吉林省15年浅部真菌病菌种分析

目的:了解15年1986年～2001年吉林省浅部真菌病的致病菌及菌种变迁情况,指导临床预防治疗。方法:用沙堡琼脂培养基分离培养15年吉林省浅部真菌病的致病菌,并动态分析各年代菌种分离结果。结果:共分离出8种2763株致病菌,其中红色毛癣菌居首位,须癣毛癣菌居第2位,犬小孢子菌居第3位。在头癣病原菌中,犬小孢子菌由80年代的84.3%逐渐减少,至90年代后期仅占9.6%。而红色毛癣菌则逐年增高。在其他各病种中,红色毛癣菌及絮状表皮癣菌逐年增高,犬小孢子菌则逐年减少。结论:15年吉林省浅部真菌病致病菌种有明显变迁,尤其犬小孢子菌随年代明显减少为显著特征。

特比萘芬治疗念珠菌性阴道炎100例疗效观察

为观察特比萘芬治疗念珠菌性阴道炎疗效,选择念珠菌性阴道炎患者100例,口服特比萘芬250mg,每日1次,连服2周,停药时及停药后4周、8周复诊,观察疗效。治疗前后作真菌镜检及培养,鉴定菌种,观察真菌清除率,并作抑菌实验,测定MIC值。结果口服特比萘芬治疗念珠菌性阴道炎,治愈率85%,总有效率达93%。口服特比萘芬治疗念珠菌性阴道炎疗效良好。

妊娠滋养细胞肿瘤临床诊断的研究进展

妊娠滋养细胞肿瘤是一类高度恶性的妇科肿瘤,也是临床上治愈率最高的恶性肿瘤之一,早期诊断及治疗仍是改善恶性肿瘤患者预后的关键所在。随着实验室诊断技术的发展和各种检测设备的完善,人们对这类疾病的认识也逐步深入,人绒毛膜促性腺激素已不再是临床诊断中唯一的肿瘤标志物,对其相关分子的研究使其测定值具有了更精确的意义,先进的影像学设备的应用能够发现较隐蔽的微小病灶。对这类疾病形态学及分子水平方面所做的研究,能对这类疾病能够作出早期而准确的诊断,现就妊娠滋养细胞肿瘤临床诊断的研究进展作以综述。

卵巢早衰

卵巢早衰是一种多病因引起的卵巢功能衰竭 ,其相关病因涉及自身免疫因素、遗传性因素、代谢因素、物理化学因素和促性腺激素及其受体改变等 。

狂犬病毒融合糖蛋白DNA疫苗及免疫效果的研究

目的:构建含两种狂犬病毒疫苗株的融合糖蛋白基因DNA疫苗并对小鼠的免疫效果进行评价.方法:用RT-PCR法分别扩增和分离出SRV9株和CTN株的狂犬病毒糖蛋白部分表位的基因(SRV9毒株的1～252氨基酸和CTN毒株253～524氨基酸),构建含融合G蛋白基因的DNA疫苗质粒VR1055-SRV9CTN.碱裂解法大量提取重组质粒并经Sepharose 4FF柱层析纯化后直接肌肉注射免疫NIH小鼠,用ELISA法和淋巴细胞转化实验分别检测质粒DNA疫苗诱导小鼠产生抗狂犬病毒的体液免疫和细胞免疫效果.CTLL-2依赖细胞株/MTT比色法进行IL-2活性测定.结果:VR1055-SRV9CTN DNA疫苗具有较好的诱生狂犬病毒抗体能力.诱导细胞免疫方面,质粒VR1055-SRV9CTN DNA疫苗和空载体对照组的ConA刺激指数存在显著性差异(t=7.201,P=0.000).小鼠血清中的IL-2活性测定表明DNA疫苗组显著高于空载体组(t=21.616,P=0.000).CVS株RV脑内攻击保护实验中,疫苗组和对照组小鼠存活率分别为63%、25%,二者间差异具有显著性(t=7.065,P=0.008).结论:含狂犬病毒糖蛋白基因VR1055-SRV9CTN DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫,具有较好的免疫保护效果.

