164种中药乙醇提取物抗真菌作用研究

目的 体外观察 16 4种中药 95 %乙醇提取物对白色念珠菌、啤酒酵母和威克海姆原藻 3种真菌的作用 ,并对其中抑菌效果明显的中药中的主要成分进行抗真菌药敏试验。方法 半固体药基混合法 ,微量稀释法。结果 2 2种中药乙醇提取物对 1种或几种真菌显示较强的抑制作用 ,所试验的单体化合物对 3种真菌无显著抑制作用。结论 首次对中药 95 %乙醇提取物应用半固体药基混合法进行抗真菌活性筛选 ,土槿皮、牡丹皮 95 %乙醇粗提物对3种真菌均有较强的抑制作用。

组织工程化人工复合皮肤的构建

目的 为皮肤缺失的移植提供具有生物活性的表皮、真皮的组织工程化人工复合皮肤。方法 将体外传代培养的表皮角朊细胞和真皮成纤维细胞分别接种在经冷冻干燥及戊二醛交联的 I型胶原基质网架的两侧 ,在液面下培养 1周后 ,改为气 -液界面培养 ,动态观测人工皮肤光镜下组织学形态及电镜下超微结构。结果 人工复合皮肤具有表皮、真皮双层结构。培养过程中表皮逐步增殖、分化、发育 ,形成基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层 ;真皮基质网架渐渐降解 ,并逐步被增殖的成纤维细胞及其所分泌的细胞外基质所取代 ,完成真皮构建。结论 利用组织工程技术体外构建人工复合皮肤 ,可用于皮肤缺失者的自体移植治疗 ,体外构建的复合人工皮肤可从根本上解决自体供皮不足 ,且细胞源于自体皮肤 ,排除了发生免疫排斥反应和疾病传播的风险 ,具有安全、有效。

慢性氟中毒大鼠肾组织细胞凋亡的实验研究

目的 观察细胞凋亡在氟中毒肾脏损害发生机制中的作用。方法 经饮水投氟复制氟中毒模型。采用原位末端标记法 (TU NEL)测定了慢性氟中毒大鼠肾脏组织细胞凋亡的情况 ,应用全自动生化分析仪检测大鼠尿液乳酸脱氢酶 (L DH)、碱性磷酸酶 (AL P)、γ-谷胺酰转移酶 (γ- GT)、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 (NAG)的活性。结果 TUNEL 检测显示 ,在慢性氟中毒大鼠肾脏中 ,可见到明显的 NBT/ BCIP着染阳性的凋亡细胞 ,而且这种表达具有选择性 ,多出现在肾皮髓质交界处。氟中毒大鼠尿液 L DH、AL P、γ- GT、NAG的活性变化不明显。投氟组与对照组比较无明显差异。结论 在慢性氟中毒大鼠肾脏细胞凋亡明显 ,凋亡发生部位与病理改变明显的部位吻合 。

糖基化终产物形成抑制剂研究的进展

介绍几种治疗糖尿病慢性并发症的糖基化终产物形成抑制剂 ,简述了它们的作用机制。

石蜡包埋组织切片原位核酸杂交研究

目的 :探讨石蜡包埋组织切片的原位核酸杂交方法 ,以检测克山病 ( KSD)尸检心肌中的RNA。方法 :应用生物素标记的人工合成寡核苷酸探针 ,对 72例心肌石蜡包埋组织切片进行原位核酸杂交。结果 :各型克山病心肌石蜡组织切片的阳性杂交信号为 80 %～ 87.9% ,而正常对照仅为 14.3%。结论 :应用人工合成寡核苷酸之原位核酸杂交技术 ,对长期保存的石蜡组织进行回顾性研究是可行的。

