非粮新型蛋白源生物絮团粉的营养特性及其对水生动物的影响

生物絮团粉(biofloc meal)是生物絮团技术的副产品,因其含有大量益生菌和丰富的生物活性物质、可持续及不与人争粮等优点,作为一种非粮新型蛋白源,越来越多地受到研究者的关注。国内外相关研究证实,生物絮团粉对水生动物生长及机体健康有促进作用。文章在查阅国内外相关文献报道的基础上,概述了生物絮团粉的营养特性及其对水生动物生长性能、消化吸收功能、免疫功能、抗氧化能力和抗病力的影响,旨在为合理开发利用非粮饲料蛋白源,节约鱼粉蛋白,优化水生动物饲料配方提供依据。

大豆抗原蛋白对水生动物肠道健康的影响及改善对策

大豆抗原蛋白作为一种致敏蛋白,进入动物机体后,能引起水生动物肠道过敏反应和氧化损伤,破坏肠道结构,降低机体消化吸收功能,从而抑制水生动物的生长发育,导致大豆蛋白在水生动物配合饲料中应用受限。添加可靠的免疫添加剂可以缓解大豆抗原蛋白引起的水生动物肠道损伤,从而提高大豆蛋白的利用率。本文对大豆抗原蛋白对水生动物肠道组织结构、生长发育、消化酶活性、抗氧化能力和肠道菌群的影响进行了系统综述,并提出了由大豆抗原蛋白引起的水生动物肠道损伤的改善对策,为提高大豆蛋白源的利用率,缓解我国水产配合饲料对鱼粉资源的依赖,优化饲料配方,降低饲料成本提供理论依据。

稳定表达马NLRP3 HEK293T细胞系的构建及用于马NLRP3炎性小体的研究

为构建稳定表达马NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(eqNLRP3)的细胞系,并用于eqNLRP3炎性小体激活的研究,本研究采用同源重组的方法将经PCR扩增的eqNLRP3和GFP基因克隆至pLPCX中,构建重组表达质粒pLPCX-Flag-eqNLRP3-GFP,经PCR和测序鉴定正确后与pCGP、pVSV-G共转染HEK293T细胞,48 h后获得携带eqNLRP3的慢病毒。将该慢病毒感染HEK293T细胞,并采用嘌呤霉素筛选携带绿色荧光(GFP+)的单克隆细胞。采用western blot鉴定该细胞中eqNLRP3蛋白的表达、反应原性及细胞遗传稳定性。Western blot结果显示在146.1 ku处出现特异性条带,且传至1、4、7、10代的细胞均出现该条带,表明获得稳定表达eqNLRP3蛋白的HEK293T细胞系HEK293Teq NLRP3(2G1细胞)。采用NLRP3特异性激活剂尼日利亚菌素(Nig)处理2G1细胞1 h;将表达质粒pCDNA3.1-eqASC-HA转染2G1细胞,加入Nig处理1 h,采用激光共聚焦显微镜分别观察上述细胞中e NLRP3的聚化状态,及在2G1细胞中表达eqASC后能否形成ASC斑点(eqNLRP3-eqASC的复合物,即NLRP3炎性小体激活的典型特征)。结果显示,正常2G1细胞中呈绿色荧光的eqNLRP3弥散分布于细胞质中,加入Nig后弥散的eqNLRP3在细胞质中形成典型绿色荧光的点状聚集。转染表达eqASC质粒的2G1细胞中出现的红色荧光(eqASC)主要在细胞质中呈弥散性分布;转染表达eqASC的2G1细胞用Nig处理后形成2.5μm的中间呈绿色荧光四周呈红色荧光的典型ASC斑点。上述结果表明2G1细胞可以响应特异性激活剂并诱导eqNLRP3的聚化,招募ASC形成ASC斑点。将本实验室构建的iGLuc报告系统中的4种表达炎性小体蛋白质粒分别与EIV各蛋白对应质粒共转染HEK293T细胞,24 h后利用该报告系统检测各组细胞中的荧光素酶活性;采用western blot检测各共转染细胞中各EIV蛋白的表达对该系统中4种炎性小体蛋白表达的影响,通过上述两个试验筛选能够激活eqNLRP3炎性小体的EIV蛋白。iGLuc报告系统检测结果显示,仅表达EIV M2蛋白质粒的细胞上清中荧光素酶活性显著高于阳性对照组(P<0.05);western blot结果显示,EIV M2蛋白的表达对4种炎性小体蛋白的表达均无明显影响,表明EIV M2蛋白激活了eqNLRP3炎性小体。将表达EIV M2蛋白及表达eqASC的质粒共转染2G1细胞,24 h后经激光共聚焦显微镜观察以进一步验证上述结果。结果显示,该组细胞中带绿色荧光的eqNLRP3出现点状聚集,并招募细胞质中带红色荧光的eqASC形成了ASC斑点,与i GLuc报告系统筛选结果一致。上述结果表明,EIV感染对HEK293Teq NLRP3细胞系中的eqNLRP3产生了聚化效应,并招募ASC形成ASC斑点。本研究建立了稳定表达eqNLRP3蛋白的HEK293T细胞系,为马属动物病原感染激活NLRP3炎性小体的评价奠定了物质基础。

