水流动力学注射介导的IL-12基因在小鼠体内的高效表达

目的:评估水流动力学注射法转移表达小鼠白细胞介素12(mIL-12)质粒pCMV-mIL-12的有效性,以及质粒DNA重复注射后转基因的表达情况。方法:通过小鼠尾静脉大体积快速注射pCMV-mIL-12质粒后取血及主要器官,应用ELISA、PCR、RT-PCR及免疫组织化学染色等方法,检测质粒在组织器官中的分布与表达。为了研究重复注射质粒后mIL-12的表达,分别在首次注射后第7天、第14天和第30天二次注射相同剂量的质粒。每次注射前及注射后均取血检测mIL-12的表达及其诱导产生的IFN-γ及NO。结果:注射后10小时血清中的mIL-12蛋白水平最高,第7天恢复到基线值,其表达呈DNA剂量依赖性。IFN-γ及NO的表达高峰均出现在注射后第3天。首次注射后第14天及第30天重复注射可获得mIL-12的再次高效表达。结论:水流动力学注射方法是一种简便、有效的体内IL-12基因转移方式。重复应用水流动力学注射方法体内转移表达mIL-12的裸DNA后,可以获得转基因的再次高效表达,两次注射间隔时间至少为14天。

水流动力学注射介导白细胞介素-12基因治疗小鼠原位移植性肝癌

以细胞因子白细胞介素（IL）-12为基础的抗肿瘤免疫疗法有望成为治疗肝脏肿瘤的有效手段之一。以往的IL-12抗肿瘤基因治疗研究中多采用皮下接种肝癌模型，肿瘤的生长环境与临床实际情况相差甚远。本研究中，我们采用肝脏原位接种肝癌细胞H22制备肝癌模型，通过一种简单有效的质粒DNA基因转移方法，即水流动力学注射法，