口腔鳞癌癌细胞和癌相关成纤维细胞的原代培养、鉴定及其生物学特性研究

目的:对口腔鳞状细胞癌细胞(OSCCs)及癌相关成纤维细胞(CAFs)进行培养、纯化和鉴定,初步探讨其生物学特性。方法:取自临床手术的新鲜标本,通过抗污染处理,应用机械分离法和胶原酶Ⅳ消化法获得OSCC及CAFs,0.25%胰蛋白酶消化反复贴壁差数培养法分离、纯化细胞,正常口腔成纤维细胞(NFs)和舌鳞癌细胞系Tca8113作为对照组。通过形态学观察、波形蛋白和角蛋白免疫组化染色对纯化的细胞进行鉴定。应用MTT法绘出OSCCs、CAFs、NFs和Tca8113细胞的生长曲线。结果:获得纯化的OSCCs和CAFs,通过对比研究阐明OS-CC和CAFs的生物学特点;OSCCs中免疫组化染色角蛋白呈阳性、波形蛋白呈阴性,CAFs中角蛋白呈阴性、波形蛋白呈阳性。结论:通过本实验研究成功获得纯化的OSCCs和CAFs,对比研究发现CAFs和NFs在形态结构、生长特点等方面不同。

STAT3、EGF和EGFR在口腔鳞癌中的表达及其意义

目的:探讨口腔鳞癌组织中STAT3、EGF及EGFR的表达情况及意义。方法:应用免疫组化SP法检测60例正常口腔黏膜组织、30例不典型增生组织及60例口腔鳞癌组织中STAT3、EGF及EGFR蛋白的表达。结果:口腔鳞癌癌变过程中STAT3蛋白表达在正常黏膜组织、不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为13.3%(8/60)、30.0%(9/30)、71.2%(43/60)组间比较差异有统计学意义(P<0.05);而EGF蛋白在正常口腔黏膜组织、不典型增生组织及口腔鳞癌组织中的表达率分别为25.0%(15/60)、46.7%(14/30)、76.7%(46/60),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);EGFR在正常黏膜组织、不典型增生组织及癌组织中的表达率分别为15.0%(9/60)、36.7%(11/30)、70.0%(42/60),组间比较差异有统计学意义(P<0.05),三者呈正相关关系。口腔鳞癌组织中STAT3蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);结论:STAT3、EGF及EG-FR在口腔鳞癌的浸润、转移及粘膜上皮癌变过程中起着重要作用,提示联合检测STAT3、EGF及EGFR可望成为口腔鳞癌早期诊断和判断预后的客观指标之一。

Ezrin蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究Ezrin蛋白在口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达,探讨其在OSCC病变中的作用及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法S-P法检测52例OSCC及30例正常的舌黏膜组织中Ezrin蛋白的表达,数据采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验。结果:Ezrin蛋白在高分化组阳性表达率为43.75%、中分化组阳性表达率为71.43%、低分化组阳性表达率为86.67%,三者之间对比有显著性差异(P<0.05),与正常对照组有显著性差异(P<0.01);在临床分期为早期(Ⅰ级+Ⅱ级)组中阳性表达率为44.44%,晚期(Ⅲ级+Ⅳ级)组中阳性表达率为79.41%,二者之间存在显著性差异(P<0.05)。结论:Ezrin蛋白的表达与OSCC发生和发展关系密切,检测该指标有助于判断OSCC的病理分级、临床分期和预后的关系。

Bag-1蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:检测Bag-1蛋白在口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达,探讨其在不同分化的OSCC中表达的差异及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法S-P法检测52例OSCC及20例正常的舌黏膜组织中Bag-1蛋白的表达,数据采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验。结果:Bag-1蛋白在病理分级的高分化组阳性表达率为50.00%、中分化组阳性表达率为76.19%、低分化组阳性表达率为93.33%,三者之间对比有显著性差异(P<0.05),与正常对照组有显著性差异(P<0.01);在临床分期为早期(Ⅰ级+Ⅱ级)组中阳性表达率为55.55%,晚期(Ⅲ级+Ⅳ级)组中阳性表达率为82.35%,二者之间存在显著性差异(P<0.05)。结论:Bag-1蛋白的表达与OSCC的病理分级和临床发展关系密切,并且检测该指标有助于OSCC的早期诊断。