胰腺癌 P53蛋白的表达与肿瘤生物学行为及预后的关系

目的 :探讨胰腺癌组织 P5 3蛋白的过度表达与肿瘤生物学行为及预后的关系。方法 :应用单克隆抗 P5 3抗体对 2 8例胰腺癌组织石蜡标本进行免疫组织化学染色。结果 :P5 3蛋白阳性物质位于肿瘤细胞核内 ,2 8例胰腺癌病例中有 16例 P5 3表达阳性 (5 7.1% ) ,与正常胰腺和癌旁组织比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,且阳性率随分化程度的降低而升高 (P<0 .0 5 ) ,淋巴结转移阳性组表达率高于淋巴结转移阴性组 (P<0 .0 5 ) ,与术后存活情况有关 (P<0 .0 5 )。结论 :p5 3基因的异常表达在胰腺癌的发展过程中起重要作用 。

氟中毒肾损伤的图像分析研究

目的:观察氟中毒大鼠肾组织损伤的形态定量病理变化特点,探讨过量氟对肾脏的毒性作用。方法:用富钙平衡饲料与低钙偏食饲料分别饲养大鼠,经饮水投氟每升分别含110.5mg、221.0mg、331.5mg氟化钠的高氟水造成水型氟中毒。应用HPIAS—1000电子计算机彩色图像分析系统测试氟中毒大鼠肾组织的鲍曼氏囊腔面积、肾小球周长、血管球周长、肾小管上皮细胞面积、肾小管管腔面积、肾小管管腔面积/肾小管面积之比等。结果:常规食中剂量氟组和高剂量氟组的肾小球球囊面积明显高于常规食对照组(P<0.05),偏食低钙加氟各组肾小球球囊面积也明显高于偏食低钙对照组(P<0.05)。偏食低钙高剂量加氟组肾小管面积较偏食低钙对照组变小(P<0.05),偏食低钙加氟各组较偏食低钙对照组肾小管管腔面积与肾小管上皮细胞比值明显变小(P<0.01)。结论:氟中毒情况下可使肾小球球囊腔增大及其肾小管管腔明显变化,这种损伤性变化可能对肾脏排氟功能有不同程度的影响。

肌钙蛋白Ⅰ提取纯化新方法的研究

兔骨骼肌匀浆液经离心后，依次经DEAE－Sephadex A25，Sephadex G75及Butyl Sepharose F．F柱层析，得到了兔骨骼肌肌钙蛋白C（sTnC）纯品．将其与Sepharose 4B凝胶偶联，制成sTnC亲和层析凝胶．人心肌或骨骼肌经匀浆、离心后上sTnC亲和层析柱，一步分离可获得人心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTn I）或人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ（sTn I）纯品．HPLC分析出现单一峰．SDS－PAGE分析得到一条电泳带，其分子量分别为25 000及 21 000．用 20 g sTnC亲和凝胶处理 40 g人心肌时，相当于每 100 g心肌可得到 82.6 mg cTnI.

原发性肺动脉高压并发双重病毒感染病理学研究

目的 :探讨原发性肺动脉高压症患者并发双重病毒感染的机理。方法 :对原发性肺动脉高压症患者进行尸检 ,并对其心肌组织切片进行原位核酸杂交 ,观察结果。结果 :发现该原发性肺动脉高压症患者并发了巨细胞病毒和柯萨奇病毒双重病毒感染。结论 :原发性肺动脉高压症可并发双重病毒感染 ,除巨细胞病毒外 ,可并发肠道病毒 (柯萨奇病毒 )感染。

肌球蛋白单克隆抗体标记大鼠心肌坏死的研究

Monoclonal antibody (MAb) attained from hybridoma 1A5 was against human cardiac myosin heavy chains (CMHC) and didn’t react with smooth muscle. It was labeled with Na 125 I and injected to the rats suffered from acute myocardial necrosis, which were treated by isoproylarterenol. After injection, the rats were studied from the 4 th to the 48 th hours by relative radioactivity in blood, thyroid gland, stomach, liver, lung, muscle and heart, respectively. The results indicated that 125 I CMHC MAb could specifically reach the target necrotic organ in the 4 th hours (2 03±0 60 ) and remained up to the 48 th hours (2 55±0 49) or longer, at which the 8 th was higher (4 89±0 44). Meanwhile 125 I CMHC MAb showed much higher affinity to necrotic cardiac tissue than the normal ( P <0 001). The same results were should in the blood from 4 th (4 94±0 45) to 48 th (2 70±0 12). Thus 125 I CMHC MAb can be considered as an effective tool for image diagnosis of acute myocardial necrosis.