10种常见草本北药抑菌活性研究进展

我国北方中药资源丰富,药用价值高,应用范围广。在当今“减抗”、“限抗”的大环境下,依托我国丰富的中药资源,以中药提取物作为抑菌剂逐步减少乃至替代抗生素在畜牧生产中的使用具有重要意义。本文综述了10种北方常见草本中药的生长特性、抑菌活性和相关药理作用,以期为草本北药抑菌活性成分提取、抑菌机制研究以及北药资源开发和利用提供有益参考。

鱼类肠道组织结构、功能、影响因素及其保护物质的研究进展

肠道可以吸收营养物质并抵御病原体、微生物和细菌毒素进入内部环境,因此在鱼类健康中起着重要作用。作为鱼类与外部环境接触面积最大的器官,肠道受到多种因素的侵害,严重制约了鱼类的健康生长。文章从鱼类肠道组织结构、肠道的屏障功能、引起肠道损伤的因素以及有效缓解肠道损伤的物质等四个方面进行综述,可为进一步了解鱼类肠道健康的分子机制及相关产品的研发提供参考。

益生芽孢杆菌对鱼类生长与抗病力影响的研究进展

随着我国水产养殖业的快速发展,我国水产养殖的产量已达到世界总产量的3/4。而随着鱼类产量的提高,鱼类疾病成为水产养殖业的一个严峻的问题。过去很长一段时间,抗生素等药物一直是预防鱼类疾病的有效选择,但抗生素的大量使用也导致了药物残留和耐药性细菌的出现,同时也损害鱼类的免疫系统,并对鱼类的消化道菌群产生不利影响。鱼类的肠道环境是机体抵抗疾病发生的重要生理屏障,吞噬细胞对抗原摄取和处理主要发生在鱼类肠道的黏膜表面,黏膜屏障与病原微生物之间的动态相互作用可以诱发炎症反应以及改变肠道的屏障功能。

