睾酮在体外对人卵巢颗粒细胞SVOG凋亡的影响及其内质网应激机制

目的:探讨睾酮在体外对颗粒细胞凋亡的诱导作用,并阐明其作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢颗粒细胞SVOG的细胞增殖抑制率,筛选最佳药物作用浓度后,将SVOG细胞分为对照组、睾酮组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮)、睾酮+氟他胺组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮+1.0×10^(-5)mol·L^(-1)氟他胺)、睾酮+牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮+1.5 g·L^(-1)TUDCA)。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组SVOG细胞中剪切型X盒结合蛋白1(XBP1s)、激活转录因子4 (ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)和死亡受体5(DR5)mRNA表达水平,流式细胞术检测各组SVOG细胞凋亡率。结果:与对照组比较,睾酮组SVOG细胞形态改变,异型细胞增多,胞质中出现较多颗粒,培养基中细胞碎片增多,SVOG细胞增殖抑制率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞形态变化减少,细胞增殖抑制率降低(P<0.05);流式细胞术,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞凋亡率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞凋亡率降低(P<0.05)。RT-qPCR法,作用48 h后,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论:睾酮可诱导人卵巢颗粒细胞凋亡并引起卵泡闭锁,其作用机制可能是雄激素与雄激素受体(AR)结合激活CHOP-DR5通路,诱导内质网应激(ERS)发生,促进颗粒细胞凋亡。

吉林省男性染色体多态与男性精液质量的相关性

目的 分析中国吉林省男性染色体多态与男性精液质量的相关性.方法 选取2008至2013年吉林大学第一医院生殖医学中心就诊的2 584例不育患者（不育组）行体格检查、生殖激素检查、精液分析、染色体核型分析以及Y染色体微缺失检测,同时选取602名健康男性、50名核型正常的正常生育男性、50例核型正常的无精症患者以及50例核型正常的少精症患者分别作为对照组,进行比较分析.结果 染色体多态在不育组与健康男性对照组中的总体发生率差异无统计学意义[3.91％（101/2 584）比3.16％ （19/602）,P＞0.05].各常染色体多态在不育组与健康男性对照组中的发生率差异无统计学意义（均P ＞0.05）.不育组患者中,小Y染色体（Yqh-）的发生率随患者精子浓度的降低而升高,其在无精症患者中的发生率显著高于少精症患者与精子数目正常者[57.14％（21/42）比24.32％（9/37）、0（0/13）,均P＜0.05].不育组中伴染色体多态的无精症、少精症患者与核型正常的无精症、少精症对照组患者比较,睾丸大小、生殖激素水平差异均无统计学意义（均P＞0.05）.PCR扩增结果表明,32.14％ （9/28）的Y染色体变异（Yqh±）患者存在Y染色体微缺失.结论 常染色体多态与男性不育无明显相关性.但Y染色体多态可能是导致男性不育和Y染色体微缺失的重要因素.

1937例胎儿产前超声筛查异常结果分析

目的探讨产前超声筛查胎儿异常的类型及其与妊娠期影响因素之间的关系。方法收集超声筛查会诊确认的胎儿畸形或异常1 937例,将异常类型按人体组织系统进行分组,又根据妊娠期影响因素存在与否分为研究组和对照组。结果 1胎儿心血管系统、泌尿系统和中枢神经系统异常的孕妇分别为238例、204例和169例,分别占12.29%、10.53%和8.72%;胎儿多系统异常病例中,胎儿附属物、心血管系统和中枢神经系统异常合并其他类型畸形所占比率较高,分别为23.80%、12.29%和13.27%。2胎儿心血管系统、颜面部及颈部、骨骼系统、胎儿附属物畸形或异常的发生率与孕妇妊娠年龄呈正相关性,研究组畸形或异常发生率高于对照组(P<0.05);颜面及颈部畸形分组中,有孕期叶酸服用史孕妇胎儿畸形发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);孕期吸烟胎儿附属物异常发生率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论产前超声筛查中,胎儿心血管系统、泌尿系统和中枢神经系统异常发生率较高,孕妇年龄、孕期增补叶酸和吸烟是胎儿异常发生的3个重要影响因素。

