人抗狂犬病毒抗体在毕赤酵母中的分泌表达

目的经分步整合法在巴氏毕赤酵母中表达人抗狂犬病毒全分子抗体。方法分别构建人重链和轻链抗体表达质粒,以分步整合法电转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选及Western blot分析。结果SDS-PAGE、Western blot检测均在分子量约55kD及25kD处出现特异性条带,ELISA检测显示所获全分子抗体具有良好的狂犬病毒抗原结合活性,表达量约8～10mg/L。结论在毕赤酵母菌中可经甲醇诱导产生具狂犬病毒抗原结合活性的分泌型人全分子抗体。

脑梗死后血管性认知障碍影响因素的探讨

目的探讨脑梗死(CI)后血管性认知障碍(VCI)的影响因素。方法对50例经头部CT确诊的CI患者及相匹配的正常对照组进行比较分析,并采用简易精神状态检查法(MMSE)、Barthel指数记分法(BI)和Hachinski缺血积分表(HIS)进行神经心理测验。结果CI组患者认知障碍发生率明显高于正常对照组,且多为轻度认知障碍,CI组MMSE总分与对照组比较差异有高度显著性,CI组MMSE总分明显低于对照组,CI组Barthel指数记分明显低于对照组;CI组中MMSE评分≥60岁组与<60岁组比较,有卒中史组与无卒中史组比较,高血压组与血压正常组比较,糖尿病组与血糖正常组比较,多发病灶组与单发病灶组比较,前者评分均低于后者,差异均有显著性。CI组中Barthel指数记分≥60岁组与<60岁组比较,有卒中史组与无卒中史组比较,高血压组与血压正常组比较,糖尿病组与血糖正常组比较,差异均无显著性。结论CI患者VCI发生率明显高于正常人群,且多为轻度认知障碍;CI患者日常生活活动能力(ADL)明显降低;CI患者VCI发生与年龄、卒中史、高血压及糖尿病有关;CI患者ADL降低与年龄、卒中史、高血压及糖尿病无明显相关性。

症状性大脑中动脉M_1段狭窄支架置入10例临床分析

目的总结血管内支架成形术治疗症状性大脑中动脉(MCA)狭窄的疗效和经验。方法对10例药物治疗无效的、反复短暂性脑缺血发作(TIA)或有明显脑缺血症状的MCA狭窄患者行血管内支架成形术。术后行血管造影及经颅多普勒超声检查(TCD)进行影像学随访。结果狭窄的血管均成功地进行扩张,术前术后狭窄程度分别为(79.2±4.5)%与(15.3±4.3)%,术后残余狭窄程度均小于20%。临床随访无TIA或脑卒中再发,DSA随访无血管再狭窄发生,TCD检查显示脑血流明显改善。结论血管内支架成形术治疗MCA狭窄安全、有效。

脑卒中住院患者健康需求调查及分析

目的:了解脑卒中患者对健康教育的需求状况,以便更加有效地对其进行健康教育。方法:采用自行设计的问卷,调查146例脑卒中患者的健康教育需求。结果:住院期间的脑卒中患者最需要了解的教育内容是治疗方法及肢体运动方法,分别占83.6%、82.2%,最需要的健康教育方式是医护直接交流,占74%;最需要的健康教育方式是推荐相关书籍及实用手册,占56.2%。结论:根据脑卒中患者的健康教育需求和需求方式采取相应对策,才能收到健康教育效果。

TRAIL受体在老年结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨老年结肠癌中TRAIL受体DR4的表达及其与病理学参数的关系。方法应用免疫组织化学法检测82例老年结肠癌标本中DR4的表达,并结合浸润深度及分级探讨其临床意义。结果A、B、C期三组之间DR4表达量无显著性差异,D期癌组织中表达明显减少,且与A,B,C期比较差异有显著性;DR4的表达随着结肠癌分化程度的降低而降低,DR4蛋白表达差异有显著性。结论DR4的表达与结肠癌的分期及分级有关,分期越晚,癌细胞分化程度越差,DR4表达率越低,提示TRAIL与其结合后可杀伤结肠癌细胞,随着DR4表达量减少,被杀伤的肿瘤细胞减少,肿瘤的恶性度增加,预后较差。

