组织学与胚胎学实验教学中学生观察能力培养的探讨

组织学与胚胎学实验教学是理论教学的重要补充,显微镜观察是实验教学的重要手段,加强对学生观察能力的培养在组织学与胚胎学实验教学过程中起着举足轻重的作用。在教学实践中,教师要从多方面、多角度培养学生的观察能力,提高教学效果。

基于OBE模式的组织学与胚胎学课程教学设计与实践

OBE是outcomes-based education的缩写,是一种基于学习产出的教育模式。这种教育模式要求教育者对学生毕业时应达到的能力水平有明确的预期,并根据这个预期设计相应的教育结构以帮助学生顺利达到预期能力水平。随着信息技术的飞速发展,很多领域中“互联网+”的新发展模式已成了学者们关注和研究的热点。教育理念和教学手段的更新也随之大量出现在高校的教学中,为高校发展带来了新机遇。

2010-2018年组织学与胚胎学教学研究论文发表情况分析

对2010-2018年组织学与胚胎学教学研究论文进行抽样,从研究方法、研究内容和研究质量三个方面进行文献分析,发现经验总结法仍然是当然主流的研究方法,其他定量研究方法的应用也在逐步增加。当前研究内容的热点集中在教学资源建设与现代教育技术应用领域,总体上教学研究质量仍然不高,今后应进一步把握研究方向,提高研究的科学性和创新性。

提高组织学实验教学效果的探索与实践

组织学是研究机体微细结构及其相关功能的科学,是一门理论与实践结合密切的形态学科[1].由于组织学知识点多,内容抽象复杂,所以学生对于这门课程的学习普遍产生畏难心理,学习积极性不高.实验教学在组织学教学中是不可或缺的,实验教学质量直接影响到学生对理论知识的理解和掌握,也关系到学生的实际操作能力、观察能力、分析解决问题能力的培养以及后期课程的学习.为了提高组织学实验教学质量,笔者在2013级临床医学专业本科生组织学实验教学中尝试进行实验教学改革,取得了良好的教学效果.

深化胚胎学教学改革,全面提高教学质量

近年来该教研室对胚胎学教学进行了改革，收到了良好的教学效果。包括改变教学模式，实行理论实验一体化教学模式；激发学习兴趣，变被动学习为主动学习；充分利用多种教学资源，加深学生对胚胎学的理解和掌握；充实和完善胚胎标本，加强学生观察能力的培养；开展“以问题为基础的学习”，加强学生分析问题和解决问题能力的培养。

蒺藜提取物对小鼠损伤睾丸组织结构的影响

目的：观察蒺藜提取物对小鼠损伤睾丸光镜结构和超微结构的影响,探讨蒺藜对小鼠损伤睾丸的保护修复作用.方法： 健康雄性小鼠随机分为对照组、模型组和给药组,再分热处理后6d和14d两个时间组;建立睾丸热损伤模型,给予治疗剂量的蒺藜提取物;光镜标本和透射电镜标本制备,镜下观察.结果： 模型组与对照组相比,生精小管细胞减少,排列紊乱,可见损伤坏死细胞;给药组与模型组相比,生精小管细胞明显增多,排列较整齐,细胞结构基本正常.结论： 蒺藜对小鼠损伤睾丸具有保护修复作用.

卵巢组织体外培养技术及其在生殖毒性检测中的应用

生殖系统功能障碍是严重影响人体健康的社会公共卫生问题。研究表明许多外源性化学物质均可作用于雌性生殖系统，造成生殖系统损伤、生殖功能下降、自然流产率增加及后代发育异常等危害，如环境污染、环境毒素、不良生活习惯等。因此，建立快速检测、鉴定生殖毒物及其作用机制的方法对防治化学物质造成的生殖系统损害具有非常重要的意义。卵巢组织体外培养技术是近年来广泛应用的雌性生殖毒性评价方法，该方法能对不同阶段卵巢、卵泡的发育状态、激素合成和分泌等功能进行动态观察分析，用以研究在卵巢生长发育的不同阶段中生殖毒物作用的确切机制及作用靶点。

卵巢组织移植技术的研究进展

各种针对肿瘤的化疗和放疗严重危害了女性的生育能力，导致卵巢功能的提早衰竭。在乳腺癌化疗的女性中，约68％的患者在治疗后会面临卵巢功能提早衰竭的危险。在放疗的过程中，

