蔬菜及水果中77种有机磷和氨基甲酸酯农药残留量检测技术研究

本方法采用丙酮水溶液(8+2)提取样品,提取液经二氯甲烷液-液分配、凝胶色谱柱(GPC)净化,固相萃取柱(活性炭)再净化,浓缩定容后,用气相色谱-质谱仪(GC-MS)测定,外标法定量。采用选择离子检测进行阳性确证。选择菠菜、柑橘等10种蔬菜水果为实验样品、敌敌畏等77种农药添加水平在0.05～2.00mg/kg时,该方法回收率为53.6%～124.8%;精密度为4.01%～24.90%;方法测定低限为0.01～0.200mg/kg。

利用PCR技术检测鸡肉产品中的空肠弯曲杆菌

根据空肠弯曲杆菌旋转酶基因(gyrA gene)的保守序列,设计1对引物,建立了快速检测鸡肉中空肠弯曲杆菌的PCR方法。采用该方法和生化试验对送检的100份鸡肉样品进行检测,结果表明:PCR方法能特异性地扩增出空肠弯曲杆菌192 bp核苷酸片段,其它结肠弯曲杆菌、肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、副溶血性弧菌、产气荚膜梭菌、绿脓假单胞菌等均不能获得阳性扩增结果。检测限度为8 cfu/mL。鸡肉肉水、增菌液和纯培养菌落的PCR鉴定结果,阳性率分别为16%、24%和20%,生化鉴定检出率为20%。

利用PCR技术检测致病性腊样芽孢杆菌的研究

目的:利用PCR技术对致病性蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)进行检测。方法:对致病性蜡样芽孢杆菌溶血素hblA基因序列进行分析设计一对特异引物,通过优化PCR反应条件,来实现对致病蜡样芽孢杆菌的快速检测,结果:该方法具有较强的灵敏性及特异性,能够对肠毒素型腊样芽孢杆菌进行有效的检测,其最低检出限可达9CFU/ml,用PCR技术对食物样品中致病性蜡样芽孢杆菌的检测取得与普通生化检测方法一致的结果。结论:利用PCR技术对食品中蜡样芽孢杆菌的检测较常规的生化检测方法具有省时省力的特点且灵敏性较高,具有较强的实际应用价值。

副结核病诊断技术研究进展

副结核病（Paratuberculosis）呈世界性流行，该病对畜牧业的危害严重，仅在美国造成经济损失就高达200亿美元，我国将其列入二类多种动物共患传染病。由于该病具有潜伏期长、部分患病动物临床症状不明显等特点，使该病的防控更为困难，因而针对该病建立快速有效地检测方法显得尤为重要。近年来，虽然人们对副结核分枝杆菌病的研究取得了很大进展，但由于该病潜伏期长以及对培养基需求苛刻，使得总体上在该领域的研究进展缓慢。本文就目前国内外有关副结核病诊断方法的研究进展情况进行综述，希望为进出境检验检疫相关部门提供快速、准确地诊断副结核病提供参考。

应用实时荧光PCR技术检测空肠弯曲菌

目的应用实时荧光PCR技术建立一种特异、敏感的空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)检测方法。方法通过对空肠弯曲菌基因组的保守序列进行分析来设计引物及Taqman探针来实现对空肠弯曲菌的检测。结果该方法具有较强的灵敏性及特异性能够对空肠弯曲菌进行有效的检测,其对空肠弯曲菌增菌液的最低检出限为5CFU/ml而对实际样品的检测限为10CFU/g。结论该方法无需增菌培养过程能够直接对样品进行检验,较常规的生化检测方法省时省力,具有较强的实际应用价值。

应用PCR技术检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的研究

本研究根据空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的16s rRNA基因相同保守序列来设计引物, 建立了一种PCR检测方法,该方法具有较强的特异性及灵敏性,其对空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的最低检测限度为5 CFU/mL,它无需增菌培养过程可以直接对样品进行检验,在对鸡肉样品空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的检测中取得了较好的效果。

