褪黑素调控卵泡发育的研究进展

褪黑素是松果体合成的一种内分泌激素,在生殖领域发挥重要作用。卵泡的生长发育是女性或雌性哺乳动物生育的基础,卵泡中含有高浓度的褪黑素,在卵巢颗粒细胞、卵泡细胞和卵母细胞上都存在褪黑素受体,褪黑素调控着这些细胞的生长和发育、成熟和闭锁,影响着女性或雌性的生育能力。本文综述了褪黑素对卵巢卵泡、颗粒细胞和卵母细胞发育的保护作用和调节机制,以及对卵巢损伤的治疗潜能,为进一步推进其临床奠定基础。

时差成像在高质量胚胎选择中的临床应用

多胎妊娠是实施辅助生殖技术过程中最常见的并发症,如何降低和避免其发生一直是生殖领域研究的热点。实施单胚胎移植是避免多胎妊娠的有效措施,因而选择移植最具发育潜能的胚胎至关重要。时差成像技术可对体外胚胎发育全过程进行动态监测,获得胚胎发育潜能动力学参数的完整信息,对移植前胚胎质量进行更加全面准确的评估。本文通过对近年发表的时差成像技术在胚胎评估临床应用的相关文献进行综述,旨在为选择高发育潜能的优质单胚胎移植提供参考。

小RNA调控卵泡发育的研究进展

人们已在卵泡发育的不同阶段和不同细胞中均检测到小RNA(miRNAs)的存在,并在成熟卵泡的卵泡液中也发现外泌体miRNAs。miRNAs不仅参与调控正常的卵泡发育过程,其异常调控也可导致一些卵巢疾病的发生。为进一步系统阐明miRNAs对卵泡发育的调控机制,寻找可以预测卵母细胞发育质量的外泌体miRNAs,本文从颗粒细胞发育、卵母细胞发育和激素合成等方面总结了miRNAs对卵泡发育的调控作用。

日龄及遗传因素对小鼠卵母细胞体外受精效果的影响

目的为充分利用有限的优质动物资源,缩短世代间隔,提高胚胎工程技术在生物领域中的应用效率。方法利用未性成熟小鼠模型和性成熟小鼠模型,分别进行PMSG/hCG超数排卵处理与体外受精;统计排卵率、受精率和囊胚发育率;观察小鼠卵巢的组织形态学变化,了解日龄对小鼠卵母细胞体外受精效果的影响,同时分析遗传因素在小鼠卵母细胞体外受精中的作用。结果未性成熟小鼠超数排卵的可用卵母细胞数量显著多于性成熟小鼠,且其卵巢上有腔卵泡的数量也明显多于性成熟小鼠;未性成熟小鼠卵母细胞的体外受精率显著低于性成熟小鼠,但囊胚发育率差异不显著。通过对性成熟小鼠的可用卵母细胞数进一步分析发现,高排卵组(平均可用卵母细胞数≥40枚)小鼠卵母细胞的体外受精率和囊胚发育率都显著高于低排卵组(平均可用卵母细胞数<40枚);且同窝小鼠的卵巢卵泡发育情况与排卵数基本一致。结论未性成熟小鼠卵巢对超数排卵反应的敏感性强,性成熟小鼠卵巢的超数排卵敏感性与遗传因素有关,且排卵性状的高低与卵母细胞的质量密切相关。

小鼠窦前卵泡二维体外培养法的优化研究

目的优化小鼠窦前卵泡二维体外培养体系,探讨卵泡刺激素(FSH)对小鼠窦前卵泡体外发育的影响。方法将分离自14 d雌鼠的初级卵泡(80~100μm)和早期次级卵泡(110~130μm)分别培养在浓度为10、100 mU/ml r-FSH的培养液中,观察并记录卵泡体外生长情况和卵母细胞的成熟情况;检测并分析第10天窦卵泡的空间生长情况及不同培养液中卵泡的雌二醇(E2)分泌水平;Western blotting检测卵泡中FSH受体(FSHR)、类固醇激素合成限速酶3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、17α-羟化酶(CYP17)及芳香化酶(CYP19)的表达水平。结果初级卵泡在10、100 mU/ml r-FSH培养液中的成腔率(0.00%±0.00%,36.14%±4.02%)及卵母细胞成熟率(0.00%±0.00%,23.54%±7.62%)明显低于早期次级卵泡成腔率(78.63%±4.13%,92.74%±2.54%)及卵母细胞成熟率(48.55%±3.73%,80.88%±4.02%),差异有统计学意义(P<0.05);在100 mU/ml r-FSH培养液中的早期次级卵泡成腔率(92.74%±2.54%)、卵母细胞成熟率(80.88%±4.02%)明显高于在10 mU/ml r-FSH培养液中的卵泡成腔率(78.63%±4.13%)及成熟率(48.55%±3.73%),差异有统计学意义(P<0.05);早期次级卵泡在10 mU/ml r-FSH的培养液中呈平铺式生长模式,而在100 mU/ml r-FSH培养液中呈立体空间生长模式,后者更接近于体内卵泡的生长模式;早期次级卵泡中FSHR的相对表达水平明显高于初级卵泡(1.86±0.32 vs.1.19±0.28,t=4.94,P<0.05)。100 mU/ml r-FSH培养液中早期次级卵泡组卵泡3b-HSD、CYP17及CYP19的表达以及E2的分泌水平明显高于用10 mU/ml r-FSH培养液培养时。结论FSH不仅会影响窦前卵泡的体外发育率,还会改变窦前卵泡的体外发育模式。选择早期次级卵泡培养在含100 mU/ml r-FSH的二维培养液中培养可获得理想的卵泡发育率及发育模式。

