医学留学生病理生理学教学方法改革初探

近年来越来越多的医学留学生选择来华求学。自2000年以来,医学留学生人数持续增长,在所有学科中排列第二位;医学留学生本科教育已经成为医学高等教育非常重要的组成部分,在提高学校综合实力和国际影响力方面发挥了巨大作用。吉林大学基础医学院自2005年以来开始招收国际留学生,这些留学生大部分来自于印度、尼泊尔,索马里等国家,对这些留学生授课采用英语授课,十多年来,取得了很好的效果,同时也总结了一些经验,为提高留学生授课水平,

实验仪器在医学机能实验教学中的有效应用

实验仪器是进行机能实验教学的基本条件，仪器设备的质量和功能是决定实验教学效果以及研究水平高低的重要因素，因此合理配置实验设备，充分发挥实验仪器的性能有助于提高实验教学效果。

bcl-2和bax基因在乳腺癌中的表达及其病理特征

目的 探讨ｂｃｌ－２和ｂａｘ基因在乳腺癌中的表达及其病理特征。方法 应用免疫组织化学方法检测５４例乳腺癌及３１例癌旁组织和８例良性乳腺病变组织标本的ｂｃｌ－２和ｂａｘ基因表达情况。结果ｂｃｌ－２蛋白在乳腺癌中的阳性表达率为５７．４％。ｂａｘ蛋白的阳性表达率为７９．６％。Ⅰ级乳腺癌的ｂｃｌ－２蛋白阳性表达率为７２．２％，Ⅱ级为６１．５％．Ⅲ级为３０％。ｂｃｌ－２蛋白各级别表达程度间无显著性差别（ｘ２＝５．８３９，ｖ＝４，Ｐ＝０．２４９６）。Ⅰ级乳腺癌的ｂａｘ蛋白阳性表达率为 １００％，Ⅱ级为 ８８．５％，Ⅲ级为 ２０％。ｂａｘ蛋白的表达程度间有显著性差异（ｘ２＝ ２７．８８９，ｖ＝４，Ｐ＜０．０００１）。ｂｃｌ－２蛋白在良性乳腺病变，癌旁组织和原位及浸润型乳腺癌４组病例中的表达阳性率之间有显著性差异（ｘ２＝２３．６９４，ｖ＝３，Ｐ＜０．０００１）；ｂａｘ蛋白在 ４组间的阳性表达率亦有差异性（ｘ２＝１０．７７２，ｖ＝３，Ｐ＝０．０１３）。结论 ｂｃｌ－２和 ｂａｘ基因在乳腺癌的发生，发展过程中起着重要的作用，并与乳腺癌细胞凋亡的调节过程有关。

20(S)-人参皂苷Rg_3对Lewis肺癌生长及转移的抑制作用

目的观察20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)抗Lewis肺癌生长及转移的作用并探讨其作用机制。方法建立Lewis肺癌实体瘤模型及自发肺转移模型观察SPG-Rg3的抗肿瘤作用,并取Lewis肺癌C57BL/6荷瘤小鼠的脾脏,检测T淋巴细胞转化活性、NK细胞及IL-2活性。结果实体瘤实验中,3.0mg/kg和1.0mg/kg SPG-Rg3用药组瘤重明显低于溶剂对照组(P<0.05),0.3mg/kg组瘤重与溶剂对照组间无差异(P>0.05);SPG-Rg3用药组肺转移结节均明显少于溶剂对照组(P<0.05);SPG-Rg3用药组Lewis肺癌C57BL/6荷瘤小鼠的脾细胞对ConA和IL-2反应性以及NK活性均高于溶剂对照组(P<0.05)。结论SPG-Rg3可抑制Lewis肺癌生长及转移,可能是通过提高荷瘤小鼠的免疫功能来发挥其抑瘤作用。

高糖和缺氧对体外培养视网膜M üller细胞VEGF表达的影响

目的 :观察体外培养兔视网膜 Müller细胞在高糖和缺氧条件下血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的变化。方法 :采用免疫细胞化学、原位杂交和ELISA方法对高糖和缺氧条件下体外培养兔视网膜 Müller细胞 VEGF的表达进行定性定量测定。结果 :高糖能刺激 VEGF表达 ,且通过转录水平调节 ,这种调节呈时间和剂量依赖性。 Co Cl2 能造成 Müller细胞不完全缺氧 ,刺激 VEGF的分泌。结论 :Müller细胞在高糖、缺氧条件下 VEGF表达增强 ,VEGF表达水平的升高可能是高糖及缺氧条件下促进糖尿病视网膜病变的因素之一。

