fPSA/tPSA比值优化前列腺癌早期诊断作用的研究

目的 :探讨游离前列腺特异性抗原 /总前列腺特异性抗原 (fPSA/tPSA)比值在优化tPSA早期诊断前列腺癌(PCa)中的作用。 方法 :以长春市 5 0岁以上PCa集团普查中tPSA在 4 .0～ 2 0 .0 μg/L范围、并接受前列腺活检的1 87例受检者为研究对象 ,测定tPSA、fPSA含量 ,应用SPSS 1 0 .0软件对不同区间fPSA/tPSA比值进行统计学分析。结果 :①tPSA在 4 .0～ 1 0 .0 μg/L、1 0 .0～ 2 0 .0 μg/L区间时 ,PCa检出率分别为1 8.1 %、2 2 .5 %。②ROC曲线分析显示不同区间时fPSA/tPSA比值的曲线下面积 (AUC)均大于tPSA (P <0 .0 5 )。③fPSA/tPSA比值取 0 .2 5为界值时 ,tPSA在 4 .0～ 1 0 .0 μg/L、1 0 .0～ 2 0 .0 μg/L两区间诊断PCa的敏感度分别为90 .5 %和 87.5 % ,可以分别避免 2 6 .7%和 1 1 .3%的人群进行活检。 结论 :在集团普查中 ,fPSA/tPSA比值在tPSA为 4 .0～ 2 0 .0 μg/L时可以提高检测PCa的特异性 ,减少不必要的活检。

中日两城市前列腺癌普查结果及临床病理对比研究

目的比较中日两城市前列腺癌的发病状况和临床病理情况。方法以长春市3566例和日本名取市2212例55岁以上男性为对象,检测血清前列腺特异抗原(PSA)含量,血清PSA>40ng/ml者行超声引导下系统活检并进行临床病理学诊断。结果(1)长春市受检人群血清PSA>40ng/ml占52%(185/3566人),低于名取市85%(189/2212人)。(2)前列腺癌发现率长春市为08%(28/3566),低于日本名取市21%(46/2212)。(3)PSA>40ng/ml者活检阳性率两市相近,长春市为252%(28/111),名取市为269%(46/171)。(4)临床分期两市相近,长春市局限期癌(T1,T2期)占61%,进展期癌(T3,T4期)占39%,名取市分别为65%和35%。(5)病理分级长春市以中、低分化腺癌为主(89%),名取市以高、中分化癌为主(765%)。结论(1)普查可实现前列腺癌的早期诊断。(2)长春市前列腺癌发现率低于名取市。(3)长春市前列腺癌临床分期与名取市相近,病理分级恶性度高于名取市。

PSA、PSAD、f/tPSA在早期前列腺癌诊断作用的研究

目的探讨前列腺特异性抗原(PSA)、PSA密度(PSAD)、游离PSA/总PSA比值(f/tPSA)在诊断早期前列腺癌(PCa)中的价值。方法对640例患者行前列腺穿刺活检,其中PSA<4.0 ng/ml者36例为直肠指诊及直肠超声可疑者。病理诊断为415例良性前列腺增生和225例前列腺癌,利用酶联免疫法(ELISA)测定患者血清中的PSA、游离PSA(fPSA),利用经直肠超声测定前列腺体积,并计算出f/tPSA及PSAD进行统计学分析。结果PCa组患者血清的PSA、PSAD明显高于前列腺良性增生(BPH)组(P<0.01),f/tPSA明显低于BPH组(P<0.01),但当血清PSA为4-20 ng/ml时,两组患者PSA没有明显差异(P>0.05)。以PSA>4.0ng/ml、PSAD>0.15f、/tPSA<0.18为临界值可明显提高对PCa诊断的特异性,特别是当血清PSA为4-20 ng/ml时对提高临床诊断更有意义。结论联合测定PSAf、PSA并计算f/tPSA及PSAD对诊断PCa具有明显临床意义。

