基础医学机能实验操作技能培养的教学改革与探讨

医学机能实验是医学基础阶段培养医学生各种能力的核心课程,是以生理学、药理学和病理生理学三门课程的实验为基础,将多学科实验方法技术交叉融合到一起的综合性基础医学实验课程体系,是培养医学生基本实践技能、临床思维模式和巩固理论知识的关键。学生通过医学机能实验认识到生命活动的基本规律.

小动物麻醉机在大鼠应激性胃溃疡实验中的应用

目的 探讨小动物麻醉机对大鼠应激性胃溃疡模型制备的影响。方法 使用小动物麻醉机并采用异氟烷替代乙醚进行吸入性麻醉;同时,在保留原有应激实验中溃疡指数观察的指标基础上,将模型组分为造模后1 h、2 h组,采用腹主动脉取血替代下腔静脉取血,并用ELISA法测定血清中去甲肾上腺素(NE)和皮质酮(CORT)含量,比较各组大鼠胃组织溃疡情况。结果 与空白对照组比较,模型组造模后1 h、2 h组大鼠的溃疡指数明显升高(P<0.01);模型组造模后2 h组大鼠的NE和CORT含量明显升高(P<0.01)。与模型组造模后1 h组相比,造模后2 h组大鼠的溃疡指数、NE和CORT含量均有不同程度明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论 借助小动物麻醉机,通过倒置法和冷贮法成功制备了大鼠应激性胃溃疡模型。改进后的麻醉方法符合动物实验的“3R”原则,避免乙醚带来的实验室安全隐患,麻醉效果好。

珍宝丸预处理对新生大鼠缺氧性脑损伤Fas和Fas L影响的实验研究

目的:探讨珍宝丸预处理对新生大鼠缺氧性脑损伤Fas和Fas L蛋白表达的影响。方法:取新生7 d Wistar大鼠200只,雌雄不限,随机分成5组(n=40):正常对照组、模型缺氧1 h组(Ⅰm-12 h、Ⅰm-24 h、Ⅰm-48 h、Ⅰm-72 h)、模型缺氧4h组(Ⅳm-12 h、Ⅳm-24 h、Ⅳm-48 h、Ⅳm-72 h)、珍宝丸缺氧1 h治疗组(ⅠT-14 h、ⅠT-24 h、ⅠT-48 h、ⅠT-72 h)、珍宝丸缺氧4 h治疗组(ⅣT-14 h、ⅣT-24 h、ⅣT-48 h、ⅣT-72 h)。将新生Wistar大鼠置于8%O2+92%N2(V/V)的缺氧箱内建立新生鼠缺氧模型。在造模前每日一次连续7 d灌胃给予生理盐水和珍宝丸,缺氧期间也同样剂量给药,分别于缺氧后12、24、48、72 h处死动物取血及脑组织待测。采用ELISA法检测大鼠血清及脑组织悬液中Fas和Fas L的蛋白含量;采用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织中Fas和Fas L蛋白的阳性表达。结果:与正常对照组比较,其他四组Fas和Fas L蛋白含量、蛋白的阳性表达均在缺氧后12 h时间点明显增高,且在24 h时间点达高峰,有统计学意义(P<0.01),模型组在各时间点上明显高于治疗组;模型组在48、72 h时间点Fas和Fas L表达低于12 h时间点,但仍明显高于正常对照组(P<0.01);珍宝丸治疗组在48、72 h时间点Fas和Fas L表达低于12 h时间点,但仍高于正常对照组(P<0.05)。结论:珍宝丸可通过下调缺氧性脑损伤大鼠Fas和Fas L的蛋白含量、蛋白的阳性表达强度,从而对缺氧性脑损伤具有一定的保护作用。

山楂叶总黄酮对实验性心肌梗死犬的保护作用

目的:探讨山楂叶总黄酮对实验性心肌梗死犬的保护作用。方法:36只健康杂种犬,随机分为假手术组、模型组(给予相同体积的生理盐水)、复方丹参注射液组(1.65g·kg^(-1))和山楂叶总黄酮低、中、高剂量组(5、10和20mg·kg^(-1)),每组6只,静脉滴注给药。采用麻醉后结扎犬冠状动脉前降支方法建立急性心肌梗死模型。于给药后30、60、90、120、180、240、300和360min记录各组犬心外膜电图,检测血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)水平,计算ST段升高总和(∑ST)及心肌梗死范围(MIS)。结果:与假手术组比较,模型组犬血清中AST、CPK、LDH和MDA水平升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),全心重百分比、心室重百分比及∑ST升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,山楂叶总黄酮中、高剂量组犬血清中AST、CPK、LDH和MDA水平降低(P<0.05或P<0.01),SOD活性升高(P<0.05或P<0.01),∑ST降低(P<0.05或P<0.01),山楂叶总黄酮低、中、高剂量组犬的全心重百分比和心室重百分比均降低(P<0.05或P<0.01)。结论:山楂叶总黄酮对实验性心肌梗死犬具有保护作用。