急性运动性轴索型格林-巴利综合征兔模型坐骨神经巨噬细胞免疫组化研究

目的 探讨急性运动性轴索型 (AMAN型 )格林 -巴利综合征 (GBS)兔模型坐骨神经巨噬细胞免疫组化染色的改变。方法 采用免疫组化方法对实验兔坐骨神经进行 CD6 8免疫组化染色。结果 发病兔坐骨神经单核巨噬细胞呈阳性表达 ,坐骨神经内有散在单核巨噬细胞浸润 ,单核巨噬细胞吞噬含铁血黄素 ,局部神经轴索疏松和消失。结论 本实验证明了单核巨噬细胞参与 AMAN型 GBS的发病过程 ,为空肠弯曲菌 (Cj)感染和体液免疫反应与 AMAN型 GBS的发病关系提供了一个可靠证据。

鹿茸多肽的分离纯化及药理活性

采用凝胶过滤层析、离子交换层析以及高效液相方法,从马鹿鲜鹿茸分离得到了一种多肽,其在SDS-PAGE电泳上显示为一条带,HPLC图谱为单峰,质谱显示其相对分子量为3095.1.氨基酸组成分析结果表明,此多肽主要含有缬氨酸、丙氨酸、赖氨酸和甘氨酸,没有半胱氨酸.经FDNB法测定,其N-末端氨基酸为缬氨酸.活性检测表明,该多肽能够明显促进表皮细胞和BRL肝细胞株的增殖.

大鼠胸主动脉平滑肌细胞的组织贴块法培养及鉴定

目的 :建立大鼠胸主动脉平滑肌细胞的组织贴块培养法。方法 :取大鼠胸主动脉 ,切成1 mm× 1 mm× 1 mm的小块 ,均匀地种植于培养瓶壁上 ,约 5 0 min后加入含有 2 0 %小牛血清的PRMI- 1 640培养基进行培养。结果 :培养第 5天时 ,可见少量梭形或长梭形细胞自组织块周围游出 ,至培养 3周细胞融合成片 ,呈“峰、谷”状生长。肌动蛋白免疫组化染色 ,>98%的细胞染色阳性 ,透射电镜观察 ,于基膜下和胞浆内可见密斑和密体。 VG染色也证实几乎所有的细胞均为平滑肌细胞。结论 :应用细胞贴块法培养大鼠平滑肌细胞 ,操作简单 ,结果稳定 ,纯度较高 。

氟对大鼠破骨细胞基质金属蛋白酶-9的影响

目的 观察氟对大鼠破骨细胞分泌的基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)的影响。方法 采用 westernblot技术观察染氟大鼠股骨干骺端 MMP- 9的表达 ;应用免疫组织化学方法观察氟对体外培养的破骨细胞MMP- 9的表达的影响。结果 染氟大鼠股骨干骺端 MMP- 9的蛋白表达增高 ;氟可使体外培养的破骨细胞MMP- 9的蛋白表达增高。结论 氟通过提高破骨细胞的 MMP- 9的表达而致破骨性骨吸收活性增强。

氟化物对体外乳鼠颅盖骨分离细胞活力的影响

目的 :建立较成熟的体外成骨细胞培养鉴定技术 ,初步观察氟化物对体外乳鼠颅盖骨分离细胞活力的影响。方法 :采用颅盖骨分离细胞体外培养、传代、鉴定及 MTT比色法。结果 :染氟110 .5 mg/L时细胞活力明显降低 ;染氟 4 4 .2 mg/L、110 .5 mg/L 12 0 h对细胞活力有抑制作用 ,表明高剂量氟能抑制细胞增殖 ;而染氟 8.84 mg/L 12 0 h,氟刺激细胞活力增强。结论 :高剂量氟能抑制细胞增殖 ,表明培养时间较长时 ,方能显示低剂量对细胞增殖的促进作用。