减毒沙门氏菌靶向携带共表达质粒p53／siRNA-survivin抗前列腺癌的体内研究

目的:以人减毒沙门氏菌为基因运载体,探讨其携带p53、siRNA-survivin及其共表达质粒p53/siRNA-survivin对肿瘤的靶向性及抗人前列腺癌效应。方法:复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,分别将已构建的重组表达质粒siRNA-scramble,p53,siRNA-survivin及共表达质粒p53/siRNA-survivin转化到减毒人伤寒沙门菌Ty21a,制备成对应重组减毒沙门菌,通过灌胃及瘤内注射到前列腺癌荷瘤裸鼠体内,观察成瘤时间及瘤块大小;以携有绿色荧光蛋白siRNA-survivin的重组菌作为报告基因,流式细胞术检测其在肝、脾、肿瘤组织中靶向分布及基因呈递作用;应用RT-PCR,Western blot,及免疫组织化学染色方法检测治疗后肿瘤组织p53和Survivin基因及蛋白表达。结果:各治疗组均较对照组肿瘤生长缓慢,肿瘤体积小,共表达质粒组与单独基因治疗组比较,肿瘤体积明显缩小,抑瘤率高;荷瘤裸鼠肿瘤组织可测及Survivin mRNA表达下降,p53基因表达增强,p53相关基因GRIM-19mRNA和蛋白表达增强;FCM检测结果发现,减毒人沙门氏菌可在肝、脾及肿瘤组织中存活及表达,但以肿瘤中绿色荧光聚集明显且维持时间较长,其他脏器仅见极少的绿色荧光。结论:人减毒沙门氏菌可作为外源基因载体携带重组质粒,对前列腺癌移植瘤有明显的靶向性,其靶向介导的p53,siRNA-survivin及共表达基因p53/siRNA-survivin,对前列腺癌荷瘤裸鼠有治疗作用,共表达基因较单基因治疗效果好,具有显著的协同作用。

survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达

目的:探讨survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化、RT-PCR和Western印迹法检测survivin和GRIM-19在正常前列腺(NP)组织、良性前列腺增生(BPH)组织和前列腺癌(PCa)组织中的表达情况。结果:免疫组化结果显示survivin在NP、BPH和PCa组织中的表达率分别为6.25%、18.18%和90.62%(P<0.01);GRIM-19的表达率分别为87.50%、81.82%和9.37%(P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,在NP和BPH组织未检测到survivinmRNA表达,而PCa组织可检测到survivinmRNA高表达。Western印迹结果证实,在NP和BPH组织中有微量的survivin蛋白表达;而PCa组织可检测到survivin蛋白高表达;在NP和BPH组织中GRIM-19蛋白表达强阳性,而PCa组织中只有微量表达,两者比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:survivin和GRIM-19的表达可能与PCa的发生密切相关。

Survivin-siRNA对前列腺癌PC-3M细胞增殖的抑制作用

目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株PC-3M的增殖抑制作用。方法:构建两个针对survivin siRNA表达载体,与脂质体和空质粒两个对照组一起分别转染前列腺癌PC-3M细胞后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平,MTT法测定细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果:转染72h后,两个实验组细胞的survivin mRNA水平是脂质体组的48%±6%(n=3)和30%±5%(n=3),蛋白表达水平是脂质体组的38%±4%(n=3)和36%±4%(n=3)。MTT检测实验组细胞的生长速度分别是脂质体组的44.20%±2.08%(n=3)和39.20%±1.93%(n=3),流式细胞术发现实验组G1期细胞比例明显高于两个对照组,而G2期和S期细胞比例减少,细胞出现凋亡。结论:利用survivin-siRNA可明显抑制前列腺癌PC-3M细胞的增殖,细胞受阻于G1期,诱导细胞凋亡,为进一步进行动物体内研究奠定了基础。

经直肠超声前列腺癌声像特征及前列腺内腺PSA密度在前列腺癌诊断中的作用

目的通过经直肠超声分析前列腺癌声像特征并测量前列腺内腺、外腺与总体积,参考PSA探讨前列腺内腺PSA密度(IPSAD)在前列腺癌与前列腺增生鉴别诊断中的意义。方法回顾分析经直肠超声前列腺癌声像特征及经超声引导下6点活检病理诊断的49例前列腺癌、96例前列腺增生的临床资料。结果(1)前列腺癌声像特征以低回声为主,晚期可见被膜浸润及不规则。(2)前列腺内腺体积增生与癌有显著性差别。(3)PSA、PSA密度(PSAD)、IPSAD在增生与前列腺癌中的比较,均有显著性差异。(4)IPSAD在前列腺癌诊断的特异度为75.5%,敏感度为93.3%,优于PSAD。结论前列腺癌声像特征及IPSAD是鉴别前列腺癌与增生的重要指标。