Apoptin基因对人胃癌细胞BGC-823的抑制效应及与凋亡信号转导的关系

目的:探讨Apoptin基因对人胃癌细胞BGC-823的抑制作用及其参与胞内细胞信号转导的机制.方法:应用脂质体转染法将重组质粒pVAX1-Apoptin体外转染BGC-823细胞,运用噻唑兰(methylthiazolyltetrazolium,MTT)分析法检测重组质粒对BGC-823肿瘤细胞的抑制作用;通过AO/EB染色法对pVAX1-Apoptin转染的肿瘤细胞进行形态学观察;运用流式细胞术检测细胞线粒体跨膜电位(△Ψm);通过免疫印迹检测细胞色素c(cytochromec,Cytoc)释放;应用底物显色法检测Caspase-3/9活性.结果:pVAX1-Apoptin转染比pVAX1具有更强的抑瘤效应(10μg质粒转染72h后,23.37%vs99.61%,P<0.01),并且肿瘤细胞的死亡方式以凋亡为主.实验结果显示,pVAX1-Apoptin转染导致细胞线粒体跨膜电位下降,与pVAX1转染BGC-823细胞相比有显著差异(46.7%±7.26%vs70.66%±5.98%,P<0.01);同时伴随细胞色素c的释放.另外,pVAX1-Apoptin和pVAX1转染细胞的Caspase-3/9活性具有显著差异(Caspase-9:0.181±0.032vs0.079±0.013,P<0.01;Caspase-3:0.242±0.041vs0.058±0.023,P<0.01).结论:pVAX1-Apoptin转染BGC-823肿瘤细胞导致线粒体跨膜电位下降,并刺激释放细胞色素c,从而激活Caspase-9.经细胞色素c激活的Caspase-9进而活化凋亡通路下游关键作用因子,并对BGC-823肿瘤细胞产生抑制效应.

宫腔镜辅助生殖道畸形手术初探

目的探讨生殖道畸形诊断及手术中的监护方法。方法生殖道畸形11例患者,年龄15～21岁,平均年龄16.7岁(标准差5岁),多为未婚未孕青春期少女,其中超声及双合诊检查可疑子宫畸形6例(残角子宫3例、盲角子宫3例[1]);阴道斜隔5例(Ⅰ型2例,Ⅱ、Ⅲ型3例)。应用宫腔镜和超声扫描诊断及术中监护对子宫畸形行残角子宫切除术,对盲角子宫行盲角部子宫体部分切除并宫体修补术;对阴道斜隔,行阴道斜隔切开及大部切除,清除阴道及宫腔积血或积脓。结果术后随访痛经症状均消失,经量无显著变化,无阴道或下腹部包块,超声检查未见异常征象。结论宫腔镜结合超声检查可准确诊断非妊娠期残角子宫或盲角子宫、准确定位阴道斜隔位置,指导手术切除或明确切开部位。宫腔镜及超声监护可使较复杂生殖道畸形手术更安全、准确、快速、直接。

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征免疫网络及其与临床的相关性

目的探讨红细胞表面补体受体Ⅰ型(CR1)活性、红细胞表面CD58表达和血清中可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)、白细胞介素-6(IL-6)水平在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)中的作用、变化规律及其与疾病严重程度的关系。方法采用肿瘤红细胞花环法、流式细胞分析法及酶联免疫吸附法检测20例中、重度OSAS患者(研究组)及15例正常人(对照组)的红细胞CR1活性、CD58表达和血清中SIL-2R、IL-6水平。结果(1)研究组患者肿瘤红细胞花环率(ECR1CaRR)较正常对照组降低(P<0.05);CD58表达明显高于对照组(P<0.01)。(2)研究组患者SIL-2R及IL-6水平均明显高于对照组(P均<0.01)。(3)OSAS患者SIL-2R、IL-6与呼吸紊乱指数(AHI)无相关性(P均>0.05),与动脉血氧饱和度低于90%的时间占总睡眠时间百分比(SIT90%)均呈正相关(P均<0.01)。ECR1CaRR、CD58表达与SIT90%无相关性(P均>0.05)。结论血清中SIL-2R、IL-6水平变化与OSAS患者病情密切相关,可作为临床分度及评价疗效的指标;红细胞免疫功能与细胞因子间存在相互调节作用。

