刺五加中黄酮类化合物的微波辅助提取研究

利用微波辅助提取法 (MAE)提取刺五加中的黄酮类化合物 ,通过正交实验 ,考察了微波提取条件(包括溶剂、微波辐射时间、提取压力和料液比 )对刺五加中总黄酮提取率的影响 ,结果表明 :溶剂为 5 0 %乙醇 ,提取压力为 70 0kPa ,提取时间为 10min ,料液比为 1∶2 0时 ,提取率最佳。与索氏提取法相比较 ,提取率可提高 4 0 %。

蜂毒肽对卵巢癌生长抑制作用的实验研究

目的研究蜂毒肽对卵巢癌细胞株及卵巢癌皮下移植瘤动物模型的生长抑制作用。方法选取卵巢癌细胞株SKOV3,以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察蜂毒肽对SKOV3的生长抑制作用。通过建立卵巢癌皮下移植瘤动物模型来观察蜂毒肽对移植瘤的生长抑制作用。结果体外实验观察到蜂毒肽对卵巢癌细胞株生长有抑制作用,并且随着其浓度的增加抑制作用增强。在卵巢癌皮下移植瘤动物模型中,注射蜂毒肽各组瘤重明显低于对照组(P<0.05)。结论蜂毒肽可明显抑制卵巢癌细胞株及卵巢癌皮下移植瘤的生长并且随着蜂毒肽的浓度增加抑制作用增强。

紫丁香化学成分的研究

紫丁香（Syringa oblata Lindl)别名丁香、紫花丁香为木犀科(Oleaceae)丁香属(Syringa)植物，该植物约19种，我国有15种。地域分布广泛，多分布于辽宁、北京、河北、陕西、河南等地。

IL-2Rα模拟肽抑制小鼠皮肤移植排斥反应的研究

目的:研究IL-2Rα模拟肽CP对小鼠皮肤移植排斥反应的影响。方法:采用小鼠同种皮肤移植模型,通过淋巴细胞增殖试验、单向混合淋巴细胞反应、脾脏T淋巴细胞亚群分析和细胞因子分泌水平测定、皮肤移植物组织学改变、记录皮肤移植物平均存活时间(MST)研究环七肽CP的免疫抑制效应。结果:环七肽CP可降低小鼠脾细胞增殖反应的强度、减少受鼠脾脏T淋巴细胞中CD4+T淋巴细胞的数目并降低CD4+/CD8+的比值、下调受鼠脾脏T淋巴细胞诱导上清中IL-2和IFN的水平,并可延长皮肤移植物平均存活时间(MST);环七肽CP与免疫抑制剂CsA联用,显示二者具有协同效应。结论:环肽CP以IL-2Rα模拟肽的方式发挥生物学效应,可有效抑制小鼠皮肤移植排斥反应。

利用噬菌体肽库筛选IL-2Rα模拟表位肽的研究

目的筛选IL-2Rα模拟表位肽,为研制高效、特异性强的小分子肽类免疫抑制剂奠定基础。方法应用离子交换层析法从小鼠腹水中纯化抗人IL-2Rα单克隆抗体5G1,细胞ELISA方法检测其特异性。用5G1单抗筛选噬菌体环七肽库,并对噬菌体克隆进行抗原性鉴定。根据阳性克隆的DNA序列合成环肽并鉴定其生物活性。结果经5轮筛选、鉴定,获得5个与5G1有较强结合特性的噬菌体阳性克隆。DNA测序并推导氨基酸序列,得到Lys-X-{X}-Lys-Gly保守序列。依此序列合成环七肽CP,小鼠淋巴细胞增殖试验证实其有免疫抑制活性。结论环肽CP为IL-2Rα模拟表位肽,可作为IL-2Rα的拮抗剂发挥免疫抑制效应。

