早期诊治提供循证医学依据。