电离辐射对大鼠颌下腺钙离子激活型钾通道的影响

目的:通过研究电离辐射对大鼠颌下腺腺泡细胞膜上BK通道和IK通道开放的影响,探讨照射后唾液腺分泌功能降低的可能分子机制。方法:将大鼠随机分为对照组和照射组,对照射组大鼠的颌下腺区一次性15Gy X线照射,对照组不照射。分别在照射后3d、15d和40d取出大鼠颌下腺,胶原蛋白酶消化,从每只大鼠颌下腺消化液中挑选1个状态好的细胞,全细胞膜片钳技术研究大鼠颌下腺腺泡细胞膜上BK和IK1通道电流的变化。结果:1)在+80mV时,相比对照组大鼠颌下腺腺泡细胞膜上BK通道电流密度,照射后3d没有显著性差异,照射后15d减少9.7%(P<0.05),照射后40d减少13.8%(P<0.01)。2)在+80mV时,相比对照组大鼠颌下腺腺泡细胞膜上IK1通道电流密度,照射后3d没有显著性差异,照射后15d减少12.8%(P<0.05),照射后40d减少17.1%(P<0.01)。结论:电离辐射所致的大鼠唾液腺分泌功能减退可能与辐射后大鼠颌下腺腺泡细胞膜上BK和IK1通道开放电流减少导致的K+外流减少有关。

ALK2对小鼠髁突软骨细胞增殖分化的影响

目的:探讨ALK2对小鼠髁突软骨细胞增殖及成软骨分化的作用。方法:采用酶消化法提取小鼠髁突软骨细胞并鉴定。体外采用siRNA沉默小鼠髁突软骨细胞中Alk2基因的表达,通过MTT法检测细胞增殖。通过实时定量RT-PCR方法检测软骨细胞标志基因的表达。结果:倒置显微镜观察体外培养的小鼠髁突软骨细胞形态。免疫组化染色显示COLⅠ强阳性,AGGRECAN弱阳性,COLⅡ弱阳性。Pellet培养后实时定量RT-PCR检测发现ColⅡ,ColⅩ和ColⅠ表达上调。证实所分离的细胞是髁突软骨细胞。MTT结果显示Alk2沉默后细胞数量增加,实时定量RT-PCR结果显示Alk2沉默后软骨细胞基因表达下调,并有显著统计学意义。结论:ALK2抑制小鼠髁突软骨细胞的增殖,促进小鼠髁突软骨细胞的成软骨分化。