不同增殖能力结肠癌细胞株iNOSmRNA表达的比较研究

目的 :探讨诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA在结肠癌不同增殖能力细胞株中的表达和作用 ,研究全反式维甲酸 (ATRA)对于结肠癌不同增殖能力细胞株iNOSmRNA表达的影响。方法 :采用MTT方法确定结肠癌细胞株CW - 2和LS174T的生长增殖状况 ,用RT -PCR和Northernblot方法检测结肠癌中iNOSmRNA的表达量。结果 :MTT生长曲线显示结肠癌细胞株LS174T的生长增殖比CW - 2快 ;RT -PCR显示CW - 2细胞株有较强的iNOSmRNA表达 ,而LS174T细胞株iNOSmRNA的表达较弱 ;Northernblot检测在CW - 2中有明显的iNOSmRNA表达 ,但在细胞株LS174T中表达相对较弱 ;ATRA对结肠癌CW - 2和LS174T细胞株iNOSmRNA的表达量无明显影响。结论 :iNOSmRNA对结肠癌细胞株生长有双重作用 ,即在低增殖结肠癌CW - 2呈高表达 ,可以通过细胞毒或诱导细胞凋亡等作用发挥抗肿瘤效应 ;在高增殖结肠癌LS174T呈低表达 ,产生NO作为信号转导的重要分子 ,增加血供和血管生成 ,促进肿瘤生长、侵袭和转移。ATRA可以抑制结肠癌细胞株的生长。

组织工程化人工皮肤的超微结构研究

目的 : 观察组织工程化人工皮肤的超微结构特点。方法 : 制备组织工程化人工皮肤 ,超薄切片 ,透射电镜观察。结果 : 可见细胞间连接、张力细丝、透明角质颗粒和基底膜结构形成。结论

从人参果肉中提取人参皂苷-Re工艺的研究

目的 :建立从人参果肉中分离人参皂苷 Re的方法。方法 :利用D4 0 2 0大孔吸附树脂吸附人参果总皂苷 ,分别以水、2 %NaOH和 90 %乙醇洗脱 ,收集乙醇洗脱液 ,回收乙醇 ,静置沉淀 ,得到人参皂苷 Re。结果 :所得产品的含量达到 5 0 %以上。结论 :以本法提取分离人参皂苷 Re ,方法简便易行 ,为进一步将人参皂苷 Re开发为新药奠定了基础。

脂肪来源基质细胞的扩增及多分化潜能研究

目的建立人脂肪来源的基质细胞（ADSCs）的分离和扩增方法,探讨ADSCs的多向分化潜能。方法采用胶原酶消化法分离扩增人ADSCs,测定其生长的经时变化、累积生长倍数等;应用不同因子诱导ADSCs向脂肪细胞及神经元样细胞分化并进行鉴定。结果每100ml脂肪抽吸物中可分离得到2×10^7-4×10^7个有核细胞,60d内扩增至P8;油红O染色、免疫细胞化学染色及RT-PCR证实ADSCs经诱导可分化为脂肪细胞及神经元样细胞。结论建立了ADSCs的扩增培养方法,扩增培养的ADSCs具有旺盛的增殖能力,并且具有向脂肪细胞及神经元样细胞分化的潜能。有望作为一种成体多能干细胞应用于组织工程及细胞治疗。

氟中毒大鼠成骨细胞激活与bFGF、c-fos/c-jun表达研究

目的探讨氟中毒大鼠激活的成骨细胞系中bFGF、c-fos、c-jun的差异表达。方法应用饮水加入氟化钠进行大鼠染氟实验,采用原位杂交技术、Western blot技术、免疫组织化学方法,对氟中毒大鼠骨组织进行增殖刺激因子bFGF、c-fos、c-jun的差异表达的定量分析。结果实验表明无论是在高钙饲养还是在低钙饲养,过量摄入NaF可刺激慢性氟中毒大鼠椎骨各包被成骨细胞增殖,并诱导bFGF过表达,与对照组相比差异显著(P<0.001);c-fos、c-jun表达明显高于对照组,差异显著(P<0.001、P<0.05);相关分析显示bFGF过表达与c-fos、c-jun的蛋白质水平呈正相关。结论过量氟可以刺激大鼠成骨细胞系激活、增殖能力增强、bFGF、c-fos、c-jun表达增强,提示bFGF可能通过上调c-fos、c-jun的表达而参与成骨细胞的增殖和分化。