聚氯乙烯塑料中增塑剂的气相色谱/质谱法分析

采用超声波提取技术 ,提取聚氯乙烯塑料中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二辛酯两种增塑剂 ,以气相色谱 /质谱单离子监视法定量测定 ,外标法定量。本方法简便、快速、准确 。

脯氨酸、硝酸银对农杆菌转化大豆的影响

农杆菌介导的遗传转化技术是植物遗传转化中广泛采用的一种技术。如何提高转化率是植物遗传转化中的一个关键问题。已发现有许多物质能够促进农杆菌介导的遗传转化 ,如乙酰丁香酮 (AS)等许多酚类化合物都有助于农杆菌T -DNA的转移从而提高转化率。本实验在农杆菌转化大豆的过程中辅加化合物脯氨酸、硝酸银 ,通过对GUS基因表达的分析 ,结果表明这两种化合物均能明显地提高大豆的转化率 ,其中 2mg L浓度的脯氨酸及 2mg L的AgNO3 具有最佳效果 。

应用PCR方法检测蜡样芽胞杆菌的研究

采用PCR技术,通过扩增蜡样芽胞杆菌的gyrB基因来实现对蜡样芽胞杆菌的快速检测。结果表明,以gyrB为目的基因设计引物建立的PCR检测方法能特异性地扩增出蜡样芽胞杆菌,且与其他芽胞杆菌菌株均无交叉反应,其检测敏感性可达9 cfu/mL,能够应用于蜡样芽胞杆菌的鉴定。

应用实时荧光PCR检测致病性蜡样芽孢杆菌

目的:利用SYBRGreenⅠ染料能与双链DNA结合发出荧光的特点,建立一种用来检测致病性蜡样芽孢杆菌(B.cereus)的实时PCR方法。方法:对致病性蜡样芽孢杆菌致病相关基因cereolysinAB基因序列进行分析,设计1对特异引物,通过对SYBRGreenⅠ实时PCR反应条件的优化,实现对致病性蜡样芽孢杆菌的检测。结果:该方法具有较强的灵敏性及特异性,能够对致病性蜡样芽孢杆菌进行有效检测,其最低检出限可达8CFU/mL。结论:利用该技术检测蜡样芽孢杆菌,较常规的生化检测方法具有省时省力的特点,且灵敏性较高,具有实际应用价值。

食品中转基因成分的检测

文章对当前几种比较常用的食品中转基因成分的检测方法进行了概述,比较了各种检测方法的优缺点;简述了基因芯片技术、近红外光谱分析技术等在转基因产品检测中的应用。

奶牛乳房炎的发病原因及防治

奶牛乳房炎是奶牛的四大疾病之一,严重影响了奶牛养殖业的发展。

扩孔率的测定及在检测中的应用

通过对扩孔试验原理的分析及扩孔率的测定,分析扩孔率在汽车专用薄板检测中与元素总量、薄板厚度、强度、伸长率和n值等的对应关系,从而阐明扩孔率可作为评价汽车专用薄板成形性的重要参数。

人源极光激酶A在毕赤酵母和MCF-7细胞中的表达及纯化

目的:构建人源极光激酶A(AURKA)真核表达载体,检测其在毕赤酵母X33和MCF-7细胞中的表达及纯化。方法:将双酶切PCR扩增的目的基因与真核表达载体连接,构建重组质粒。电转法转染重组质粒,筛选后采用SDS-PAGE和Western blotting法检测AURKA蛋白的表达,Ni-NTA柱法纯化表达的蛋白;放射自显影法检测AURKA的生物活性;细胞计数法检测转染重组质粒后MCF-7细胞增殖情况。结果:2种重组质粒经PCR均扩增出1 212bp目的基因,表明真核表达载体构建成功。重组AURKA蛋白相对分子质量约为50 000,且可磷酸化其底物组蛋白H3,表明重组AURKA具有活性。与转染空质粒和野生型MCF-7细胞比较,转染AURKA 24和48h后MCF-7活细胞数量明显增加。结论:AURKA在毕赤酵母和MCF-7细胞中成功表达和纯化,且其过表达可促进细胞增殖。

