紫云英苷对SD大鼠心肌细胞瞬时外向钾通道电流的影响

为探究紫云英苷(astragalin,AG)对心肌细胞瞬时外向钾通道电流Ito的作用,用langendorff主动脉逆向灌流法急性分离出单个SD大鼠心肌细胞,进行全细胞膜片钳试验,记录给药前后Ito的变化及激活、失活和复活过程中的动力学特征。结果表明:不同浓度的AG均表现出对Ito的抑制作用,在50、100、200μmol·L^(-1)浓度范围内,随着药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强。以给药前Ito幅值为参照,给予各浓度AG后,电流分别降至原来的(84.06±2.75)%、(66.09±4.65)%、(48.79±5.96)%,后2个浓度的效应与给药前相比具有统计学意义。在动力学特征方面,50、100、200μmol·L^(-1)浓度的AG使瞬时外向钾通道激活阈值上升,失活加速,从失活状态到活化状态的转换延长。综上,AG对SD大鼠心肌细胞上的Ito有抑制作用,此效应的产生与通道的激活、失活和失活后恢复动力学过程改变有关。

人外周血单个核细胞分离优化

为研究人外周血单个核细胞(PBMC)分离优化的条件,提高细胞的分离率与收集率,在一定程度上减少分离时间和原料,提高细胞获得率与纯度,从而满足工艺化、市场化研发免疫产品的要求,本实验从分离离心方面和洗涤离心方面列出正交表探索实验找出最佳条件。分离离心时,转速为主要影响因素,600g为最佳离心转速;洗涤离心时,分离液体积为主要影响因素,2倍分离液体积为最佳分离液体积。洗涤缓冲液的选材中,0.9%的生理盐水获得活细胞的浓度最高。基于实验结论,可通过调整优化来满足实验需求来适应实验室各条件,分离出更有活力、更多的PBMC。