TLI筛选猪胚胎初次卵裂时间以预测早期胚胎发育

目的研究猪孤雌激活胚胎初次卵裂时间对早期胚胎发育潜能的影响,以筛选最优胚胎。方法将猪卵母细胞进行体外成熟培养,孤雌激活后,胚胎采用时差成像系统(TLI)筛选,分为早期卵裂组(<24 h)、中期卵裂组(24~30 h)和晚期卵裂组(30~48 h)。各组分开培养至囊胚期,统计比较各组的桑椹胚率和囊胚率,并对囊胚中凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53和细胞周期蛋白Cyclin B1、Cdk1、Cdk2的表达水平进行检测。结果早期卵裂组桑葚胚率、囊胚率高于中期卵裂组(P<0.05)和晚期卵裂组(P<0.01);凋亡相关基因Bax、P53表达在早期卵裂组中显著低于中期和晚期卵裂组(P<0.01),而抗凋亡基因Bcl-2表达则显著高于中期和晚期卵裂组(P<0.01);早期卵裂组细胞周期蛋白Cyclin B1、Cdk1和Cdk2的表达显著高于中期和晚期卵裂组(P<0.05)。结论猪孤雌激活胚胎初次卵裂时间较早的胚胎具有较高的发育潜能,利用TLI确定的初次卵裂时间可作为筛选优质胚胎的重要参数。

胚蛋注射乳酸菌对蛋雏鸡早期生长发育及免疫功能影响的研究

试验旨在探讨胚蛋注射乳酸菌对蛋雏鸡孵化性能、免疫器官指数、十二指肠中SIgA以及血清中白细胞介素2(IL-2)和干扰素γ(IFN-γ)含量的影响。将300个海兰褐蛋鸡种蛋随机分成4组,每组5个重复,每个重复15个种蛋。18日胚龄时,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别向羊膜腔内无菌注入0.2 mL含活菌数2×10^6、2×10^7和2×10^8cfu的乳酸菌稀释液,饲养期21 d。结果显示:①胚蛋注射乳酸菌对种蛋孵化性能无显著影响(P>0.05),但显著增加了蛋雏鸡体重(P<0.05);②试验组蛋雏鸡14日龄法氏囊指数和21日龄胸腺指数显著提高(P<0.05);③7日龄试验Ⅱ、Ⅲ组的十二指肠中SIgA抗体水平显著高于对照组(P<0.05);④与对照组比,试验Ⅱ组显著增加7日龄雏鸡血清IL-2与IFN-γ的含量以及14日龄血清IL-2的含量(P<0.05)。结果表明,胚蛋注射乳酸菌对海兰褐蛋鸡早期生长发育及免疫功能具有一定促进作用。

母体免疫系统及血液系统基因多态性与复发性自发流产相关性的研究进展

复发性自发流产(RSA)是影响女性生殖健康的重要疾病,其发生率约为1%。RSA的病因复杂,其中遗传因素是常见的原因之一。近年大量研究表明RSA与相关基因的多态性密切相关。正常的胎儿发育需要胚胎的成功植入及妊娠的维持,母体的免疫系统及血液系统在其中起重要的调控作用。该文综述了母体免疫系统及血液系统相关基因多态性与RSA的相关性,旨在从基因水平阐述RSA的发病机制,为临床预防及治疗RSA提供准确可行的指导。