乳酸盐腹膜透析液对人腹膜间皮细胞凋亡及bcl-2、bax表达和caspase-3活性的影响

目的:探讨不同浓度乳酸盐腹膜透析液(L-PDS)对腹膜间皮细胞(HPMC)凋亡和bcl-2、bax表达及caspase-3活性的影响。方法:采用酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型,分别用浓度为1.50%、2.50%和4.25%的L-PDS与HPMC共同培养,同时设对照组。采用流式细胞术检测HPMC凋亡,采用RT-PCR法测定bcl-2及bax mRNA的表达,采用免疫荧光法检测caspase-3的活性。结果:与对照组比较,L-PDS各组HPMC凋亡率增加,bcl-2 mRNA的表达降低,bax mRNA表达升高,caspase-3活性增加,上述指标变化中2.50%及4.25%L-PDS组与对照组比较差异有显著性(P<0.05),4.25%L-PDS组与2.50%L-PDS组比较差异也有显著性(P<0.05),而1.50%L-PDS组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:L-PDS可诱导HPMC凋亡,其机制可能是通过对bcl-2及bax mRNA表达的改变以及激活caspase-3活性而实现。

针对Fas的RNA抑制对缺血再灌注神经细胞的保护作用

目的探讨Fas-RNAi对缺血再灌注(I/R)损伤后神经细胞凋亡的保护作用。方法细胞随机分四组对照组、模型组、GFPsiRNA组、FassiRNA组。对照组用完全培养液培养,其他三组细胞制作体外(I/R)模型,GFPsiRNA组、FassiRNA于转染24h后造模,造模后6h进行Caspase-3、Fas表达检测,24h进行细胞凋亡相关检测。结果(1)Fas、Caspase-3阳性率模型组模型组的Fas阳性率(37.25±8.37)%、caspase-3阳性率(28.79±6.23)%明显高于对照组(7.21±3.28,8.01±2.31)%,差异有统计学意义(P<0.01)。GFPsiRNA组Fas阳性率(14.35±7.31)%、caspase-3阳性率(16.33±4.15)%明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)凋亡率模型组细胞(39.13±10.63)明显高于对照组(2.85±0.43),差异有显著性(P<0.01)。FassiRNA组(1.70±0.31)明显低于模型组(P<0.01)。结论针对Fas的siRNA能有效地抑制I/R损伤后神经细胞凋亡。对神经细胞I/R损伤有一定的保护作用。

左旋肉碱对老年尿毒症腹膜透析患者营养状况的影响

目的研究静脉注射左旋肉碱(L-carnitine,L-CN)对老年尿毒症腹膜透析患者营养状况的改善作用。方法将老年尿毒症腹膜透析患者随机分为常规治疗组(对照组)20例和L-CN治疗组(观察组)16例,观察组每日静脉注射左旋肉碱1.0g(5ml),疗程3个月。治疗前后测定血浆L-CN浓度和营养状况的评价指标。结果观察组治疗3个月后血浆L-CN浓度明显升高,营养状况的评价指标有改善,与对照组相比较差异显著(P<0.01)。结论静脉注射L-CN可治疗老年尿毒症腹膜透析患者L-CN缺乏症,明显改善其营养状况。

胸腺五肽基因转化烟草及其表达的研究

目的研究在烟草中表达胸腺五肽(Thymopentin,TP5)。方法合成TP5基因,构建重组载体pBI121+TP5,以烟草叶盘为外植体,通过根癌农秆菌介导转染烟草,取卡那霉素抗性植株用PCR方法筛选转染阳性植株及RT-PCR、质谱检测阳性植株叶片外植体中的TP5表达。结果抗性植株整合并表达TP5。结论成功构建了含TP5的植物表达载体pBI121+TP5,并能在烟草中表达。