碱性成纤维细胞生长因子对离体和在体关节软骨细胞影响的实验研究

目的 观察bFGF对离体和在体关节软骨细胞的影响。方法 分离培养家兔关节软骨细胞 ,采用MTT法观察bFGF对离体培养关节软骨细胞增殖的影响 ,利用创伤性关节软骨损伤动物模型 ,观察bFGF对在体关节软骨细胞的作用。结果 经bFGF处理的关节软骨细胞增殖明显增强 ,并呈明显的量效关系 ,其峰值浓度为 10ng ml。将此浓度应用于在体条件 ,发现实验组修复组织填充快 ,质量好 ,为透明软骨性修复。结论 bFGF不仅促进离体培养软骨细胞增殖 ,在体条件下依然能有效地促进软骨细胞的增殖 。

解毒通络保肾散对晚期糖基化终末产物肾毒性影响的实验研究

目的观察解毒通络保肾散对体外注射糖化血清蛋白大鼠肾脏功能毒性的影响。方法清洁级雄性Wistar大鼠50只,均分为正常组、单纯血清组、糖化血清蛋白组、氨基胍组、解毒通络保肾散组。以氨基胍组作为抑制晚期糖基化终末产物(AGEs)的阳性对照组,观察解毒通络保肾散对注射体外制备的糖基化血清蛋白大鼠肾脏功能的毒害作用的影响。结果肾重/体重比值、尿白蛋白排泄量、血循环及肾组织中AGEs含量,注射糖化血清蛋白组与正常对照组比,明显升高(P<0.01)。中药解毒通络保肾散组能够明显抑制尿白蛋白排泄量,血循环及肾组织中AGEs含量,与氨基胍比较无明显差异(P>0.05)。结论解毒通络保肾散能够抑制AGEs形成,减少AGEs介导的肾组织损伤,降低尿微量白蛋白排泄,阻止或延缓糖尿病肾病进程。

组织工程化人工皮肤的细胞外基质功能研究

目的:观察组织工程化人工皮肤的细胞外基质(ECM)功能。方法:3H-脯氨酸掺入实验,天狼星红染色,AB-PAS染色。结果:组织工程化人工皮肤天狼星红染色和AB-PAS染色阳性,3H-脯氨酸掺入值增高。结论:这种组织工程化人工皮肤可以合成、分泌细胞外基质。

网状分枝扩增法检测EB病毒基因及临床应用研究

目的应用网状分枝扩增法(RAM)检测NHL外周血EB病毒基因,探讨EB病毒感染与NHL的相关性。方法利用人工合成的EBER-1启动子基因,建立网状分枝扩增检测法,以EB病毒阳性细胞株Raji和EB病毒阴性的人白血病细胞株NB4作对照,检测了NHL患者外周血中EB病毒基因。结果RAM能够检出样品中10个分子的靶基因;120例非霍奇金淋巴瘤(NHL)标本中,76例阳性(63.33%),与PCR方法检出结果相一致。结论RAM技术敏感、特异、简便易行;NHL与EB病毒感染具有较高的相关性。

斯普林对小鼠免疫功能影响的研究

目的探讨斯普林对小鼠脾细胞增殖转化能力、体内细胞因子分泌的影响和小鼠免疫功能的作用。方法采用MTT比色法测定脾细胞的增殖程度,细胞因子生物学活性测定法检测小鼠体内白细胞介素2(interleukin2,IL2)和IFN的产生情况。结果应用斯普林注射液的实验组小鼠分为3.50和1.75mg/(kg·d)免疫剂量,在淋巴细胞转化试验中,两个剂量的实验组小鼠吸光度值(OD490)分别为0.63±0.14和0.56±0.09,刺激指数分别为1.93±0.28和1.76±0.16;与对照组小鼠比较差异有统计学意义,t=3.543,P=0.008;t=3.332,P=0.011。实验组小鼠脾细胞上清中IL2和IFN细胞因子的分泌量均较对照组增高,两者间差异有统计学意义,t=4.229,P=0.003;t=3.140,P=0.013。结论斯普林可明显增强小鼠的免疫功能,具有较强的抗肿瘤作用。