刺五加多糖对免疫抑制雏鸡血液免疫相关细胞因子mRNA转录水平影响的研究

为研究刺五加多糖(ASPS)对环磷酰胺(CTX)所致免疫抑制雏鸡的免疫调节机制,本研究将300只4日龄海兰褐公雏,随机分为3组,每组100只:第1组为空白对照组,第2组为环磷酰胺(CTX)致免疫抑制组,第3组为ASPS+CTX组。第2组和第3组按照80 mg/kg/d的剂量皮下注射CTX,连续注射3 d;从注射后第4 d(10日龄)开始,第3组每天每只鸡皮下注射0.2 mL 200 mg/mL ASPS,连续注射3 d;第1组和第2组以同样方式注射等量灭菌生理盐水。注射后的第7 d(19日龄)、14 d(25日龄)、21 d(31日龄)和28 d(37日龄)分别采血分离淋巴细胞,经荧光定量PCR检测各组雏鸡血液中各细胞因子mRNA的转录水平。结果显示,CTX能够造成雏鸡血液中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-1β、IL-6、iNOS和TNF-α等8种细胞因子mRNA的转录水平均显著下降(p<0.05),显著抑制了雏鸡的免疫功能。ASPS+CTX组鸡在注射ASPS后各时间段Th1类细胞因子IFN-γ和IL-2 mRNA转录水平较CTX组均显著提高(p<0.05),而Th2类细胞因子IL-4和IL-10 mRNA转录水平则是在注射后第21 d和28 d较CTX组显著提高(p<0.05),表明ASPS对CTX所致Th1类和Th2类细胞因子mRNA转录水平下降的修复在早期以升高Th1类细胞因子为主。ASPS+CTX组各日龄鸡炎性细胞因子IL-1β、IL-6、iNOS和TNF-αmRNA转录水平虽然显著高于CTX组(p<0.05),但除了IL-6随鸡日龄的增长变化幅度较大外,其他3种炎性细胞因子则随鸡日龄的增长上升幅度不大,表明ASPS对CTX所致的炎性细胞因子mRNA转录水平下降具有明显的修复作用,但是修复效果与鸡的日龄相关性不大。综上,ASPS能够不同程度地促进CTX致免疫抑制雏鸡血液中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-1β、IL-6、iNOS和TNF-α等8种细胞因子mRNA的转录,从而使机体恢复正常的免疫状态。本研究从分子水平证明了ASPS的免疫增强作用,为进一步揭示其免疫机制奠定了基础。

刺五加多糖对雏鸡免疫器官组织结构发育的影响

试验通过研究刺五加多糖(ASPS)对雏鸡免疫器官指数及组织结构发育的影响,旨在从器官和组织水平对ASPS的免疫增强作用进行评价。1日龄海兰褐公雏饲养至7日龄时选取150只,随机分为3组,每组50只:ASPS低剂量组(ASPSL组)、高剂量组(ASPSH组)和空白对照组,三组分别每天皮下注射0.2 mL的100 mg/mL和200 mg/mL ASPS以及灭菌生理盐水,连续注射3 d。注射后的第7、14、21和28天称量体重及胸腺、法氏囊、脾脏重量,计算免疫器官指数,并通过HE染色对免疫器官的组织结构变化进行观察。结果显示,胸腺、法氏囊和脾脏指数以及体重的变化趋势基本一致,除注射后7 d外,注射后14、21和28 d ASPSL组和ASPSH组胸腺、法氏囊和脾脏指数以及体重均显著高于空白对照组(P<0.05),注射后21和28 d时ASPSH组的3种免疫器官指数均显著高于ASPSL组(P<0.05);组织结构方面,与对照组比较,各个日龄ASPSL和ASPSH组的胸腺皮质部分明显增厚,髓质部分面积变小;法氏囊单个淋巴滤泡逐渐增大并变长,排列更加规则,而且皮质比例明显增加;脾脏中脾小体数目明显增多,动脉周围淋巴鞘面积明显增加。结果表明,ASPS能够提高胸腺、法氏囊和脾脏器官指数以及体重,并促进胸腺皮质、法氏囊淋巴滤泡和脾脏动脉周围淋巴鞘等特征性结构的发育,从而为免疫功能的增强提供了组织结构基础。

MAM在哺乳动物细胞中的研究进展

线粒体相关内质网膜(MAM)在调节稳态内质网转运到线粒体的钙信号传导、脂质代谢、自噬体的形成、线粒体的形态动力学功能、相关蛋白的调控功能以及细胞凋亡调节过程中都发挥着关键的作用,并对癌症和神经退行性等疾病起着调节作用。因此,对MAM生化特性和功能的了解至关重要。本文综述了近年来MAM在哺乳动物细胞中的研究进展,以期为今后MAM的相关研究提供参考。

精子发生过程中组蛋白修饰的研究进展

组蛋白的翻译后修饰在整个精子发生过程中起着至关重要的调控作用,其修饰异常将对精液中的精子数量和精子质量产生重要影响,引起男性不育。本文综述了组蛋白的主要修饰方式,包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化和巴豆酰化等对精子发生的调控作用,为阐明其调控机制、预防和治疗男性不育奠定基础。

双酚A对卵泡发育影响的研究进展

双酚A是人们普遍接触的一类环境类雌激素。研究发现不同浓度的双酚A会影响不同阶段的卵泡发育,且影响卵泡对类固醇激素的合成和分泌。为进一步阐明双酚A对卵巢卵泡发育的干扰机制,本文从颗粒细胞增殖、激素合成、卵母细胞减数分裂和卵泡凋亡等方面展开了综述,探讨了双酚A的影响作用,为人类预防双酚A对生殖系统的损伤提供借鉴。