新城疫病毒对Hep-2肿瘤细胞的抑制效应

目的探讨新城疫病毒(newcastlediseasevirus,NDV)对Hep-2肿瘤细胞的杀伤效应及其免疫刺激作用。方法采用考马斯亮兰染色法观察NDV感染对Hep-2肿瘤细胞细胞骨架的影响。运用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyltetrazolium,MTT)染色法检测NDV感染致Hep-2肿瘤细胞死亡的杀伤率。通过免疫荧光结合流式细胞仪(flowcytometer,FCM)检测Hep-2肿瘤细胞表面主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(majorhistocompabilitycomplexclassImolecules,MHC-I)的表达情况。另外,分离人外周血淋巴细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)作为效应细胞,以NDV感染的Hep-2肿瘤细胞作为靶细胞,同时设空白细胞对照,通过特异性细胞毒T淋巴细胞实验,探讨NDV所介导的抑瘤作用。结果NDV可致Hep-2肿瘤细胞的细胞骨架发生改变,对体外培养Hep-2肿瘤细胞的杀伤率达77.7%,可上调其表面MHC-I类分子的表达,并且能够刺激增强人外周血淋巴细胞中肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)活性,杀伤率为23.54%。结论NDV可有效杀伤Hep-2肿瘤细胞,并刺激产生特异性抗肿瘤免疫反应。

羟基喜树碱对猪视网膜色素上皮细胞增殖抑制作用的实验研究

目的探讨10-羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对培养的猪视网膜色素上皮(retinalpigment epithelium,RPE)细胞的抑制作用,并研究其发挥作用的适宜浓度。方法建立体外猪RPE细胞培养体系,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定对照组及不同浓度(0.75、1.5、3.0、6.0 mg/L)HCPT分别作用第24 h、72 h、120 h时的光密度,计算其对RPE细胞的增殖抑制率;采用流式细胞术检测不同浓度不同时间作用后,各分裂周期RPE细胞的数量;通过倒置相差显微镜和电子显微镜技术观察RPE细胞形态及超微结构的变化,并用台盼蓝排除检测法计算活细胞百分比。结果 0.75 mg/L实验组在HCPT作用后第1天与对照组比较差异无统计学意义;其余各时间段各组与相应对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);抑制作用与药物浓度、作用时间均呈正相关(药物浓度及作用时间与RPE细胞增殖抑制率呈明显的线性关系)。终浓度为1.5 mg/L的HCPT作用72 h后,RPE细胞的增殖抑制率达47.95%,而细胞活性>85%,细胞形态及超微结构改变轻微,RPE细胞的S期细胞增加了7.52%,G2/M期细胞减少。结论 HCPT对RPE细胞的抑制作用呈剂量-时间依赖性;终浓度为1.5 mg/L的HCPT对RPE细胞的增殖具有明显的抑制作用,且细胞毒性小。

阴囊坏疽的诊断和治疗(附9例报告)

目的:探讨阴囊坏疽的诊断及治疗方法。方法:回顾性分析9例阴囊坏疽患者的临床资料,对9例 患者均行早期多切口切开引流和广泛清创。结果:7例患者坏疽创面愈合良好,1例行二期睾丸切除术后愈合;1 例死亡。患者生存率为88.8%。结论:阴囊坏疽的治疗以早期多切口切开引流、广泛清创、使用足量广谱抗生素、 全身支持治疗及局部治疗、原发病治疗为主。注意卫生、保持局部清洁及提高卫生保健意识是其重要预防措施。

荧光分析在农药研究中的应用

本文综述了荧光分析方法应用于氨基甲酸酯类农药,有机磷类农药,拟除虫菊酯类农药及新型烟碱类杀虫剂等残留量的快速测定。

围绝经期妇女激素补充疗法的临床分析

通过对围绝经期妇女具有激素补充疗法 (HRT)适应症、本人同意并坚持随访的 112例妇女进行激素补充治疗 ,并根据绝经期综合征的不同表现采取不同的药物、不同的剂型、不同的剂量和不同的用药途径 ,收到了良好的效果。其中用药超过 3个月的症状改善率为 10 0 .0 0 % ,与对照组有明显差别。提示 :HRT对改善绝经期综合征、预防老年性疾病的发生、提高妇女的生活质量起着重要的作用。

急性脑水肿与多器官功能失常综合征

近十余年来对多器官功能失常综合征( MODS)的研究已取得许多进展,但 MODS的死亡率仍居高不下.通过十多年大量临床观察,发现构成 MODS死亡率高的因素除已高度重视的 ARDS,肾功衰竭、 DIC等之外,急性脑水肿也是一个致命的重要因素.现对脑水肿的发生机制、病理生理和 MODS的关系作进一步探讨.