哺乳动物白色基因座(KIT基因)的研究现状

哺乳动物的毛色是由真黑色素及伪黑色素构成的,二者编码的蛋白在细胞内的相对含量决定了最终的毛色表型。黑色素的生物合成与经典的白色位点编码的KIT受体密切相关,KIT基因的突变会降低干细胞生长因子受体的活性。综述了KIT基因的作用机理、不同哺乳动物KIT基因的定位、突变分析、KIT基因对毛色的影响及在动物生产中的研究意义。

3,5-二硝基水杨酸降解菌的分离鉴定及生长条件初探

从污染的土样中分离到一株高效降解3,5-二硝基水杨酸的菌株E-2,它能够在以3,5-二硝基水杨酸为唯一碳源和能源的无机培养基上生长。根据菌株E-2的形态特征及生理生化反应特征,初步鉴定为盐芽孢杆菌属(Halobacillus Spring et al.)。研究表明:此菌能以3,5-二硝基水杨酸为唯一碳源进行生长,最适合浓度为0.05%,pH值为8.0,温度为30℃,培养5天后降解率为85%。

深拉延值的测定及其在薄板成形中的应用

通过对深拉延试验原理的分析及对深拉延值的测定,分析了深拉延值在汽车专用薄板检测中与rm值和薄板厚度开裂率之间的关系。从而阐明深拉延值可作为评价汽车专用薄板成形性的重要参数。

透明质酸钠在白酒中的稳定性探讨

通过对白酒中透明质酸钠含量的稳定性试验,为白酒中添加透明质酸钠的生产应用提供科学依据.根据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）的稳定性试验规范要求,将试验酒样置于37～40℃和相对湿度75％的条件下,以透明质酸钠的含量为指标,对定量添加透明质酸钠的试验酒样进行连续跟踪检测,监测酒样中透明质酸钠的稳定程度.结果表明,试验酒样中透明质酸钠的终点值和初始值相比,其平均衰减值为7.73％≤10％,满足《保健食品检验与评价技术规范》的要求.

VBNC状态肠道菌的检测方法建立及优化

在VBNC状态肠道菌实际检测的过程中,为了全面提升检测方法应用的科学性与合理性,应筛选最佳的检测方式,对其进行合理的建立与优化处理,编制完善的检测计划方案,全面提升VBNC状态肠道菌检测工作效果,为其后续工作夯实基础。

防风枯斑病的病原学及药剂敏感性

试验研究了防风枯斑病的病原学和病菌生物学特性及其药剂敏感性。通过病菌的分离及柯氏证病,获得3株病原菌;结合病原形态特征、培养学特性及r DNA-ITS、TUB2和TEF序列分析,确定引起防风枯斑病的病菌为Diaporthe angelicae。病菌生物学研究表明:菌丝生长及孢子产生的最适温度为25℃,最适p H为8;病菌在以麦芽糖和蔗糖为主要碳源的培养基上生长和产孢最佳;在以天门冬酰胺为主要氮源的培养基上生长最佳。病菌分生孢子在25℃时萌发率最高,孢子的致死温度为35℃;分生孢子在p H 8时萌发率最高;全光照有利于分生孢子萌发。病菌对23种杀菌剂的敏感性测定结果表明:病菌对30%氟菌唑WP、3%己唑醇·27%稻瘟灵EC、40%氟硅唑EC、55%硅唑·多菌灵WP、25%丙环唑EC、30%苯醚甲环唑SC、30%醚菌酯WP、250 mg/L吡唑醚菌酯EC、10%苯醚甲环唑WG、77%硫酸铜钙WP的敏感程度较高,其EC50<0.1 mg/L。