“失血加LPS”大鼠肺脏IκBα和TLR4基因表达及参麦的肺脏保护作用

目的:探讨参麦注射液的抗休克效果及其作用机制。方法:大鼠随机分为单纯失血性休克(HS)组、失血加脂多糖(HS+LPS)组、地塞米松(HS+LPS+Dex)组和参麦注射液(HS+LPS+SM)组。HS+LPS组大鼠模型复制:首先,大鼠放血至MAP40mmHg,维持10min(失血性休克),然后舌下静脉注射LPS(1·5mg/kg)。4h后留取肺脏组织,RT-PCR法测定IκBα和TLR4mRNA表达、ELISA法测TNF-α含量,并进行肺脏组织电镜观察。结果:HS+LPS+SM组TLR4mRNA表达明显低于HS+LPS组(P<0·05);HS+LPS+SM组IκBαmRNA表达明显高于HS+LPS组(P<0·05);HS+LPS+SM组肺脏组织匀浆TNF-α含量明显低于HS+LPS组(P<0·05);HS+LPS+SM组肺组织病理损伤显著轻于HS+LPS组。结论:参麦注射液能够下调肺脏组织中TLR4mRNA表达,同时上调IκBα的表达,进而抑制促炎介质TNF-α释放,提示参麦注射液可能通过调节NF-κB信号转导途径抑制炎症反应而对机体细胞起保护作用。

氟化物对成骨细胞OPGL mRNA和M-CSF mRNA表达的影响

目的 探讨氟对成骨细胞的骨保护蛋白配体 (OPGL)mRNA和巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)mR NA表达的影响。方法 应用酶消化法分离小鼠乳鼠成骨细胞 ,取第 3代成骨细胞 ,加入不同浓度的氟 6h ,提取细胞总RNA ,通过逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,观察成骨细胞分泌的OPGL和M CSF表达的变化。结果 在氟的作用下 ,成骨细胞的OPGLmRNA和M CSFmRNA的表达呈上升趋势 ,但未达到统计学差异水平。结论 氟有可能通过上调OPGL和M CSF的表达 。

胰岛素对体外培养的视网膜Müller细胞VEGF变化影响的研究

目的 :观察在不同浓度胰岛素条件下 ,体外培养的兔视网膜M櫣ｌｌｅｒ细胞的血管内皮生长因子 (vascu larendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的变化。方法 :采用免疫细胞化学法和ELISA方法 ,定性定量测定不同浓度胰岛素条件下体外培养的兔视网膜M櫣ｌｌｅｒ细胞ＶＥＧＦ的表达?峁?:胰岛素能明显增强VEGF的表达。结论 :高浓度胰岛素可增强M櫣ｌｌｅｒ细胞ＶＥＧＦ的表达 ,这种VEGF表达水平的升高可能是胰岛素促进糖尿病视网膜病变的因素之一。

在急性局灶性脑缺血早期VEGF、FLT-1、FLK-1 mRNA的表达及作用研究

目的 检测血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (FL T- 1、FL K- 1) m RNA在急性局灶性脑缺血中的表达 ,并探讨血管内皮生长因子在急性局灶性脑缺血中的作用。方法 建立 SD大鼠永久大脑中动脉闭塞(MCAO)模型 ,应用原位杂交技术检测血管内皮生长因子及其受体基因在局灶性脑缺血后不同时间点的表达。结果 原位杂交显示 VEGF及 FL T- 1、FL K- 1m RNA在局灶性脑缺血后 3 h即开始表达增强 ,VEGF m RNA和FL T- 1、FL K- 1m RNA于 48h达高峰 ,后 VEGF m RNA逐渐下降 ,至 14d恢复到对照水平。而 FL T- 1、FL K- 1m R-NA在达高峰后 ,下降更加缓慢 ,约在 2 1d时达对照水平。 VEGF m RNA主要在缺血半影区神经元表达 ,同时在胶质细胞和血管内皮细胞表达 ,而 FL T- 1、FL K- 1m RNA主要在缺血周边血管内皮细胞表达 ,但也在神经元表达。在缺血后 48h半影区周边出现血管增生 ,并逐渐向中心区延伸 ,于缺血后 7d达高峰 ,整个半影区可见明显血管增生。结论 急性局灶性脑缺血早期 VEGF m RNA及 FL T- 1、FL K - 1m RNA在神经细胞、胶质细胞、血管内皮细胞均有表达 ,可促进缺血半影区的血管增生 。

万古霉素对体外培养小鼠耳蜗毛细胞影响的实验研究

目的 :通过内耳器官离体培养技术来观察万古霉素对体外培养耳蜗毛细胞的影响 ,探讨万古霉素耳毒性。方法 :选用生后 2～ 4 d的昆明小鼠做为实验对象 ,应用鼠尾胶包埋法离体培养耳蜗基底膜 ,通过若单明 -鬼笔环太染色技术定量观察不同浓度的万古霉素对耳蜗毛细胞的影响。结果 :给予万古霉素后的离体耳蜗内、外毛细胞未发生坏死和缺失 ,毛细胞密度与正常对照组无差别。结论

