人参皂苷单体Rh_2抑制小鼠前胃癌系细胞增殖及其机制

目的探讨人参皂苷Rh2(G-Rh2)对小鼠前胃癌系(MFC)细胞增殖的抑制作用及其机制。方法分别对MFC正常细胞组和G-Rh2(3、10、30mg.L-1)组经MTT法检测MFC细胞活性;倒置显微镜和Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞形态;AnnexinV-FITC双染法分析G-Rh2对细胞凋亡率的影响;分别对MFC正常细胞组、G-Rh2(10mg.L-1)处理不同时间(30min、1、2、4h)组、SP600125(5μmol.L-1)预处理2h+G-Rh2(10mg.L-1)不同时间(30min、1、2、4h)给药组经MTT法检测MFC细胞活性;Westernblot法检测G-Rh2(10mg.L-1)处理不同时间(5、15、30、45min、1、2、4h)组p-JNK(c-JunN-terminalkinase1)激酶和p-c-jun在MFC细胞中的活性,免疫细胞化学染色法检测caspase-3阳性细胞的表达率。结果G-Rh2对无血清MFC细胞有明显细胞毒活性,呈时间和剂量依赖关系;能明显诱导细胞皱缩,核染色质固缩,核碎裂,形成大约为180～200bp或其多聚体组成的寡核苷酸片断,凋亡细胞比率上升。G-Rh2处理后4h内,p-JNK激酶和p-c-jun活性持续升高,此过程可被预处理2h的SP600125(5μmol.L-1)部分抑制。结论人参皂苷G-Rh2可诱导MFC细胞凋亡,其作用机制之一可能是通过激活JNK信号传导途径,并最终增加caspase-3的激活而完成。