人参单体皂苷Rh_2诱导小鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡

目的：探讨人参单体皂苷Rh2抗小鼠前列腺癌细胞RM-1的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测不同浓度Rh2与RM-1细胞株存活率的关系;吖啶橙染色观察Rh2诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞凋亡周期,计算细胞平均凋亡指数。结果：RM-1细胞经Rh2处理后,细胞生长明显受抑制,当Rh2浓度为5、15、25和30mg·L^-1时,其生长抑制率分别为12.0%、36.1%、51.2%和69.3%,呈明显的浓度依赖性;吖啶橙荧光染色可见经药物处理的细胞呈现明显的凋亡形态;细胞周期G1期前出现凋亡峰,Rh2浓度为15和25mg·L^-1时,细胞凋亡率分别为41.9%和48.9%。结论：5-30mg·L^-1Rh2可诱导RM-1细胞凋亡,其具有明显的抗肿瘤作用。

Survivin-siRNA对前列腺癌DU145细胞的促凋亡作用

目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株DU145的促凋亡作用。方法:构建针对survivin的siRNA表达载体pSi-sur,与脂质体和scramble-siRNA(pSi-scrambled)对照组分别转染前列腺癌细胞DU145后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平;吖啶橙染色、Annexin V-FITC流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:转染72 h后,实验组细胞的survivin mRNA水平是脂质体组的0.28±0.07(n=3),蛋白表达水平是脂质体组的0.34±0.05(n=3),与对照组比较,差异显著(P<0.05);吖啶橙染色、Annexin V-FITC和TUNEL法均观察到实验组细胞呈现明显的凋亡现象。结论:利用survivin-siRNA可明显抑制前列腺癌细胞DU145 survivin基因和蛋白表达,并诱导细胞凋亡,结果为进一步进行动物体内研究奠定了基础。

非特异性肉芽肿性前列腺炎的诊治体会(附32例报告)

目的:探讨非特异性肉芽肿性前列腺炎(NSGP)的诊断和治疗方法。方法:2000年9月～2006年5月共诊治NSGP32例,均采用经直肠超声(TRUS)引导下穿刺活检病理确认后,给予抗生素等药物治疗。结果:NSGP的基本病理形态特征是以导管或腺泡为中心的肉芽肿。32例随访6～48个月,平均24个月。排尿刺激症状及梗阻症状好转,Qmax提高至15.0～24.0ml/s,3例尿潴留患者经治疗后,Qmax分别为12.0、14.5和16.5ml/s。直肠指检前列腺硬结缩小至0.5cm×1.0cm左右,质地变软,但恢复较慢,可达12个月。血PSA降至1.3～11.5μg/L,其中17例<4μg/L。4例于治疗后6～12个月症状复发,血PSA上升,经再次抗炎治疗,症状缓解,2例PSA<4μg/L;2例PSA仍>4μg/L,但未发现PCa。结论:TRUS引导下穿刺活检是确诊NSGP的方法;抗生素加用α受体阻断剂可明显缓解症状;对于梗阻症状严重,合并尿潴留患者可行经尿道电切术。

前列腺特异性抗原集团普查是前列腺癌早期诊治的最佳途径

为在我国实现前列腺癌早期发现、早期诊断与治疗的目的 ,对 5 0岁以上男性进行PSA集团普查 ,以集团普查癌与临床前列腺癌进行对比分析 ,证明只有通过人群普查才能发现早期前列腺癌并为病人提供根治的机会。同时探讨了前列腺癌的治疗现状与存在的问题 。

DIM对人激素非依赖性前列腺癌细胞PC3M的生长抑制作用

目的:探讨3,3-二吲哚基甲烷(3,3-Diindolylmethane,DIM)对人激素非依赖性前列腺癌细胞PC3M的生长抑制作用。方法:应用MTT生长抑制实验观察不同浓度DIM对PC3M细胞增殖活性的影响,流式细胞术观察不同浓度DIM对PC3M细胞的细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:不同浓度的DIM对PC3M细胞有显著的增殖抑制作用(P<0.05),药物浓度为10、30、60和120μmol.L-1时,抑制率分别为35.6%、58.8%、76.6%和90.5%。当药物浓度为60μmol.L-1时,细胞周期停滞在G1期,并诱导22.6%的PC3M细胞发生凋亡。结论:DIM可抑制PC3M细胞增殖,并诱导其凋亡,为DIM用于激素非依赖性前列腺癌的治疗提供了实验依据。