视频和微视频在药理学实验教学中的应用

随着高等学校对大学生实践操作技能和实验素养培养的重视,要求授课教师开展多元化教学方式以适应需求。在药理学实验教学中引入视频和微视频,采用“讲授+视频或微视频+操作”的教学模式,优化教学过程,有助于提高实验课教学质量,在兴趣驱动下能快速掌握实验技能,培养学生自主学习能力。

同伴互助学习模式在本科医学教育中的应用前景

同伴互助学习模式(PAL)具有悠久的传统,已在大多数医学院校的课程中实施。越来越多的部门和研究机构将PAL作为日常教学的一部分,本文探讨了关于PAL的特征和决定因素以及潜在学习理论和发展的概述。比较其优势和劣势,并总结了PAL如何应用于未来教学以及需要进一步研究的思路。

硝酸镧对2型糖尿病大鼠胰腺INSR、IRS1和细胞凋亡影响的实验研究

目的:观察低剂量硝酸镧对2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素受体(INSR)、胰岛素受体底物1(IRS1)和细胞凋亡的影响。方法:将50只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组(10只)和造模组(40只),并分别给予常规饲料和高脂高糖饲料喂养。8周后,造模组的大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30 mg/kg)以诱导2型糖尿病模型,造模成功后将实验动物分为3组即对照组、糖尿病模型组和硝酸镧治疗组,3组大鼠分别每日给予生理盐水、生理盐水、硝酸镧(0.2 mg/kg)灌胃1个月,然后处死取血液和胰腺。采用放射免疫法检测大鼠血中血糖、胰岛素的水平;酶联免疫法检测大鼠血清中INSR、IRS1的蛋白含量;免疫组织化学法检测大鼠胰腺组织中INSR和IRS1的蛋白阳性表达水平;TUNEL凋亡试剂盒检测胰腺组织细胞凋亡的百分率;HE染色光镜下观察胰腺的病理改变。结果:与正常对照组比较,糖尿病模型组大鼠血中血糖及胰腺组织中细胞凋亡率明显升高、血中胰岛素、INSR和IRS1的蛋白含量及胰腺组织中INSR和IRS1的蛋白阳性表达水平明显降低差异有统计学意义(P<0.01);硝酸镧治疗组大鼠血中血糖及胰腺组织中细胞凋亡率略升高、血中胰岛素、INSR和IRS1的蛋白含量及胰腺组织中INSR和IRS1的蛋白阳性表达水平略降低差异有统计学意义(P<0.05);光镜下可见对照组大鼠胰腺组织排列紧密、饱满、胰岛体积大,糖尿病模型组大鼠胰腺组织排列较为疏散、胰岛体积较小,硝酸镧组大鼠胰腺组织基本紧密、饱满、胰岛体积略小。结论:口服硝酸镧可通过下调糖尿病大鼠血糖水平、抑制胰腺组织的细胞凋亡,上调胰腺组织INSR和IRS1的水平及胰岛素水平,对糖尿病大鼠胰腺组织有一定的保护作用。

医学生创新训练与创新能力培养模式探索

导师制下大学生创新训练项目的全面实施,有助于推进以教师为主导、学生为主体的创新教学模式改革,培养具有创新能力的卓越医学人才。医学生通过选题、设计、实施及结果分析的实践过程,培养医学生创新意识和实践能力,激发他们对科研的兴趣。以指导国家级医学生创新训练项目为契机,探索以教师科研项目为依托、以学生自主设计完成实验为基础、以阶段性检查为监督机制,采用过程与结果相结合方式进行总体效果评价的培养模式。

2%过氧乙酸吸入毒性实验

目的观察2%含量的过氧乙酸溶液气溶胶喷雾,对实验动物和工作人员产生的毒性作用。方法利用隔离器,观察2%含量的过氧乙酸溶液喷雾消毒,达到1 g/m3浓度,维持4 h,通过行为学测试和病理学解剖结果,判定大鼠吸入后,所产生的毒性作用。结果2%过氧乙酸溶液喷雾消毒后,在4 h～7 d间大鼠出现行为活动异常。结论2%过氧乙酸溶液喷雾消毒,浓度为1 g/m3时,对动物有毒性作用。