高浓度胰岛素对视网膜Müller细胞VEGF表达的影响(英文)

目的:探讨在高浓度胰岛素条件下,体外培养的兔视网膜Müller细胞的血管内皮细胞生长因子(vas-cularendothelialgrowthfactor,VEGF)的变化。方法:在不同浓度胰岛素条件下(4,8,12kU/L),体外培养兔视网膜Müller细胞,采用免疫细胞化学法、原位杂交法,定性测定Müller细胞分泌VEGF的变化,采用ELISA方法,定量测定Müller细胞分泌VEGF的变化。结果:高浓度胰岛素能明显增强VEGF的表达(P< 0.05)。结论:高浓度胰岛素可能通过刺激Müller细胞编码VEGF基因的转录,进而增强VEGF蛋白的表达,而在糖尿病视网膜病变的新生血管生成中发挥重要作用。

ATRA联合IFN-α对PC-3细胞株的生长抑制作用以及对GRIM-19和STAT3基因表达的影响

目的:研究ATRA联合IFN-α对人激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞株的生长抑制作用及对凋亡相关基因GRIM-19和原癌基因STAT3表达的影响。方法:采用MTT比色法筛选ATRA和IFN-α联合应用的最佳时间和剂量;相差显微镜及吖啶橙染色观察其对PC-3细胞的促凋亡作用;DNA ladder提取试剂盒检测用药后细胞凋亡;RT-PCR方法观察用药后PC-3细胞GRIM-19 mRNA的表达;Western blot分别检测GRIM-19、STAT3的蛋白表达。结果:ATRA 1μmol/L联合IFN-α1 000 U/mL作用72 h对PC-3细胞有显著的增殖抑制作用,与溶媒对照组、ATRA或IFN-α单独应用组比较,差异显著(P<0.05)。形态学观察两药合用后PC-3细胞呈现典型的凋亡征象。DNA电泳图谱在ATRA和IFN-α两药合用组可见较AT-RA单独应用组更为明显的DNA ladder,IFN-α单独用药组及对照组没有出现DNA降解。RT-PCR结果表明,ATRA和IFN-α两药合用GRIM-19 mRNA表达增强,与对照组和ATRA、IFN-α组比较,差异显著(P<0.05)。Western blot结果显示,两药合用组GRIM-19蛋白表达增强,STAT3蛋白表达减弱,与对照组、ATRA、IFN-α组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:ATRA和IFN-α联合应用可抑制PC-3细胞的增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是通过上调GRIM-19基因表达,进而下调原癌基因STAT3表达实现的。

3'-Me-DAB诱导大鼠肝癌发生过程中p53及相关基因mRNA的定量分析

背景与目的:有关肝癌中p53基因突变及p53蛋白表达异常已有报道,但其在mRNA水平上的变化尚不清楚。为了解在肝癌发生、发展和预后过程中p53、谷胱甘肽转硫酶P(glutathioneS-transferaseP,GST-P)、甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)和白蛋白mRNA水平的变化,本研究定量分析癌前病变和癌灶中GST-P、AFP和白蛋白mRNA的量。方法:在3'-甲基-4-二甲胺偶氮苯(3'-methyl-4-dimethylaminoazobenzene,3'-Me-DAB)诱发F344大鼠肝癌过程中,用激光捕获显微取样仪(LCM)准确获得大鼠肝脏中微小癌灶或癌前病变组织后,采用LightCyclerTMV3System实时(real-time)RT-PCR定量分析这些病灶组织中mRNA水平。结果:在实验的第6、12和24周,癌前病变组织中p53mRNA量均显著高于正常组织(P≤0.001)。从第6周到第24周,癌前病变组织中p53mRNA逐渐降低(P<0.01)。癌组织中p53mRNA含量高于正常组织,低于同期癌前病变组织(P=0.028和0.0136)。第24周的癌前病变组织或癌组织中细胞核呈p53强染色。各实验期,癌前病变中GST-PmRNA量明显高于正常组织和癌组织(P<0.001)。癌组织中AFPmRNA的表达量显著高于癌前病变组织和正常组织(P<0.001),白蛋白mRNA的表达量显著低于这两种组织(P<0.01)。GST-P和AFP分别在癌前病变组织和癌组织中呈灶状强表达。结论:GST-

颈椎稳定性异常对老龄小鼠脑海马caspase-3表达的影响

目的:观察老龄小鼠颈部肌肉、韧带损伤对学习记忆、脑海马天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达的影响。方法:手术复制改变小鼠颈椎稳定性模型,用水迷宫法检测小鼠学习记忆能力;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法,观察脑海马caspase-3的表达。结果:与正常组比较,各模型组小鼠水迷宫实验中游全程时间延长、犯错误次数增加(P<0.05),且随周龄增加而越加显著;模型组小鼠脑海马caspase-3表达明显增强(P<0.05)。结论:颈椎稳定性的改变可促进老年小鼠脑细胞凋亡,导致其记忆功能明显减退。

