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生物砾间接触氧化反应器中原核生物多样性及其对剩余污泥减量化的贡献 被引量:3
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作者 林山杉 金玉花 +1 位作者 付丽丽 全成实 《自然科学进展》 北大核心 2006年第10期1245-1250,共6页
采用分子生物学手段,通过构建16 S rRNA基因文库,对新型剩余污泥减量化处理技术——生物砾间接触氧化反应器(GCOR)中悬浮颗粒的原核生物多样性进行了系统发育分析,并讨论了多种原核生物共存对剩余污泥减量化的贡献.结果表明,颗粒的原... 采用分子生物学手段,通过构建16 S rRNA基因文库,对新型剩余污泥减量化处理技术——生物砾间接触氧化反应器(GCOR)中悬浮颗粒的原核生物多样性进行了系统发育分析,并讨论了多种原核生物共存对剩余污泥减量化的贡献.结果表明,颗粒的原核生物可分为好氧呼吸菌群与厌氧水解发酵菌群两大类.其中,优势菌群分别是以呼吸代谢为主的假单胞菌属和以发酵为主要代谢方式的拟杆菌/噬纤维菌菌属,它们的16S rRNA序列各占文库的17%.此外,好氧菌群中还发育有α蛋白菌、β蛋白菌、γ蛋白菌、亚硝化螺菌属、土壤杆菌属、衣原体属、葡萄糖杆菌属及褐色高温单孢菌属细菌;厌氧菌群中则发育属于螺旋体属、δ蛋白菌、反硝化菌、乳杆菌属、真杆菌属的原核生物.反应系统中两大相反环境多种原核生物的共存,为在降解污水有机物的同时,达到剩余污泥减量化做出巨大贡献. 展开更多
关键词 生物砾间接触氧化反应器悬浮颗粒 原核生物多样性 16S rRNA基因文库 假单胞菌属 拟杆菌/噬纤维菌属
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靶向Midkine基因的siRNA真核表达载体的构建及鉴定
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作者 孙梅 谢淑丽 +1 位作者 张兴义 李玉林 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期829-830,共2页
目的构建靶向midkine基因的siRNA的表达载体,为研究midkine在肿瘤中作用提供一个新的方向。方法根据基因库中midkinecDNA序列设计和合成针对人midkine基因的siRNA寡核苷酸,定向克隆入质粒载体PGCsiU6,对该重组表达载体进行酶切鉴定及DN... 目的构建靶向midkine基因的siRNA的表达载体,为研究midkine在肿瘤中作用提供一个新的方向。方法根据基因库中midkinecDNA序列设计和合成针对人midkine基因的siRNA寡核苷酸,定向克隆入质粒载体PGCsiU6,对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序。结果酶切鉴定、DNA测序证实表达质粒构建成功,无碱基突变。结论成功构建了靶向midkine基因表达的siRNA干扰质粒载体PGCsiU6/midkine,为进一步运用RNA干扰技术进行midkine基因功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 midkine基因 小干扰RNA 质粒
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MK基因特异性siRNA对乳腺癌细胞凋亡的影响
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作者 孙梅 刘洪义 +1 位作者 张兴义 李玉林 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第4期427-429,共3页
目的探讨RNA干扰技术抑制Midkine对人乳腺癌癌细胞株MCF-7细胞凋亡的影响。方法人工合成抑制Midkine基因的siRNA片段,通过脂质体转染到MCF-7细胞内,应用RT-PCR检测bcl-2 mRNA表达,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化,通过测定光密度值... 目的探讨RNA干扰技术抑制Midkine对人乳腺癌癌细胞株MCF-7细胞凋亡的影响。方法人工合成抑制Midkine基因的siRNA片段,通过脂质体转染到MCF-7细胞内,应用RT-PCR检测bcl-2 mRNA表达,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化,通过测定光密度值检测Caspase-3活性。结果转染siRNA后的MCF-7细胞,bcl-2 mRNA表达显著下降、细胞线粒体膜电位明显下降和Caspase-3酶活性升高。结论MK-siRNA通过下调bcl-2基因,而改变细胞线粒体膜电位使Caspase-3酶活性升高诱导细胞的凋亡。 展开更多
关键词 SIRNA MIDKINE MCF-7 凋亡
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MK-siRNA对人乳腺癌细胞的生长、粘附及迁移能力的影响
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作者 孙梅 李玉林 +1 位作者 刘洪义 张兴义 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2009年第12期1675-1677,共3页
目的:探讨siRNA MK转染对乳腺癌MCF-7细胞增殖和转移能力的影响。方法:构建特异性抑制Midkine基因siRNA片段,转染至乳腺癌MCF-7细胞中,CCK-8法比较细胞增殖能力的改变,体外迁移实验比较细胞运动能力的改变,基质胶粘附实验比较细胞粘附... 目的:探讨siRNA MK转染对乳腺癌MCF-7细胞增殖和转移能力的影响。方法:构建特异性抑制Midkine基因siRNA片段,转染至乳腺癌MCF-7细胞中,CCK-8法比较细胞增殖能力的改变,体外迁移实验比较细胞运动能力的改变,基质胶粘附实验比较细胞粘附率的变化。结果:MK表达下调后,MCF-7细胞的增殖能力明显降低(P<0.05),体外迁移能力显著降低(P<0.05),siRNA细胞对基质胶的粘附率明显降低(P<0.05)。结论:MK基因表达下调能降低乳腺癌细胞迁移运动和降低细胞对基质胶的粘附率,并降低肿瘤细胞的增殖,提示MK在乳腺癌恶性进展中起重要作用。 展开更多
关键词 中期因子 MCF-7细胞 细胞迁移 细胞粘附 细胞增殖
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利用CRISPR/Cas9基因编辑技术治疗β-地中海贫血的最新进展 被引量:1
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作者 解倩 雷双银 +4 位作者 曲超 吴昊 刘影茹 黄萍 滕曙智 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第21期2492-2508,共17页
β-地中海贫血是β-珠蛋白基因(HBB)点突变或缺失引起的单基因遗传病,患者产生溶血性贫血,其生存主要依赖于反复输血及去铁治疗,最终导致多器官受损、衰竭,给个人、家庭和国家带来严重的经济负担.随着基因编辑技术的蓬勃发展,可能治愈... β-地中海贫血是β-珠蛋白基因(HBB)点突变或缺失引起的单基因遗传病,患者产生溶血性贫血,其生存主要依赖于反复输血及去铁治疗,最终导致多器官受损、衰竭,给个人、家庭和国家带来严重的经济负担.随着基因编辑技术的蓬勃发展,可能治愈基因突变性疾病的基因治疗应运而生,其中CRISPR/Cas9基因编辑技术凭其靶向特异性、经济性等优势备受关注,并已广泛应用于分子生物学以及生命科学领域的研究.如今CRISPR/Cas9基因编辑技术修复人多能干细胞HBB基因、诱导胎儿血红蛋白(HbF)合成或抑制α-珠蛋白基因(HBA基因)表达是治愈β-地中海贫血的三大可行性策略,相关临床试验已相继开展.本文就CRISPR/Cas9系统的研究进展、作用机制以及在治疗β-地中海贫血的最新研究与应用进行综述,涉及细胞实验、动物模型、临床试验等内容,并介绍了CRISPR/Cas9系统衍生的新型基因编辑工具碱基编辑器在该领域的研究应用,为促进β-地中海贫血从基础研究转向临床治疗提供新的思路和方向. 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 Β-地中海贫血 HBB 基因治疗 基因编辑
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