超声联合磁共振诊断胎儿骶尾部畸胎瘤一例并文献复习

胎儿骶尾部畸胎瘤(sacrococcygeal teratoma,SCT)是骶尾部较少见的肿瘤之一,约占产前诊断胎儿肿瘤的50%,其在活产儿中的发生率为1/40000~1/35000,好发于女性,根据成熟度将畸胎瘤分为良性和恶性,其中约80%为良性,恶性多见于男性[1-2]。目前,随着检查技术的提高,胎儿SCT的诊断率逐渐提高。通过文献复习发现,对于胎儿SCT的诊断大多数是通过产前超声或磁共振检查单独完成,而两者联合诊断胎儿SCT的病例较少。本文回顾性分析1例行产前超声联合磁共振检查诊断的胎儿SCT的影像学表现,并通过文献复习,进一步系统性学习胎儿SCT。

PCOS患者早卵泡期子宫内膜血流动力学参数与内分泌参数的相关性分析

目的:通过检测PCOS患者早卵泡期子宫内膜周围螺旋动脉的血流动力学参数分析其与临床代谢、基础内分泌参数之间的相关性。方法:取44例闭经期PCOS患者于早卵泡期行TV-CDU检查,检测内膜周边螺旋动脉彩色血流特征及血流参数-搏动指数(PI)及阻力指数(RI);同期测定各研究对象身高、体重以及性激素6项,各参数之间采用Pearson相关系数分析。结果:血清LH与BMI、WHR均显著负相关(P<0.01),LH/FSH比值与BMI、WHR也均显著负相关(P<0.01);PCOS患者早卵泡期子宫内膜周围螺旋动脉PI与血清T水平显著正相关(P<0.01),RI与LH/FSH正相关(P<0.05)。结论:TV-CDU检测内膜周围螺旋动脉血流动力学为评定PCOS的子宫内膜情况提供了重要的临床应用价值,且子宫内膜血流情况受PCOS患者内分泌状况的影响。

染色体异常与男性不育关系的研究

目的探讨不同类型染色体异常对男性不育的影响。方法对2006年5月至2012年5月吉林大学第一医院生殖医学中心进行遗传咨询的2034例男性不育患者行染色体检杏，同时行精液常规检查和生殖激素检测。结果2034例男性不育患者中检出染色体核型异常267例，检出率为13．13％。，267例患者中行精液常规检杏258例，其中无精子症190例，少精子症58例，精液止常10例。267例患者包括染色体数目异常169例（63．30％），以无精子症为主，其中克氏综合征157例（58．80％），超雄综合征7例（2．62％），特纳综合征4例（1．50％），mar染色体1例（0．37％）；结构异常49例（18．35％），以少精子症为主，其中染色体易位32例（11．99％），倒位17例（6．37％）；性反转4例（1．50％），均为无精子症；染色体多态45例（16．85％），以少精子症为主。对不同精液结果的非嵌合刊克氏综合征患者年龄、睾丸体积、精液量及血清生殖激素进行比较，仅年龄差异有统计学意义（P〈0．05）。结论染色体异常是造成男性精液异常、导致男性不育的重要遗传学病因，对男性不育患者行染色体检查是必要的。