人前列腺癌多药耐药细胞系的建立

目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系。方法:以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P-gP)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达。结果:经顺铂诱导建立的人前列腺癌细胞系PC3M/CDDP对顺铂、丝裂霉素、阿霉素、5-氟尿嘧啶、长春新碱等药物的50%抑制浓度(IC50)分别为(0.603±0.102)、(0.201±0.056)、(0.267±0.067)、(1.676±0.321)和(0.657±0.227)mg·L-1,与PC3M细胞系比较差异有显著性(P<0.05);免疫细胞化学染色结果显示,PC3M/CDDP细胞系MRP、P-gP表达强度明显大于PC3M细胞系(P<0.05);PC3M/CDDP细胞系的细胞倍增时间为40.5h,与PC3M细胞系(48.6h)比较差异无显著性(P>0.05)。结论:成功建立稳定的人前列腺癌PC3M/CDDP细胞系,该细胞系具有对多种抗癌药耐药及细胞增殖未受影响的特点,可应用于下游实验。

尾叶香茶菜二萜类化合物B对小鼠前列腺癌细胞细胞周期的影响及其机制

目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制。方法:MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1细胞增殖率的影响;相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响;流式细胞术分析细胞周期变化;RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后RM-1细胞p53、GRIM-19、STAT3和细胞周期相关因子CHK1、CDK2mRNA和蛋白水平的表达。结果:(1)MTT结果:DB可抑制RM-1细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性;(2)形态学观察和流式细胞术检测:经DB处理后的RM-1细胞出现生长抑制,细胞主要阻滞在G1期;(3)RT-PCR结果:DB(2mg/L,4mg/L,8mg/L)分别作用RM-1细胞12h、24h、48h后,p53、CHK1、GRIM-19mRNA的含量明显高于对照组,CDK2、STAT3mRNA的含量明显低于对照组(P<0.05);(4)Western blotting结果:DB(2mg/L,4mg/L,8mg/L)分别作用RM-1细胞12h、24h、48h后,P53、GRIM-19蛋白表达水平高于对照组,而CDK2蛋白表达水平则低于对照组。结论:DB可抑制RM-1细胞增殖,其机制可能是与细胞周期相关基因p53的上调,CDK2表达下降有关,影响了G1期进入S期,同时GRIM-19-STAT3-CDK2途径可能也参与G1期阻滞的过程。

GRIM-19基因对前列腺癌DU145细胞的促凋亡作用

目的探讨GRIM-19基因对前列腺癌DU145细胞的促凋亡作用，并分析相关机制．方法将构建成功的pGRIM-19重组质粒转染DU145细胞株，应用MTT法检测其对细胞增殖能力的影响，通过流式细胞术检测细胞周期及凋亡率，应用半定量RT-PCR检测GRIM-19及caspase-3 mRNA转录水平．结果流式细胞术结果显示：与对照组比较，pGRIM-19重组质粒明显抑制DU145细胞增殖，并使细胞周期发生改变，多数细胞抑制在G0／G1期，细胞凋亡率增加明显；通过RT—PCR电泳结果证实：pGRIM-19重组质粒明显促进GRIM-19的表达，同时激活caspase-3．结论重组质粒pGRIM-19可明显抑制DU145细胞增殖，并促进其凋亡，其凋亡的发生机制与激活caspase-3有关．

影响前列腺癌患者预后因素的Cox模型分析

目的探讨影响前列腺癌患者预后的因素。方法对321例前列腺癌患者的临床病例和随访资料进行分析。运用Cox比例风险模型进行单因素和多因素分析,建立生存预测方程。结果影响前列腺癌患者预后的因素有TNM分期中T期、M期、诊断方式、前列腺根治术、双侧睾丸切除术及造漏术等六项指标。据此建立前列腺癌生存预测方程:h(t,X)=ho(t)exp(0·2565X11+0·6278X13+0·5353X29-0·4983X28-0·9589X25-0·7345X15),运用此方程将预测结果与随访的实际结果进行比较,灵敏度、特异度及符合率分别为84·57%、93·08%、88·79%,两者基本相符。结论诊断方式、前列腺根治术、双侧睾丸切除术是影响前列腺癌预后的保护因子;TNM分期中T期、M期是危险因子。前列腺癌生存预测方程可以用于指导临床的诊治。

