冲击波通过P2X7受体激活人骨髓间充质干细胞的p38 MAPK通路

目的探讨体外冲击波是否通过促使ATP向细胞外释放激活P2X7受体信号通路并诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs)p38 MAPK激酶活化。方法用即时RT-PCR检测P2X7受体mRNA的表达;通过免疫印迹法评估P2X7受体和p38 MAPK激酶的表达;用ATP水解酶、P2X7受体的siRNA、p38 MAPK激酶抑制剂以及P2受体的抑制剂评估ATP释放、P2X7受体在冲击波诱导hMSCs p38 MAPK激酶磷酸化中的作用。结果 (能量密度0.18 mJ/mm2,作用0、50、100或150次)冲击波可引起细胞内的ATP(~6.9μmol/L)向外释放,冲击波(能量密度0.18 mJ/mm2,作用0、50、100或150次)和细胞外的ATP(0.1~1μmol/L)能够促使p38 MAPK激酶活化。用ATP水解酶消除细胞外ATP、用siRNA或抑制剂抑制P2X7受体抑制p38 MAPK激酶的活化。结论冲击波引起的细胞内ATP向外释放,能够有效激活P2X7受体传导信号通路,引起hMSCs向成骨细胞的p38MAPK激酶活化,这可能是冲击波疗法的机制所在。