STAT3 mRNA、EGF mRNA和EGFR mRNA在口腔鳞癌组织中的表达及意义

目的:探讨STAT3 mRNA、EGF mRNA和EGFR mRNA在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用原位杂交法检测60例口腔鳞癌患者的癌组织、30例不典型增生组织及60例正常口腔黏膜组织中STAT3 mRNA、EGF mRNA和EGFRmRNA的表达,并结合病理分级、有无淋巴结转移等临床指标进行统计学分析。结果:在口腔鳞癌癌变过程中STAT3、EGF和EGFRmRNA的表达在正常口腔黏膜组织、不典型增生组织及癌组织中的表达率均依次增高,分别为25.0%(15/60)、40.0%(12/30)、68.3%(41/60)和33.3%(20/60)、43.3%(13/30)、80.0%(48/60)及18.3%(11/60)、46.7%(14/30)、75.0%(45/60),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。在口腔鳞癌组织中STAT3表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);EGF表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);EGFR表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05)。口腔鳞癌中STAT3、EGF和EGFR mRNA的表达具有相关性。结论:STAT3、EGF和EGFR mRNA可能在口腔癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,STAT3、EGF和EGFR mRNA的联合检测可望成为口腔鳞癌早期诊断和判断预后的客观指标之一。

T-1型脱细胞异体组织补片修复缺损口腔黏膜的护理

目的:探讨异体移植手术的术前、术后护理措施。方法:对26例异体移植患者进行术前心理护理密切观察术后异体移植区的情况及不良反应。结果:本组病例术前焦虑、恐惧心理减轻,接受脱细胞异体组织补片修复缺损口腔黏膜,术后无出血、无感染,成功率100%。结论:科学的护理是脱细胞异体组织补片修复缺损口腔黏膜成功的重要保证。

IGF-1R与IGFBP-3在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:检测IGF-1R与IGFBP-3在口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达,探讨其在OSCC病变中的作用及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法(SP法)检测66例OSCC、20例癌旁组织及50例正常的口腔黏膜组织中IGF-1R与IGFBP-3的表达,数据采用SPSS19.0统计软件进行。结果:IGF-1R与IGFBP-3在OSCC组织、癌旁组织及正常组织中的阳性表达率均依次减低,均有显著性差异(P<0.05)。两种蛋白在OSCC中表达呈负相关(P<0.05)。结论:IGF-1R与IGFBP-3的表达与OSCC的病理分级和临床发展关系密切。

长链非编码RNAs在口腔鳞癌中的研究进展

口腔鳞癌是口腔常见的恶性肿瘤。它具有浸润性生长,区域或远处淋巴转移和预后差的生物学特征。近年来,越来越多的研究发现长链非编码RNAs(Long non-coding RNAs,Lnc RNAs)在口腔鳞癌中异常表达并调节其生物学行为。本文就长链非编码RNAs在口腔鳞癌中的研究进展做一综述。

下颌骨骨折愈合过程中血管内皮生长因子及其受体的表达

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt1在下颌骨骨折愈合中的表达规律。方法采用新西兰大耳白兔25只,随机分为术后48h和1、3、5、8周5个时相组,每组5只,以健侧为对照,制作左侧下颌骨体部骨折模型,利用原位杂交、免疫组织化学方法检测VEGF及其受体Flt1在骨折端的表达情况。结果在伤后48h^8周VEGF mRNA及VEGF在骨折部位被多种细胞表达,其表达强度随时间变化而变化,以1~3周为表达的高峰期。在伤后48h^8周的骨折端不同细胞内检测到VEGF的受体Flt1,1~3周为表达高峰期。结论VEGF及其Flt1受体表达贯穿于骨折愈合的始终,VEGF可能在骨折愈合过程中起重要作用。

颞下颌关节急性前脱位手法复位治疗的体会

应用口内法对80余例颞下颌关节急性前脱位进行了复位治疗和力学分析,根据牙列情况将颞下颌关节急性前脱位分成3种类型,各种脱位类型复位时使用了不同的手法,但均应用了杠杆原理。与常规复位手法比较,本文的改进方法明显缩短了手法复位的时间,提高了复位成功率。

血管内皮细胞生长因子在口底癌组织中的表达及作用的临床研究

目的 研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在老年口底癌组织中的地位及作用 ,探讨老年口底癌的发病机制、临床分期和病理分级及 VEGF网络相关情况。方法 采用免疫组织化学 S- P法检测 40例口底癌组织、39例癌旁组织、1 0例正常口底粘膜组织并观察 VEGF表达水平的动态变化。结果 VEGF表达水平明显高于健康对照组 (均为 P<0 .0 1 )。随着病理分级和临床分期的增高 ,VEGF的阳性表达率和表达强度均增高 ,呈正相关。结论 VEGF是口底癌中机体病理生理改变的重要血管生成因子 ,其过度表达在口底癌的发生发展。