碱性成纤维细胞生长因子在前列腺癌和良性前列腺增生组织中表达的意义

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在前列腺癌和良性前列腺增生组织中表达的意义。方法采用斑点杂交和免疫组化法测定50例正常前列腺组织(正常对照组)、40例良性前列腺肥大(BPH)组织和48例前列腺癌组织中bFGF的表达情况。结果BPH和前列腺癌组织中bFGF的表达明显高于正常对照组(P<0.01)。bFGF表达升高的程度与BPH的分度、前列腺癌的病理分级和临床分期关系不显著。结论bFGF与前列腺癌和前列腺增生的发生发展过程有关。

聚肌胞对小鼠前列腺癌的抑制作用

目的:观察聚肌胞对小鼠前列腺癌的抑制作用。方法:将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重采用区组随机分组方法分为对照组和聚肌胞组,每组8只,每隔2日分别瘤内注射生理盐水和聚肌胞,第7次后切除瘤灶,称瘤重,计算瘤重抑制率,绘制前列腺癌生长曲线及荷瘤鼠生存曲线。前列腺癌组织HE染色观察形态学变化。结果:对照组和聚肌胞组瘤重分别为(4·14±1·56)和(1·58±0·67)g,两组瘤重比较差异具有显著性(P<0·05);聚肌胞组瘤重抑制率为67·85%;前列腺癌生长曲线显示,聚肌胞组小鼠前列腺癌生长较慢;聚肌胞组荷瘤小鼠的生存时间较对照组长(P<0·05);病理显示对照组较聚肌胞组前列腺癌细胞增殖活跃。结论:聚肌胞可以减慢小鼠前列腺癌的生长,延长荷瘤小鼠生存时间。

Survivin-siRNA真核重组质粒对前列腺癌移植瘤的抑制作用

目的:探讨survivin-siRNA真核重组质粒对前列腺癌移植瘤的抑瘤效应,并分析相关机制。方法:体外培养前列腺癌DU145细胞,将细胞注射到裸鼠背部皮下,待移植瘤直径达到8 mm时将瘤无菌取出,分成直径约2 mm的瘤块,手术植入另外的裸鼠皮下,将survivin-siRNA质粒或scrambled siRNA对照质粒电转染进行治疗,描记移植瘤生长曲线,并计算抑制率;通过HE染色、免疫组化染色及TUNEL染色观察survivin-siRNA对移植瘤影响。结果:成功构建裸鼠前列腺癌移植瘤模型。与mock和scrambled siRNA组相比,survivin-siRNA抑瘤率分别为两对照组的61.81%和62.87%;免疫组织化学染色发现:survivin-siRNA质粒明显抑制细胞内survivin表达;TUNEL染色证实治疗组肿瘤细胞凋亡明显增加。结论:重组质粒survivin-siRNA明显抑制DU145细胞移植瘤的生长,抑制内源性survivin蛋白的表达并促进细胞凋亡,针对survivin靶点的基因治疗前景广阔。

经直肠B超引导下前列腺穿刺活检在前列腺癌诊断中的应用价值(附658例报告)

目的:探讨经直肠超声引导下穿刺活检在前列腺癌(PCa)诊断中的临床应用价值。方法:自2000年开始,对中老年男性进行以PSA为主要检查指标的PCa普查,累计23761例。普查中发现PSA>4μg/L者占普查人群的8.0%,达1900例。以前列腺PSA密度(PSAD)>0.15ng/cm3,同时结合直肠指诊为658例疑似PCa者行经直肠超声引导下的前列腺外腺6点穿刺活检术。结果:经穿刺证实为PCa者168例(25.5%),BPH者347例(52.7%),非典型性增生者24例(3.6%),腺瘤样改变者36例(5.5%),前列腺炎者57例(8.7%),肉芽肿性前列腺炎者26例(4.0%);168例PCa者中,前列腺周围区见低回声反射103例(61.3%)。PCa者PSAD为0.19±0.04,前列腺体积为(28.11±12.79)cm3;BPH者PSAD为0.12±0.02,前列腺体积为(36.22±18.18)cm3,分别比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:经直肠超声引导下前列腺6点穿刺活检具有准确、安全等优点,是确诊PCa的有效方法之一。同时结合正确应用PSA、PSAD,不但提高PCa的早期诊断率,而且有助于PCa高危人群的随访。