三七皂苷R1对高糖诱导肾小管上皮细胞NF-κB表达的影响及相关机制研究

目的:观察三七皂苷R1对高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其对糖尿病肾病的保护机制。方法:将细胞分为正常对照组、甘露醇组、高糖组、高糖+三七皂苷R1低、中、高浓度组,采用倒置显微镜观察48h后各组细胞形态;MTT法测其增殖;q RT-PCR法和Western blot法检测其NF-κB mRNA和蛋白表达。结果:高糖刺激使HK-2细胞由铺路石样变为梭形长条状。高渗组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组相比,高糖组HK-2细胞增殖水平明显上升,细胞中NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显升高([表3、图2可以证明高糖组NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显的升高。]P<0.05)。与高糖组比较,高糖+三七皂苷R1低、中、高浓度组HK-2细胞增殖抑制明显(P<0.05),细胞中NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显降低,且干预作用呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:三七皂苷R1可减少高糖诱导HK-2细胞NF-κB的表达,对糖尿病肾脏疾病具有保护作用。

三七皂苷R1对高糖诱导HK-2细胞转分化的作用及其机制研究

目的:探讨三七皂苷R1对高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)间质转分化(EMT)的作用及其可能机制。方法:传代培养HK-2细胞,并将细胞分为4组:对照组、高渗组、高糖组、高糖+三七皂苷R1组,均培养48h。采用MTT法筛选药物浓度,western blotting法检测炎症相关蛋白NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测EMT标志性蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、人纤维连接蛋白(FN)的表达。结果:MTT显示60μmol/L以下为三七皂苷R1的安全范围。高糖组、高糖+三七皂苷R1组NF-κB p65、TNF-α、α-SMA、FN蛋白表达均显著高于对照组和高渗组(P<0.05),高渗组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);与高糖组相比,高糖+三七皂苷R1组NF-κB p65、TNF-α、α-SMA、FN表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:三七皂苷R1可抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化,减轻炎性反应,延缓肾间质纤维化,其机制可能与抑制NF-κB/TNF-α信号通路有关。