人参二醇组皂苷改善内毒素诱导急性肾损伤小鼠肾功能的机制

目的探讨人参二醇组皂苷(PDS)对内毒素(LPS)诱导的急性肾损伤(AKI)小鼠肾功能的保护作用及机制。方法选择C57BL/6小鼠随机分成3组(n=8),分别为对照组(control,腹腔注射0.9%氯化钠),LPS组(腹腔注射LPS 10 mg/kg),PDS+LPS组(先腹腔注射PDS 25 mg/kg,1 h后注射LPS 10 mg/kg)。注射LPS 12 h后麻醉下处死小鼠,取肾脏组织冻存或固定,备蛋白表达与形态学观察用,并收集血液用于生化检测。利用免疫组化方法观察形态学变化。利用免疫印迹方法测定肾脏相关蛋白含量及表达情况。结果 LPS组小鼠肾组织凋亡严重,肝肾功能明显异常,而PDS+LPS组肾脏组织凋亡及肝肾功能损伤较LPS组轻(P<0.05)。LPS组一氧化氮合成酶(iNOS)蛋白表达水平和NO含量与对照组比较明显增加(P<0.05)。而PDS+LPS组iNOS蛋白表达水平和NO含量均显著低于LPS组(P<0.05)。LPS组肾脏丙二醛(MDA)含量与对照组比较明显增高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)含量和Mn-SOD的蛋白表达水平都明显低于对照组(P<0.01,P<0.05),而PDS+LPS组MDA含量较LPS组低(P<0.05),SOD含量和Mn-SOD的蛋白表达水平较LPS组高(P<0.05)。结论 PDS有逆转LPS诱导的AKI小鼠肾功能的作用,其保护作用机制为抑制肾脏iNOS表达,减少NO产生与释放,抑制MDA的产生和上调SOD的表达而起到抗氧化应激的作用。

ClC-3在人胶质瘤中的表达及分布

目的探讨ClC-3在人脑胶质瘤中的表达及其生物学意义。方法应用免疫组织化学染色技术检测24例人胶质瘤以及4例脑转移癌手术标本中ClC-3蛋白的表达;RT-PCR检测ClC-3蛋白表达阳性的手术标本中其mRNA表达。结果4例正常脑组织ClC-3蛋白的表达为阴性;而蛋白表达阳性的19例胶质瘤及4例脑转移癌中,ClC-3主要位于瘤细胞和微血管内皮细胞的胞浆或胞膜上。蛋白表达阳性的手术标本中16例胶质瘤和4例脑转移癌检测到ClC-3mRNA的表达。少突胶质细胞瘤Ⅲ级中ClC-3的mRNA和蛋白表达明显高于其Ⅱ级。结论ClC-3在人胶质瘤及脑转移癌组织中普遍表达,并且可能与少突胶质细胞瘤病理分级相关。

应用RNAi技术沉默STAT3基因对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的探讨应用RNAi技术沉默信号转导子与转录活化子3(STAT3)基因对乳腺癌MCF-7细胞的影响。方法应用RNAi技术,以psilencer1.0-U6-STAT3-siRNA重组质粒体外转染MCF-7细胞,采用MTT实验、流式细胞仪检测MCF-7转染前后细胞增殖、细胞周期和早期凋亡的变化,通过Western blotting及半定量RT-PCR检测STAT3基因不同水平的表达。结果MTT实验、流式细胞仪的结果显示,重组质粒转染组的MCF-7细胞的增殖明显受到抑制,且出现凋亡现象;Western blot-ting及半定量RT-PCR结果显示,重组质粒转染组细胞的STAT3基因表达在蛋白及RNA水平上都显著低于对照组(P<0.01),而空白对照组及空质粒组无明显差异(P>0.05)。结论应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低乳腺癌MCF-7细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。

生长激素和生长抑素对大鼠胰岛β细胞功能和糖代谢的影响

目的探讨生长激素(GH)和生长抑素(SS)对大鼠胰岛β细胞功能和糖代谢的影响。方法分组给大鼠连续15d皮下注射GH、SS,测定体内GH、胰岛素及血糖水平;镜下观察胰腺和胰岛β细胞形态。同时设立安慰剂对照组。结果GH组GH水平及血糖水平较正常对照组升高(P<0.05);SS组GH水平及β细胞分泌功能指数较正常对照组降低(P<0.05);胰岛素水平及胰岛素敏感性指数各组间差异无显著性(P>0.05);光镜下胰岛β细胞染色GH组较正常对照组加深,SS组和正常对照组着色较淡。结论GH可以诱导胰岛素抵抗(IR),SS可以改善IR。