臭氧消毒方法在实验动物屏障环境运行中的应用

目的研究正确使用臭氧对实验动物屏障环境进行消毒的方法和浓度,达到既保证消毒效果、又保证屏障环境内实验动物及工作人员安全的目的。方法控制2个臭氧浓度在0.32 mg/m3和0.21 mg/m3的屏障环境,进行消毒效果对比实验;选用清洁级ICR小鼠进行正常的生产繁殖,观察不同浓度的臭氧消毒对小鼠产仔率、肺功能的影响,以及对空气中氨气浓度的影响。结果臭氧浓度为0.21 mg/m3和0.32 mg/m3时都达到了灭菌效果;臭氧浓度为0.32 mg/m3时动物的死胎率、肺部病变例数与对照组和臭氧浓度为0.21 mg/m3组有显著差异,氨气浓度下降85%;臭氧浓度为0.21 mg/m3时动物的死胎率、肺部病变例数与对照组没有显著差异,氨气浓度下降75%。结论实验动物屏障环境动态运行时,臭氧消毒最适合的剂量为0.21 mg/m3。

实验动物屏障环境常用消毒药品皮肤刺激实验

目的观察2%含量的过氧乙酸、0.2%含量的过氧乙酸、0.2%含量的次氯酸钠和2%含量的戊二醛溶液,对实验动物和工作人员皮肤是否有刺激性。方法2%含量的过氧乙酸、0.2%含量的过氧乙酸、0.2%含量的次氯酸钠和2%含量的戊二醛溶液短期接触豚鼠皮肤(斑贴)后,在规定的时间内,通过采用评分的方法来判定对豚鼠皮肤所产生的刺激反应。结果2%含量的戊二醛溶液对皮肤有轻微刺激,有水肿现象发生,1h后症状消失,并有棕黄色着色性,其他几种消毒药品均对豚鼠皮肤无刺激性反应。结论2%含量的戊二醛溶液对实验动物和工作人员皮肤有轻微刺激,并有棕黄色着色性。

大鼠无创伤气管插管心肌缺血再灌注损伤实验的探索与实践

在急性心肌缺血再灌注实验中,自制大鼠无创伤气管插管,避免颈部手术和有创伤气管插管对大鼠的损伤,简化手术步骤,降低手术难度,提高实验成功率和动物存活率。改进染色心肌拍照方法,提高照片清晰度和准确度;应用BI-2000图像分析系统测量心肌梗死面积,保证实验结果准确性和可靠性。通过改进和完善实验操作方法,为相关实验教学和科学研究的顺利开展奠定基础。

开放性创新实验项目在生理学实验教学中的应用

开放性创新实验作为一种新型实验教学模式,在新时代高校素质教育大力推进创新实践能力培养大背景下应运而生。吉林大学自2013年开始在全校范围内开展开放性创新实验项目取得一定成果。生理学本来就是一门实验科学,其实验教学的重要性不言而喻,它对学生动手能力、科研思维能力以及创新能力的培养都起着至关重要的作用。借助开放性创新实验项目与生理学实验教学相结合的教学模式,有利于提高医学生的主观能动性,培养学生创新能力和严谨的科研态度,对提高医学本科学生的综合素质具有积极作用。同时也补充了生理学实验项目的内容,将教师的科研能力与教学结合起来,在本科生教学中充分发挥教师的科研优势作用。

2%含量的过氧乙酸吸入刺激实验

目的观察2%含量的过氧乙酸溶液喷雾消毒时,对工作人员和实验动物的刺激性。方法利用隔离器,观察2%含量的过氧乙酸溶液喷雾消毒,达到1 g/m3浓度,维持30 min,观察对大鼠肺脏的损伤。结果利用2%含量的过氧乙酸对大鼠进行吸入性实验,致使大鼠肺部均出现不同程度的组织病理变化。结论2%过氧乙酸溶液在对运行中的实验动物屏障环境进行喷雾消毒,对实验动物及工作人员呼吸系统有刺激性损伤。