成年鼠和幼鼠卵巢组织冻融后的形态学变化

选择合适发育阶段卵巢组织进行冷冻，以提高冷冻保存效果。方法：分别对10日龄幼鼠和6周龄成年鼠的卵巢组织进行玻璃化冷冻保存，比较卵巢组织中各级卵泡在冻融前后形态学的改变和存活率的变化。结果：幼鼠卵巢组织冻融后各级形态正常卵泡和活卵泡所占的比例与新鲜卵巢组织没有差异，而成年鼠卵巢组织冻融后各级形态正常卵泡和活卵泡所占的比例低于新鲜卵巢组织。卵巢组织冻融后肾被膜下移植实验显示，幼鼠卵巢组织建立血供的成功率高于成年鼠的卵巢组织。结论：幼鼠卵巢组织的玻璃化冷冻效果好于成年鼠，建议在青春期前进行卵巢组织的冷冻保存。

新温肾生精饮对环孢霉素致小鼠附睾组织氧化应激和精子损伤的影响

目的研究新温肾生精饮(主要由鹿茸、人参、锁阳、黄芪和淫羊藿等15味药材组成)对环孢霉素A致小鼠附睾组织氧化应激和精子损伤的保护作用及其机制。方法将8周龄的昆明种雄性小鼠随机分为对照组、溶剂组、模型组、西药组和中药组,每组15只。对照组腹腔注射0.9%Na Cl溶液,模型组、西药组和中药组连续30天腹腔注射15μg·g-1·d-1环孢霉素A,同时将对照组和模型组小鼠灌胃0.9%Na Cl溶液,西药组和中药组小鼠分别灌胃克罗米芬或新温肾生精饮30天。称量小鼠体质量和附睾重;检测附睾组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPH-Px)的水平;流式细胞仪检测小鼠附睾精子中ROS水平、精子的凋亡和死亡情况。结果与对照组比较,溶剂组各指标差异无统计学意义(P>0.05);模型组体质量增重和附睾指数显著降低,GSH水平和GSH-Px活性显著降低,MDA水平显著升高,附睾成熟精子中ROS水平显著升高,同时附睾成熟精子的存活率显著降低、死亡率显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,中药组显著增加了小鼠体质量增重及附睾指数,提高了附睾组织中GSH水平和GPH-Px活性,显著降低了附睾组织中MDA的含量和附睾成熟精子中ROS水平,提高了精子的存活率,降低了精子的死亡率,差异均有统计学意义(P<0.05)。与西药组比较,中药组小鼠体质量增重增加,附睾组织中MDA的含量下降,附睾成熟精子中ROS水平下降,提高了精子的存活率,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论新温肾生精饮能显著修复环孢霉素A致小鼠附睾组织的氧化应激损伤,提高附睾成熟精子的存活率。

3-甲基腺嘌呤对顺铂诱导HeLa细胞凋亡的影响

目的采用自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬,观察其对顺铂(DDP)诱导HeLa细胞凋亡的影响,探讨自噬在DDP诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察3-MA对DDP抑制HeLa细胞生长情况的影响;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;间接免疫荧光法检测自噬标志蛋白LC3和p62的变化;Hoechst荧光染色检测细胞凋亡。结果 MTT法显示,3-MA与DDP联合应用导致HeLa细胞生长抑制率增加;光镜结果显示,3-MA与DDP联合应用加剧了HeLa细胞收缩变圆,促进死亡;间接免疫荧光法检测到3-MA与DDP联合应用减弱了DDP诱导的HeLa细胞LC3聚集及其与p62的共定位;Hoechst荧光染色检测到3-MA与DDP联合应用增加HeLa细胞凋亡率。结论 3-MA抑制自噬能够促进DDP诱导HeLa细胞发生凋亡。

肉苁蓉对生殖系统影响的研究进展

综述肉苁蓉对生殖系统影响的研究进展。研究证明肉苁蓉可促进性激素分泌或表现性激素样作用,对生精功能、精液质量等有很好的保护作用,能有效改善肾功能,对胚胎发育也有一定的促进作用,表现出明显的促进生殖作用。