精子顶体形态分析在体外受精方式选择中的作用

目的探讨精子顶体形态对体外受精(in-vitro fertilization,IVF)结局的影响,为不孕夫妇行辅助生殖治疗前选择合适的助孕方式提供实验室依据。方法 95对不孕夫妇行辅助生殖技术助孕,其中73对行常规IVF助孕,22对夫妇行补救卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕。采用计算机辅助精液分析系统检测精液常规;用Diff-Quik染色法分析精子形态及顶体形态,计算正常形态精子百分率、畸形精子指数(teratozoospermia index,TZI)、顶体指数(acrosome index,AI)和顶体完整率(percentage of intact acrosome,PIA)。结果 (1)IVF妊娠组与非妊娠组间精子形态各项参数比较差异均无统计学意义(P≥0.05)。(2)相关性分析结果显示精子形态参数与IVF受精率、卵裂率、优胚率、种植率均无显著相关关系(P≥0.05)。(3)在不同助孕方式组间,AI、PIA以及正常形态精子百分率比较差异均有显著统计学意义。(4)二元逻辑回归分析结果显示精子形态参数与IVF妊娠结局无独立相关关系(P≥0.05);但AI是影响助孕方式的独立影响因素(P<0.001)。(5)ROC曲线分析结果显示,在助孕方式选择上正常形态精子百分率、AI和PIA的cut-off值分别为1.4%、17%和31%。结论顶体形态分析可作为评价精子受精能力的重要指标,在助孕方式选择上AI比正常形态精子百分率更有参考价值。

少弱畸形精子症患者H19及MEST基因DNA甲基化分析

目的比较正常生育男性及少弱畸形精子症患者父系印记基因H19及母系印记基因MESTDNA甲基化的差异。方法对2011年3月至2012年2月15例正常生育男性和33例少弱畸形精子症患者精液标本进行常规分析和精子形态分析。密度梯度离心法提纯精液，提取精液基因组DNA并进行亚硫酸氢盐处理，利用PCR体外扩增并将纯化后的PCR产物与pMD R 18-T载体连接及酶切验证，并对阳性克隆进行测序和DNA甲基化程度差异分析。结果正常生育男性H19DNA高甲基化5例，甲基化率为100．0％，10例少弱畸形精子症患者DNA甲基化水平显著下降，甲基化率为93．0％，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。正常生育男性MESTDNA低甲基化10例，甲基化率为1．6％，23例少弱畸形精子症患者DNA甲基化率为4．8％，两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论H19差异甲基化区域的甲基化异常和男性不育有关，可能成为人类精子形成缺陷的生物学标志之一。

小Y染色体与无精子因子微缺失的关系及家系研究

目的探讨小Y染色体与无精子因子（AZF）微缺失的关系及小Y染色体对男性不育的影响。方法回顾性分析2010年5月至2011年10月379例男性不育患者外周血染色体检查资料，对检出的小Y染色体患者补充C显带和AZF微缺失检查，对其父及兄、弟等行相同检查。结果检出小Y染色体8例，其父或兄、弟染色体核型均与先证者一致。8例小Y染色体患者中，AZF微缺失3例，其父AZF所测位点均存在；另5例小Y染色体患者及其父、兄AZF基因均存在。结论从家系角度分析小Y染色体核型不是引起男性不育的关键因素。存在AZF微缺失的小Y染色体患者，其不育可能是由AZF微缺失引起。无AZF微缺失的小Y染色体核型对男性不育无明确影响。

46，XX，t（2；4；10）复杂易位伴多次不良生育史一例

患者女，27岁．已婚，智力、表型均正常。孕5产1。19岁行人工流产1次；24岁剖宫产一患有先天性心脏病女婴，于产后3个月夭折；25岁、26岁两次妊娠均为孕早期胚胎停止发育，手术流产。本次妊娠至22周。超声提示胎儿半叶全前脑无裂、象鼻、脑积水。否认近亲结婚．否认放射性、毒性物质接触史。患者父母曾生育两个孩子均夭折，患者有一妹妹．20岁，表型、智力正常．未婚。

罕见46，XX，del（10）（q26）活婴一例

患儿女．出生后1周．因生后窒息入院。诊断为新生儿窒息及新生儿缺氧缺血性脑病。患儿经剖宫产分娩，出生体重3600g。产前有宫内窘迫。查体：双耳位低．双侧眼球略凹陷。双食指与中指距离远，小指内弯，左侧贯通掌，特殊面容，外阴发育幼稚。电话随访：患儿4个月时不能抬头，

