槲皮素对人肾癌细胞株细胞增殖、侵袭及其VEGF表达的影响

目的研究槲皮素对人肾癌细胞株(ACHN)细胞增殖、侵袭力的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养ACHN细胞,加入不同浓度的槲皮素进行处理后,用MTT比色分析法检测细胞增殖抑制率,采用涂有Matrigel胶的Tr-answell小室模型对传代培养的ACHN细胞进行体外侵袭检测,以Western blot法检测ACHN细胞内血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果不同浓度的槲皮素均能抑制ACHN细胞的增殖,并有明显的浓度和时间依赖性(P<0.05);Tr-answell试验结果显示,与空白对照组比较,槲皮素处理组肾癌细胞侵袭能力明显下降;槲皮素处理组VEGF蛋白表达水平均明显低于空白对照组,且呈浓度依赖性。结论槲皮素可明显抑制ACHN细胞的增殖、侵袭力,其机制可能与下调VEGF表达有关。

小干扰RNA沉默血管内皮生长因子对ACHN肾癌细胞黏附、侵袭及迁移的影响

目的观察小干扰RNA（siRNA）沉默血管内皮生长因子（VEGF）对ACHN肾细胞癌细胞生物学行为的影响。方法化学合成针对VEGF的小干扰RNA，实验分4组，转染后收集细胞，通过蛋白印迹方法检测VEGF的表达，噻唑蓝（MTY）比色法、细胞黏附实验、划痕实验及Transwell法测定细胞的增殖、黏附、迁移及侵袭能力。结果siRNA1～2组VEGF表达水平明显低于空白对照组及阴性对照组；在24、48、72h，siRNA1—2的增殖抑制率均高于空白对照组及阴性对照组（P〈0．05），其中以siRNA2组最为显著；与空白对照组比较，siRNA1—2组的细胞黏附数量明显下降[（81．5±3．1）％比（40．54-2．6）％、P〈0．05，（81．5±3．1）％比（22．5±2．4）％、P〈0．05]，其中以siRNA2组最为明显；siRNA1～2组的细胞迁移数量明显下降（162±9比81±5，P〈0．05；162-1-9比38±4，P〈0．05）；siRNA1—2组细胞侵袭能力明显下降（P〈0．05），且siRNA2组的细胞侵袭能力明显低于siRNA1组（P〈0．05）。结论VEGF基因在肾细胞癌细胞黏附、迁移和侵袭中发挥着重要作用；以靶向VEGF的siRNA转染肾细胞癌细胞，可抑制肾细胞癌细胞黏附、迁移和侵袭能力。