选择性刺激犬房室结脂肪垫的电生理实验研究

目的选择性刺激犬心脏房室结(AVN)脂肪垫,观察其对心脏窦房结(SAN)功能及房颤(AF)时房室传导的影响。方法取蒙古犬36只,经开胸直接刺激AVN脂肪垫。刺激能量由0mA逐级增高直至AF诱发。测量不同能量状态下窦性周期长度(SCL)及AF诱发阈值。AF诱发后,继续逐级增加刺激电流及脉宽,分别记录诱发AF的连续10个RR间期。结果AF诱发阈值为(4.1±1.2)mA。无1例犬(0%)在直接AVN脂肪垫刺激下延长SCL>10%。逐级递增的AVN脂肪垫刺激导致AF的RR间期进行性延长。结论直接AVN脂肪垫刺激诱发AF并有效延长AF时的房室传导,通过介入方法定向消融AVN脂肪垫有望成为有效控制AF心室率的新方法。

芪冬颐心口服液对柯萨奇B_3病毒感染的乳鼠心肌细胞的保护作用研究

Objective: To investigate the protective effectof Qidongyixin Oral Liquidon cultured rat cardiomyocytes infected withCVB 3 . Methods:Monolayer culture of spontaneously contracting rat heart cells were obtained from new born SD rats and seeded into culture plates. Results:Chronic Pulmonary Emphysema was lightened,Qidongyixin Oral Liquidcould inhibit the release of cardiac cytosolic enzymes-lactic acid dehydrogenase and glutamic-pyruvic transaminase. Conclusion: Qidongyixin Oral Liquidhas protective effects on viral myocarditis.

组织工程技术尿道重建的实验研究

目的利用组织工程技术进行人工管状皮肤的培养,探讨其用于尿道重建的可行性。方法用Wistar大鼠乳鼠皮肤为细胞来源,结合管状壳多糖基质网架,在体外共同培养成复层皮肤结构,移植到裸鼠皮下。分别于移植的5、7、14、28、35d收取标本,光镜下观察移植物生长情况。以没有种植细胞的壳多糖基质网架作为对照组,进行对比分析。结果移植物在裸鼠皮下生长良好,未发生收缩。移植初期细胞数量少,排列不规律;随着时间的延长,细胞数量逐渐增多,排列趋于规律。所有移植物均见成纤维细胞生长,约5-7层,细胞呈长梭形,成纤维细胞向表皮细胞层游走,并规律的生长在表皮细胞层下,细胞大致按层生长,只有少量细胞相互长入对方。在移植后的5d,可见有毛细血管长入。之后,毛细血管的数目日渐增多。移植物的表皮层生长良好,呈4-6层,但分化较差。对照组可见有大量炎性细胞。结论移植物的成纤维细胞生长、分化较好,表皮细胞增殖较好,但分化差。以壳多糖为支架的人工皮肤进行尿道修复具有可行性。

蟾毒内酯抗流感病毒的实验研究

病毒 FM1流感病毒由北京预防医学科学院提供，实验浓度采用10TCID50／0．1ml。细胞Veto细胞、狗肾细胞(MDCK)、由本研究室保存。试剂营养液为10％FCS RPMI1640，维持液为2％FCS RPMI1640。

中药保肝作用的研究概况

中草药是祖国医药学宝库中一颗璀璨的明珠，是天然药物的重要领域，是人类的共同财富。几千年来，祖国的传统医药为炎黄子孙的生息、繁衍做出了不可磨灭的贡献。随着近代科学技术的发展，为中药学研究注入了新的活力，同时也面临新的机遇和挑战。中药研究不应再囿有窠臼。