一种多酚氧化酶提取新方法与几种常规方法的比较研究

[目的]对一种新的多酚氧化酶的提取方法与几种常用提取方法的综合效果进行比较。[方法]以苹果梨为研究对象,对匀浆法、匀浆吸附法、匀浆后丙酮抽提法、丙酮粉法、丙酮抽提后吸附法这5种多酚氧化酶提取方法所得酶液进行了多酚类化合物残余、总酶活及酶的稳定性的比较。同时,还对几种氨基酸对酪氨酸酶的抑制情况进行了检测。[结果]试验得出,以改进的丙酮抽提后吸附法所得酶液多酚残余少,总活力保持良好,为几种方法中最佳的提取方法。谷胱甘肽、谷氨酰胺、半胱氨酸、谷氨酸对酪氨酸酶的活力均有抑制作用,其IC50值分别为(0.48±0.028)、(0.59±0.032)、(0.37±0.016)和(1.87±0.087)mmol/L。[结论]研究可为多酚氧化酶的相关研究提供参考。

白腐菌产漆酶培养条件的响应面法优化

[目的]采用Plackett-Burman试验设计法、响应面法,对灰盖鬼伞菌(Coprinopsis cinerea)产漆酶进行了发酵工艺条件的优化研究。[方法]首先利用Plackett Burman设计试验筛选出影响产酶的麦麸、稻草粉和酵母粉3个主要因素。在此基础上,用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,再利用Box-Behnken试验设计、响应面分析法进行回归分析。[结果]麦麸、稻草粉和酵母粉浓度与漆酶活力存在显著的相关性,得到最佳培养基条件。当麦麸10.188 g/L、稻草粉9.379 g/L、酵母粉3.613 g/L时,漆酶活力达到729.89 U/ml。[结论]经3批培养验证,预测值与验证试验平均值接近。

栗生灰黑孔菌合成漆酶最佳发酵条件的优化

研究了碳源、氮源、诱导剂、金属离子、pH值、温度、转速、装液量、接种量等培养条件对栗生灰黑孔菌产漆酶的影响。利用Minitab15软件、Plackett-Burman PB实验设计和响应面分析法对栗生灰黑孔菌产漆酶的发酵条件进行优化。结果表明:最佳液态发酵培养基组分为玉米秆粉9.976 g/L,黄豆粉9 g/L,ZnSO4.7H2O 0.3μmol/L,对苯二胺0.5 mmol/L;最佳培养条件为:温度28℃,转速180 r/min,pH值5.913,装液量60 mL/250 mL,接种量10%。在此条件下培养漆酶酶活可达431 U/mL。