日龄及遗传因素对小鼠卵母细胞体外受精效果的影响

目的为充分利用有限的优质动物资源,缩短世代间隔,提高胚胎工程技术在生物领域中的应用效率。方法利用未性成熟小鼠模型和性成熟小鼠模型,分别进行PMSG/hCG超数排卵处理与体外受精;统计排卵率、受精率和囊胚发育率;观察小鼠卵巢的组织形态学变化,了解日龄对小鼠卵母细胞体外受精效果的影响,同时分析遗传因素在小鼠卵母细胞体外受精中的作用。结果未性成熟小鼠超数排卵的可用卵母细胞数量显著多于性成熟小鼠,且其卵巢上有腔卵泡的数量也明显多于性成熟小鼠;未性成熟小鼠卵母细胞的体外受精率显著低于性成熟小鼠,但囊胚发育率差异不显著。通过对性成熟小鼠的可用卵母细胞数进一步分析发现,高排卵组(平均可用卵母细胞数≥40枚)小鼠卵母细胞的体外受精率和囊胚发育率都显著高于低排卵组(平均可用卵母细胞数<40枚);且同窝小鼠的卵巢卵泡发育情况与排卵数基本一致。结论未性成熟小鼠卵巢对超数排卵反应的敏感性强,性成熟小鼠卵巢的超数排卵敏感性与遗传因素有关,且排卵性状的高低与卵母细胞的质量密切相关。

精子发生过程中的组蛋白变化与雄性不育

男性不育的许多病理现象与生精细胞的表观遗传改变关系密切。表观遗传在精子发生过程中调控着生精细胞的有丝分裂、减数分裂和精子形成过程,其中,作为表观遗传的一个重要研究内容——组蛋白,在精子发生过程中会发生多位点和多种形式的氨基酸残基修饰,不同的修饰方式在精子发生的不同阶段精确地调控着生殖细胞的发育过程,且在精子形成阶段发生鱼精蛋白和组蛋白的替换。此外,在精子发生过程中,组蛋白修饰的异常改变还可能会损伤精子的发育过程,导致雄性不育。本文总结了精子发生过程中组蛋白修饰的变化、对生殖细胞发育的调控作用,以及组蛋白的异常改变与雄性不育的关系。

羊睾丸提取液对铅损伤小鼠精子顶体形成的影响

目的观察羊睾丸提取液对铅损伤小鼠精子顶体形成的影响。方法成年健康清洁级ICR雄性小鼠30只,随机分为对照组、模型组和给药组,每组10只。模型组采用醋酸铅(30mg/kg)灌胃建立睾丸损伤模型,给药组在醋酸铅灌胃的同时腹腔注射羊睾丸提取液0.5ml,对照组采用等体积蒸馏水灌胃及腹腔注射,每天1次,共21d。经心脏行甲醛灌流固定,制备睾丸标本,PAS染色,光镜下观察圆形精子细胞期顶体的形态学变化。结果与对照组相比,模型组精子顶体形成障碍,顶体囊泡不完整,膜皱缩,较粗糙,结构模糊;给药组精子顶体形成接近对照组,顶体囊泡形状较规则,膜平滑。结论羊睾丸提取液可保护小鼠精子顶体在形成过程中免受铅的损害,从而维持其正常的结构及功能。

鹿茸多肽对微波辐射致小鼠卵巢次级卵泡发育损伤的保护作用

目的研究鹿茸多肽(VAP)对微波辐射所致小鼠卵巢次级卵泡发育损伤的保护作用及其机制。方法将75只8周龄昆明种雌性小鼠,随机分为对照组、微波辐射组(MR组)、MR+低VAP组、MR+中VAP组、MR+高VAP组,每组15只。除对照组外,其余小鼠进行5 m W/cm2强度的微波辐射30天;然后MR+低VAP组、MR+中VAP组、MR+高VAP组腹腔注射VAP 30天,剂量分别为1.5 mg·kg-1·d-1、3 mg·kg-1·d-1和6 mg·kg-1·d-1。观察小鼠卵巢组织中次级卵泡的发育情况,TUNEL法检测小鼠次级卵泡中颗粒细胞的凋亡,免疫组织化学法检测小鼠次级卵泡颗粒细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2和活化型促凋亡蛋白caspase-3的表达,ELISA法检测小鼠血清中雌激素水平。结果与MR组比较,高浓度VAP显著提高了小鼠卵巢组织中次级卵泡的发育,改善其组织结构状态,显著减少次级卵泡颗粒细胞的凋亡和活化型促凋亡蛋白caspase-3的表达,升高次级卵泡颗粒细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达和小鼠血清中的雌激素水平。结论 VAP可显著修复微波辐射引起的小鼠卵巢次级卵泡发育损伤,其修复机制可能与减少次级卵泡中颗粒细胞凋亡,促进卵泡雌激素合成和分泌有关。