pIRApoptinHNIL18对结肠癌细胞HCT-116的抑制效应

目的:探讨联合应用凋亡素(apoptin)基因、新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(he-magglutinin-neuramidinase,HN)基因及人白介素18(hIL-18)基因体外对人结肠癌细胞HCT-116的抑制效应。方法:重组质粒pIRApoptinHNIL18通过脂质体介导法体外转染人结肠癌细胞HCT-116,通过Western blotting和RT-PCR检测外源基因表达;采用AO/EB染色法检测pIRApoptinHNIL18对人结肠癌细胞HCT-116抑制作用;利用流式细胞术分析pIRApoptinHNIL18对人结肠癌细胞HCT-116线粒体膜电位(mitochondrial transmembrane potential,△Ψ)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用3,5-二羟基甲苯法测定唾液酸含量。结果:pIRApoptinHNIL18转染人结肠癌细胞HCT-116后,外源基因能够有效表达;肿瘤细胞生长受到抑制;线粒体△Ψ由(94.41±8.17)%下降到(30.70±8.01)%(P<0.05);唾液酸含量由(0.33±0.06)mmol/L下降到(0.09±0.03)mmol/L(P<0.01);ROS水平由(52.48±6.09)%升高到(68.98±7.26)%(P<0.05)。结论:pIRApoptinHNIL18可通过线粒体途径诱导细胞凋亡,从而抑制人结肠癌细胞HCT-116的生长。

CLN3基因表达与卵巢癌浆液性癌及子宫内膜癌

目的:研究CLN3基因在卵巢浆液性癌及子宫内膜癌中的表达特点及与其发生发展的关系。方法:采用RT-PCR和W estern B lot方法检测卵巢浆液性肿瘤(良性浆液性肿瘤、交界性肿瘤、浆液性癌)组织、子宫内膜癌及癌旁组织、正常卵巢组织和正常子宫内膜组织中CLN3基因表达情况。结果:卵巢浆液性癌组织中CLN3 mRNA表达为3.04±0.58,交界性卵巢浆液性肿瘤组织中表达为1.63±0.43,均明显高于正常卵巢组织和良性卵巢浆液性肿瘤,差异显著(P<0.01);卵巢浆液性癌组织CLN3表达高于交界性卵巢浆液性肿瘤(P<0.01);卵巢浆液性癌患者不同临床分期(Ⅰ/Ⅱ期与Ⅲ/Ⅳ期)、病理分级及有无腹水间比较差异显著(P<0.05)。正常子宫内膜组织中CLN3呈低表达,在所有的子宫内膜癌及癌旁组织中发现CLN3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01)。结论:①CLN3基因与卵巢浆液性癌的发生发展、生物学行为和预后可能有关,可作为卵巢浆液性癌的重要的生物学标记物,是卵巢浆液癌防治的一个新靶点;②CLN3基因过表达可能与子宫内膜癌发生有关。

新城疫病毒对肿瘤细胞的杀伤及其作用机制研究

目的探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)对肿瘤细胞的抑制机制及其体内抑瘤作用。方法采用基因组电泳法观察NDV感染对Hep-2肿瘤细胞基因组的影响。运用SDS-PAGE、Western blot等方法检测NDV感染对Hep-2肿瘤细胞内p53及Bcl-2蛋白表达量的影响。通过间接免疫荧光法检测NDV感染后其新城疫病毒HN基因在Hep-2肿瘤细胞表面的表达情况。另外,构建C57/BL小鼠荷H22模型,瘤内注射NDV,观察其对实体肿瘤的抑制作用,探讨NDV在动物模型体内所介导的抑瘤作用。结果NDV可致Hep-2肿瘤细胞的基因组断裂,电泳呈梯状条带。NDV感染能够上调p53的表达,且不影响Bcl-2蛋白的含量。间接免疫荧光实验显示,NDV感染Hep-2肿瘤细胞后可在其表面表达大量新城疫病毒HN蛋白。动物实验结果说明,NDV可抑制实体肿瘤生长。结论NDV可诱导Hep-2肿瘤细胞凋亡,且不受Bcl-2的影响;能够有效抑制体内实体肿瘤的生长。