2%含量的过乙酸眼刺激实验

目的观察2%含量的过乙酸溶液,对实验动物和工作人员眼睛是否有刺激性。方法2%含量的过乙酸溶液,在规定的时间内,通过采用评分的方法来判定对实验兔眼睛的刺激性反应。结果2%含量的过乙酸给药6 h后,对虹膜、结膜(充血)均有刺激性并伴有水肿和分泌物,24 h后刺激性加重,7 d后刺激性较重。结论2%含量的过乙酸对实验动物和工作人员的视觉器官有强度刺激性。

实验动物屏障环境常用消毒药品皮肤毒性实验

目的观察动物破损皮肤短期内接触消毒药品所产生的毒性反应。方法利用2%戊二醛、0.2%过氧乙酸、2%过氧乙酸、0.2%次氯酸钠对豚鼠进行人为皮肤破损毒性实验,观察豚鼠全身中毒表现和死亡情况。结果2%戊二醛给药后出现红肿、出血点,4 d后出现脱皮现象,5 d红肿消失,并伴有棕黄色着色性;2%过乙酸给药后出现轻度水肿,3 d后症状消失;0.2%过乙酸和0.2%次氯酸钠均未出现毒性反应。结论2%戊二醛、2%过乙酸对动物和工作人员有毒性作用。

碘化钾与酚/氯仿提取外周血基因组DNA方法的比较

目的建立碘化钾快速提取外周血基因组DNA的方法。方法采用碘化钾法和酚/氯仿提取法,直接从人外周血中提取基因组DNA,并以此为模板,进行人类生长激素(HGH)基因片段的扩增及鉴定。结果此方法提取的DNA量大,DNA体外扩增结果稳定。结论该方法较传统酚/氯仿提取基因组DNA法快速、简便、经济,可用于PCR模板DNA的制备。

再生障碍性贫血患者外周血和骨髓中IL-17、IL-23及TGF-β表达水平及其临床意义

目的:探讨再生障碍性贫血(AA)患者外周血和骨髓中白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素23(IL-23)及转化生长因子β(TGF-β)的表达水平及其临床意义,阐明AA的发病机制。方法:随机选取50例AA患者作为实验组,30例同期体检健康人作为对照组;采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR法检测外周血、骨髓中IL-17、IL-23、TGF-β蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组比较,实验组患者外周血、骨髓中IL-17和IL-23蛋白及mRNA表达水平明显升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以IL-17升高最为显著(P<0.001);实验组患者外周血和骨髓中TGF-β蛋白及mRNA表达水平明显降低,组间比较差异亦有统计学意义(P<0.01)。实验组患者外周血和骨髓中IL-17与IL-23蛋白表达水平均呈正相关关系(r=0.69,P<0.05;r=0.71,P<0.05),IL-17与TGF-β蛋白表达水平呈负相关关系(r=-0.65,P<0.05),IL-23与TGF-β蛋白表达水平呈负相关关系(r=-0.72,P<0.05)。结论:IL-17、IL-23和TGF-β可能直接参与AA的发生发展过程,三者的联合检测可为AA患者的临床治疗提供新的思路。

葛根素对糖尿病大鼠视网膜中IGF-1和TNF-α表达的影响

目的探讨不同剂量葛根素对糖尿病大鼠视网膜中IGF-1和TNF-α表达的影响。方法将90只健康清洁级Wistar雄性大鼠随机分为5组,分别为对照组(10只)、糖尿病模型组(20只)、葛根素2mg/kg给药组(A组,n=20只)、葛根素5mg/kg给药组(B组,n=20只)和葛根素10mg/kg给药组(C组,n=20只)。除对照组外,其它4组均腹腔注射50mg/kg链脲佐菌素制备糖尿病模型;给药方式均采用每日上午灌胃1次,3个月后处死,取各组大鼠眼球视网膜。采用HE染色检测大鼠视网膜的病理改变;采用免疫组织化学方法检测大鼠视网膜组织中IGF-1、TNF-α的蛋白阳性表达强度。结果与对照组相比较,糖尿病组和A组IGF-1蛋白的阳性表达强度均明显降低、TNF-α蛋白的阳性表达强度均明显升高,差异显著有统计学意义(P<0.01);B组IGF-1蛋白的阳性表达强度降低、TNF-α蛋白的阳性表达强度升高,差异亦有统计学意义(P<0.05);C组IGF-1、TNF-α蛋白的阳性表达强度略降低及略升高,差异无统计学意义(P>0.05)。与糖尿病组比较,A组差异无统计学意义(P>0.05);B组、C组差异均有统计学意义(P<0.01)。结论葛根素能够通过提高IGF-1的表达及降低TNF-α的表达,从而起到保护视网膜的功能。