羊睾丸提取液对铅染毒小鼠睾丸生精细胞凋亡及超微结构的影响

目的:探讨羊睾丸提取液对铅染毒小鼠睾丸生精细胞凋亡及超微结构的影响。方法:雄性性成熟小鼠,随机分为对照组(蒸馏水灌胃),模型组(醋酸铅灌胃),给药组(醋酸铅灌胃+腹腔注射羊睾丸提取液),染毒2周。Tunel法观察睾丸生精细胞的凋亡,透射电镜观察生精细胞超微结构的变化。结果:与对照组相比,模型组睾丸生精细胞凋亡指数明显增高,多数细胞胞质内出现空泡,核固缩,核膜结构模糊,线粒体数目减少、空泡化,溶酶体增多;与模型组相比,给药组睾丸生精细胞凋亡指数有所降低,细胞结构趋于正常,核膜结构清晰,线粒体数量增多。结论:羊睾丸提取液可抑制铅染毒小鼠睾丸生精细胞的凋亡,对精原细胞、精母细胞、精子细胞的超微结构具有显著的保护作用。

温肾生精饮对生精细胞凋亡和组蛋白H3K9二甲基化的影响

目的研究温肾生精饮对环磷酰胺致小鼠睾丸生精细胞凋亡和组蛋白H3K9二甲基化(H3K9me2)的影响。方法将8周龄的60只昆明种雄性小鼠随机分为对照组、模型组、西药组和中药组,每组15只。对照组腹腔注射0.9%Na Cl溶液,模型组、西药组和中药组连续5天腹腔注射环磷酰胺(80μg·g-1·d-1的)然后将对照组和模型组小鼠灌胃0.9%Na Cl溶液,西药组、中药组小鼠分别灌胃克罗米芬、温肾生精饮。各组均干预30天,检测小鼠的体质量、睾丸重和附性腺重;观察睾丸生精上皮的发育且进行Johnsen评分;TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡;免疫荧光法检测睾丸生精小管中H3K9me2蛋白的表达。结果与模型组和西药组比较,中药组显著提高了生精障碍小鼠的体质量、附性腺指数和小鼠睾丸组织的Johnsen评分(P<0.05),促进了生精上皮的发育,显著减少了小鼠睾丸组织中凋亡的生精小管数和生精小管内凋亡的阳性细胞数(P<0.05),上调了精子细胞中H3K9me2的表达水平。结论温肾生精饮能显著修复环磷酰胺致小鼠睾丸生精功能损伤,其修复机制可能与减少睾丸生精细胞凋亡,稳定精子细胞中H3K9me2的表达水平有关。

小鼠精子顶体发生的形态学研究

目的探讨小鼠精子形成过程中顶体发生的形态学变化特点,为深入研究顶体对男性生殖功能的影响提供理论基础。方法应用PAS染色法,在光学显微镜下区分小鼠睾丸生精上皮周期中不同时相的生精上皮,观察精子细胞顶体在不同时相的形态学变化特点。结果精子细胞顶体含有多糖类物质,经PAS染色后呈紫红色。小鼠精子发生的最后1个半周期为精子形成过程,也是顶体的发生过程。在圆形精子细胞期,顶体变化由圆形、椭圆形至左右对称的帽形,角度逐渐增大;在变形精子细胞早期,顶体由左右对称的帽形演变成位于头背部的镰形;在变形精子细胞晚期,顶体位于头背部。结论上述对小鼠精子顶体发生过程中形态学变化特点的观察为进一步研究顶体发生机制及临床评价男性生育力奠定了基础。

大鼠肝癌发展过程MAPK信号转导通路蛋白的动态变化

目的研究p38、JNK、ERK表达与肝癌发生的关系。方法雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和模型组,空白对照组自由饮用食用水;模型组采用间断性自由饮用二乙基亚硝胺(DEN)食用水的方法诱发肝癌模型,第0、5、9、12、14、16、18、20周取出肝脏,观察其病理学改变;检测p38、JNK及ERK1/2 mRNA和蛋白表达情况。结果模型组大鼠肝变硬,出现巨块状结节,癌细胞强嗜碱性,内质网扩张,线粒体肿胀,嵴断裂,核染色质边缘化;与空白对照组比较,模型组p38 mRNA表达水平9、12 w增加(P<0.05),JNK mRNA表达水平从5 w增加至16 w,随后表达水平显著降低(P<0.05),ERK mRNA表达水平18 w显著降低(P<0.05);模型组p-p38蛋白14、16、20 w表达均明显降低(P<0.05),p-JNK蛋白5 w、12~20 w表达明显升高(P<0.05),p-ERK1/2蛋白5 w表达明显增加,18 w表达显著降低(P<0.05)。结论 DEN诱发大鼠肝癌发生中,MAPK信号中p38、ERK1/2激酶磷酸化水平降低而JNK激酶磷酸化水平增高,可能与内质网和线粒体关系密切。