A-FABP基因外显子1多态性与北京油鸡、吉林黄鸡及其杂交F1代屠宰性能和肉品质的相关性分析

为了探讨脂肪酸结合蛋白(adiposefatty acid binding protein,A-FABP)基因外显子1的多态性与北京油鸡、吉林黄鸡及其杂交F1代屠宰性能和肉品质的相关性,试验选择120~150日龄的吉林黄鸡自交亲本450只、北京油鸡自交亲本510只、北京油鸡♂×吉林黄鸡♀杂交F1代(正交)350只、吉林黄鸡♂×北京油鸡♀杂交F1代(反交)330只,均为雌雄各半,采用基因组PCR直接测序法筛选SNP位点,利用高分辨率熔解曲线技术(HRM)和竞争性等位基因特异性PCR法(KASP)进行多态性分析;同时测定各鸡群鸡只屠宰性能指标(活重、屠体率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率、腹脂率、翅膀重、消化道长度、肌胃重、脚重)和肉品质(胸肌和腿肌的pH_1值和pH_(24)值、滴水损失、失水率、熟肉率);最后将各基因型与屠宰性能和肉品质进行相关性分析。结果表明:在吉林黄鸡、北京油鸡及正反交F1代群体中的A-FABP基因外显子1中均存在C/T突变,且有CC、CT、TT 3个基因型;其中CC基因型在吉林黄鸡中为优势基因型,CT基因型在其他3个鸡群中为优势基因型,等位基因C在4个鸡群中均表现为优势等位基因;C/T突变在4个鸡群中均处于Hardy-Weinberg平衡状态,中度多态(0.25<PIC<0.5)且杂合度较低,有一定的遗传学意义。北京油鸡中CT基因型腿肌嫩度显著低于CC基因型(P<0.05),正交群体中CT基因型半净膛率与腿肌pH24值显著高于TT基因型(P<0.05),反交中CT基因型半净膛率显著高于CC基因型(P<0.05)。说明A-FABP基因外显子1的C/T突变可能是影响屠宰性状的潜在位点。

NADC30-like PRRSV和PCV2d共感染与继发感染PCV2抗体阳性断奶仔猪的致病性

为了确定近年来国内主要流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NADC30-like谱系与猪2型圆环病毒(PCV2d亚型)共感染与继发感染后对猪的致病作用,使用本实验室分离的NADC30-like谱系PRRSV与PCV2d毒株感染PCV2抗体阳性断奶仔猪。选取30只5周龄PCV2抗体阳性断奶仔猪,随机均分为6组,分别为PBS、PCV2、PRRSV、PCV2-PRRSV、PRRSV-PCV2和Co-PRRSV-PCV2感染组。记录各组临床指征(体温、体质量、临床症状和存活率);检测特异性抗体及TNF-α、IFN-γ、IL-4和IL-10共4种细胞因子的变化;并对主要组织脏器的病理变化进行分析。结果显示,各感染组在感染PRRSV后均出现体温升高、体质量减轻、咳喘、腹泻、精神沉郁等临床症状;Co-PRRSV-PCV2、PRRSV-PCV2和PRRSV组表现出更为严重的肉样变和淋巴细胞浸润;先感染PCV2可以延迟PRRSV特异性抗体的产生;PRRSV组表现出高水平的TNF-α和IL-10;NADC30-like PRRSV与PCV2d共感染与继发感染PCV2抗体阳性仔猪会出现严重的临床症状和病理变化,PRRSV单感染同样表现出严重的临床症状但病理变化相对较轻。

益生菌在维护宠物健康及疾病防治中的应用及作用研究进展

随着养宠家庭数量增多,人们对宠物健康越来越关注。肠道微生物群在动物健康中起着至关重要的作用,不仅影响宿主营养物质的代谢和吸收,还能调节宿主健康。目前已有研究证明,益生菌在宠物犬、猫生长发育过程中发挥诸多有益功能,如促进生长发育、增强营养代谢及免疫功能,保护犬、猫免受病原微生物感染等。宠物益生菌的应用、宠物肠道微生物群特征、益生菌作用机制进行探讨,以期为益生菌在宠物疾病防治中应用提供理论依据。

益生菌调节肠道黏膜免疫研究进展

肠是脊椎动物最大的免疫器官,肠黏膜免疫稳态需具备良好的黏膜上皮屏障完整性,提高吸收能力从而抵御病原的侵袭。因此,肠上皮屏障功能的破坏会导致多种肠道疾病。肠上皮屏障包括多种肠上皮细胞,其除消化作用外还可调节肠黏膜免疫反应。肠道内存在大量共生菌群,这些微生物对营养物质的摄入、新陈代谢和免疫稳态具有调节作用,其中益生菌可调节肠道屏障功能并激活黏膜免疫应答。阐述黏膜相关免疫细胞的功能,介绍益生菌及工程菌的免疫调节特性,基于黏膜免疫及其机制的研究来分析并比较不同益生菌对黏膜免疫的调节作用,以期为预防疾病、缓解肠道损伤及黏膜疫苗的研制奠定理论基础。