糖基化终末产物对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶-2活性的影响

目的 :观察糖基化终末产物 ( AGEs)和氨基胍 ( AG)对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶 - 2( MMP- 2 )活性的影响。方法 :正常雄性 Wistar大鼠 2 3只 ,随机分为 4组 ,AGE-修饰大鼠血清蛋白( AGE- RSP)组 ( n=6)每日尾静脉注射 AGE- RSP,AGEs+ AG组 ( n=6)同时腹腔注射 AG,天然血清组 ( n=6)注射天然大鼠血清蛋白 ,空白对照组 ( n=5 )不施加处理 ,连续注射 4周后 ,用 ELISA法测定肾皮质 AGEs含量 ,酶谱法检测肾皮质 MMP- 2活性。结果 :与天然血清组及空白对照组比较 ,注射 AGE- RSP的大鼠肾皮质 AGEs含量明显增加 ,活性形式的 MMP- 2活性明显降低 ( P<0 .0 5 ) ,而同时注射 AG的大鼠 MMP- 2活性明显增加 ( P<0 .0 5 )。结论 :AGEs能降低大鼠肾皮质MMP- 2活性 ,AG可抑制 AGEs对 MMP- 2活性的影响 ,提示 AGEs通过降低 MMP- 2活性减少肾小球细胞外基质 ( ECM)降解 ,可能是导致 ECM积聚的原因之一。

氟化钠对体外培养大鼠破骨细胞的影响

目的 :探讨氟对体外培养的破骨细胞的作用。方法 :体外分离培养大鼠乳鼠四肢长骨破骨细胞 ,于分离后 2 h加入氟化钠 ( Na F) 4、6、8和 1 0 mg· L-1,对其进行形态学的动态观察。结果 :破骨细胞形态多样 ,含多个核 ,体外培养存活时间短 ,2 4 h大部分细胞凋亡。加入 Na F后 ,破骨细胞数目减少 ,体积变小 ,空泡增多 ,甚至崩解坏死。结论 :在一定的剂量和时间范围内 。

心肌纤维化的调控因素

心肌间质胶原网络在维持心肌正常结构和功能完整性方面起着重要的作用 ,胶原过多蓄积将引起心肌纤维化。心肌胶原代谢受多种因素调控 ,这些因素涉及肾素 血管紧张素 醛固酮系统、内皮素、儿茶酚胺、缓激肽、生长因子、一氧化氮、基质金属蛋白酶 金属蛋白酶组织抑制剂及细胞内钙等。

不同氟中毒动物模型肾脏功能与离子代谢的变化

目的 观察不同氟中毒动物模型肾脏功能与离子代谢的变化。方法 经饮水投氟复制氟中毒模型。采用全自动生化分析仪检测血清内反映肾功能指标和相关离子代谢，应用放射免疫技术测定血、尿中的β２－ＭＧ含量。结果 氟中毒家兔和大鼠的ＢＵＮ、Ｃｒ、ＵＡ变化不明显，β２－ＭＧ投氟组与对照组比较无明显差异。氛中毒家兔和大鼠离子代谢紊乱，并且以Ｃａ２＋代谢紊乱明显。结论 高氟剂量或在伴有钙缺乏的情况下，血清内离子代谢紊乱明显，尤以Ｃａ２＋表现显著，但氟中毒时肾功能损害不明显。

氟中毒大鼠肾组织形态改变与氧化应激

目的定量分析氟中毒大鼠肾组织形态改变,并探讨氧化应激与肾损伤的关系。方法给大鼠饮水投氟10周。采用图象分析仪对肾组织进行体视学定量分析,应用流式细胞术检测肾细胞活性氧含量,通过生化技术检测红细胞抗氧化酶活性改变。结果氟中毒大鼠肾小囊囊腔和皮髓质交界处肾小管均扩张明显,红细胞过氧化氢酶在投与同等剂量氟的情况下,偏食组较常食组的酶活性下降明显。结论氟中毒引起肾损害的靶部位以皮髓质交界处肾小管扩张为主,并且随着投氟剂量的增加或低钙的情况下损害更为明显。