人骨形成蛋白-2基因的克隆及其重组腺病毒载体的构建

目的:克隆人骨形成蛋白-2(BMP-2)基因cDNA,构建含BMP-2基因的重组腺病毒载体。方法:采用RT-PCR方法克隆BMP-2基因cDNA,并插入克隆载体pGEM-T中进行全序列分析。将BMP-2基因cDNA克隆到穿梭载体pShuttle-CMV中,构建pShuttle-BMP2重组质粒,再将其中的表达盒克隆入Adeno-X腺病毒DNA中,获得重组腺病毒DNA-pAd-BMP。结果:成功地克隆长约1200 bp的BMP-2 cDNA,并成功地构建其腺病毒载体,经线性化的pAd-BMP2 DNA转染HEK293细胞,包装、扩增后得到人骨形成蛋白-2重组腺病毒,其滴度约为1×1011nfu.L-1,该滴度可满足进一步的BMP-2成骨作用的研究。结论:成功地构建BMP-2腺病毒载体。

羟基磷灰石与骨髓基质细胞自体皮下成骨实验

目的 :观察rhBMP2 /TGF - β对羟基磷灰石与骨髓基质细胞在自体皮下成骨能力的影响。 方法 :应用矿化条件培养液体外培养成年新西兰兔的骨髓基质细胞 ,收集细胞并以 5× 10 6/mL浓度分成 4组 ,A组加入rhBMP2(10 μg) /TGF - β(2 0ng) ,B组加入rhBMP2 (10 μg) ,C组不加生长因子作为对照 ,然后将细胞接种在羟基磷灰石上 ,体外培养 3d ,D组细胞不接种材料上 ,继续体外培养。组织化学方法检测检测磷酸酶 ,扫描电镜观察细胞在材料上的附着情况。将复合物埋植于新西兰兔自体皮下。 4周后常规HE染色、免疫组织化学染色并进行图像分析观察Ⅰ型胶原、骨形成蛋白合成情况。结果 :A、B组的碱性磷酸酶平均OD值显著高于C组 (P <0 .0 1)。细胞接种在材料 3d后 ,各组材料表面均见大量多边形的细胞附着。复合物植入皮下 4周时HE染色见各组均有条索状骨基质形成 ,A、B组Ⅰ型胶原平均灰度值明显低于C组 (P <0 .0 1=,各组骨形成蛋白的表达无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :羟基磷灰石与骨髓基质细胞在自体皮下能够形成骨组织 ,rhBMP2 /TGF - β较rhBMP2

SCC-9舌鳞癌肿瘤干细胞的分选和鉴定

目的:分离SCC-9细胞中CD44+的肿瘤细胞亚群,鉴定CD44+亚群细胞具有肿瘤干细胞的特性。方法:采用CD44免疫荧光抗体标记流式细胞术分选出CD44+的细胞亚群;检测各细胞亚群的细胞周期;检测CD133、Oct-4、BIM-1在CD44+和CD44-中的表达;检测各细胞亚群克隆形成率。结果:SCC-9细胞中CD44+的细胞亚群约占30%;CD44+的肿瘤细胞亚群70%处于G0/G1期;胚胎干细胞因子CD133、Oct-4、BIM-1在CD44+和CD44-的OSCCs中表达存在显著性差异(P<0.01);CD44+细胞亚群克隆形成率明显高于CD44-的细胞亚群。结论:在SCC-9舌鳞癌细胞系中CD44+细胞亚群具有肿瘤干细胞的特性。

颌后切口经腮腺前咬肌区入路治疗髁颈骨折

下颌骨易发生骨折的位置有髁突颈部、下颌角区、颏孔区和正中联合处．出现错位的骨折临床上一般采取手术切开复位固定的方法治疗^[1,2]。本组髁突颈部骨折的患者采取颌后切口经腮腺前咬肌区入路治疗骨折的办法，取得了良好的临床疗效，现报道如下。

兔下颌骨骨折对颞下颌关节影响的实验研究

目的观察下颌骨骨折对两侧颞下颌关节的影响,探讨损伤后颞下颌关节修复的机制。方法采用新西兰大耳白兔30只,随机分为术后48h和l、3、5、8周5个时相组及一个对照组,每组5只,用多功能打击装置造成各组动物左侧下颌骨骨折,夹板坚固内固定骨折断,按时项处死动物取左侧颞下颌关节。观察伤侧颞下颌关节的组织学变化,用免疲组化方法检测髁状突软膏内VEGF及其受体Fltl的表达。结果各时项标本均可见到颞下颌髁状交及关节盘不同程度的损伤,髁状突肥大细胞检测到VEGF及其受体FItl的表达。结论下领骨骨折可致颞下颌关节损伤,VEGF和其受体FItl可能参与颞下颌关节损伤的修复。