母鼠长期铜暴露对子代雄性SD大鼠睾丸功能的影响

旨在研究母鼠长期铜暴露对子代大鼠睾丸功能的影响。将24只健康雌性SD大鼠随机分为A、B、C 3组,每组8只,A、B、C组分别饲喂AIN-93G基础日粮、AIN-93G基础日粮+CuSO4120 mg/kg、AIN-93G基础日粮+CuSO4240 mg/kg 3种不同铜水平日粮,试验期8周。雌鼠与性成熟雄性SD大鼠交配受孕后,在妊娠期和哺乳期继续铜覆盖。断乳后饲喂AIN-93G基础日粮,待子代雄性大鼠10周龄后,每组随机取8只,分别标记为A0、B0、C0组,记录体质量及睾丸、附睾脏器指数、检测睾丸组织铜水平、血清铜水平及抗氧化指标,计算精子数量及活力,HE染色观察睾丸生精小管结构。结果显示,随着铜水平增加,子代大鼠体质量下降;血清和睾丸中的铜增加;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性在亲代覆盖240 mg/kg铜组显著降低(P<0.05);大鼠血清丙二醛(MDA)水平随铜水平的增加而增加(P<0.01);日粮添加240 mg/kg铜的亲代其子代大鼠血清铜蓝蛋白(CP)显著高于日粮不添加铜的子代大鼠(P<0.05);睾丸生精细胞层数逐渐减少,各级生精细胞排列紊乱、数量减少或缺失,管腔内成熟的精子数量在亲代添加240 mg/kg铜的子代大鼠中显著减少(P<0.05)。结果表明,高铜诱导子代大鼠发生氧化应激,阻碍了大鼠的精子成熟和精子发生,导致生殖毒性。

大豆蛋白源替代鱼粉对黄金鲫生长、蛋白质酶活力及免疫指标的影响

为研究膨化大豆粉、发酵豆粕以及豆粕对黄金鲫(Carassius auratus)生长、蛋白酶活力、蛋白质代谢酶活力及非特异性免疫指标的影响,以初始体质量为(43.31±2.11)g/尾的黄金鲫为研究对象。在黄金鲫的配合饲料中,以膨化大豆粉、发酵豆粕和豆粕分别替代60%的鱼粉,配制成4种等氮等脂肪的配合饲料,分别为对照组、膨化大豆粉组、发酵豆粕组和豆粕组,在室内控温单循环养殖系统中,进行为期8周的饲养试验。饲养试验结束后,采用福林-酚试剂法,测定蛋白酶活力;采用试剂盒测定肝胰脏中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶和溶菌酶活力。结果表明:发酵豆粕组黄金鲫特定生长率高于豆粕组(P<0.05);发酵豆粕组黄金鲫蛋白质效率低于对照组(P<0.05);发酵豆粕组黄金鲫肝胰脏、前肠、中肠和后肠蛋白酶活力显著低于对照组(P<0.05);发酵豆粕组黄金鲫肝胰脏和后肠蛋白酶活力显著高于膨化大豆粉组和豆粕组(P<0.05);发酵豆粕组黄金鲫谷丙转氨酶活力低于对照组(P<0.05);发酵豆粕组黄金鲫碱性磷酸酶活力低于膨化大豆粉组(P<0.05);发酵豆粕组黄金鲫超氧化物歧化酶活力高于豆粕组(P<0.05)。黄金鲫配合饲料中膨化大豆粉、发酵豆粕和豆粕替代鱼粉比例为60%时,发酵豆粕替代鱼粉效果最好,膨化大豆粉次之,而豆粕的效果最差。

芽胞杆菌拮抗人或动植物病毒的机制研究进展

病毒性疾病严重威胁着人类及动植物的健康。目前正在应用的防治病毒性疾病的方法及其作用有限,开发无毒副作用、生态友好的抗病毒产品防控病毒性疾病非常必要。益生芽胞杆菌可产生核糖核酸酶、胞外聚合物等代谢物或成分,通过增强机体免疫功能等机制发挥抗病毒作用,有望被进一步开发用于病毒性疾病的防治。