罗氏易位携带者体外受精-胚胎移植术后妊娠合并部分性葡萄胎一例

患者男，32岁，结婚3年，因继发不孕就诊。查体：身高176cm，体重110kg，双侧睾丸体积15mL，质地正常，阴茎长度10cm，尿道外口发育正常。精液常规结果：精液量1．8mL，精子密度8．35×106／mL（正常参考值≥15×106／mL），A级19．35％，B级9．68％，C级6．45％，D级64．52％，正常形态率0．48％（正常参考值≥4％）。精液检查诊断为少、重度畸形精子症。其妻，30岁，表型正常，曾孕40余天无明显诱因自然流产，未行流产物绒毛检查。输卵管检查示双侧输卵管通畅。监测排卵2周期，有排卵。夫妻非近亲婚配。孕期无有毒有害物质接触史，无类似家族史。

47，XX，＋10活婴一例

患者女，18天，母孕41周经选择性剖宫产分娩，出生体重1．9kg．Apgar评分：1min8分，5min9分。因“体重低于出生后3h”入院。查体：一般状态及反应尚可，皮肤白皙，下颌小，肌张力低，肛门位置靠前。前囟平坦无紧张，呼吸平稳，约42次，／rain，三凹症阴性．双肺未闻及干湿哕音，腹软，肝脾肋下未触及。经患儿父母知情同意后．行细胞遗传学检查：外周血淋巴细胞培养37℃培养72h，常规染色体制片，进行G显带分析．计数20个．分析5个，核型为47，XX，＋10（图1）。其父母未进行外周血染色体检查。

46,XX,der(4)t(4;10)(q33;q25)pat一例

患儿女,5岁10个月,因全面发育落后就诊。母孕中期系统超声检查发现胎儿为单脐动脉,孕晚期发现胎儿发育渐进性落后,孕41+周产程仍未发动而行剖宫产分娩。患儿出生体重2.4 kg,身长47cm。查体:身高105 cm,体重15 kg。眼间距宽、上睑下垂、眼裂狭小,鼻梁低,眉短且浅,双侧低耳位,牙齿发育不良,牙质脆、易脱落;张口吐舌、挺肚而立;运动落后:仅会走,不会跑跳,双手僵硬,双指第5指弯曲,精细运动差;语言发育落后:仅会简单的单字发音,且发音不清;注意力不集中、学习困难,智力障碍,智力水平相当于2岁儿童。6个月时心脏超声检查:动脉导管未闭(后未复查)。患儿父母表型未见异常,非近亲结婚,否认家族遗传病史。

98%无头精子一例并文献复习

目的:报道98%无头精子1例并探讨其发生机制,旨为该类患者的诊治提供实验室依据。方法:对此例无头精子患者的睾丸曲细精管病理结构和精子超微结构进行分析;将20%、15%无头精子患者设为对照组,分别对3例无头精子患者的精子进行精子染色质扩散实验(sperm nucleus DNA integrity kit,SCD)合并精子荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测。结果:无头精子患者睾丸曲细精管严重病变;在透射电子显微镜下可见到精子顶体、线粒体、轴丝等程度不同的结构异常:无头精子患者的精子染色体非整倍体率与精子核DNA损伤程度成正比,且随无头精子比例增多而升高。结论:无头精子有病理意义,其发生与精子DNA损伤、精子染色体异常以及编码头尾连接段的基因缺陷有关。

17例AZFc区缺失患者家系研究及缺失断点序列分析

目的:探讨在自然生育条件下Y染色体AZFc区缺失来源,同时进行断点序列比对来分析断点的位置。方法:通过对AZF区22个序列标签位点(STS)多重PCR扩增,检测家系样本缺失情况。结果:17例AZFc区缺失家系中,13例为新生突变,突变率为76.47%;4例为垂直传递,遗传率为23.53%。新生突变和垂直传递患者在年龄、生殖激素水平及睾丸体积组间差异无统计学意义(P<0.05)。近端缺失断点多集中于sY1197、sY1191,远端多集中于sY157、sY1054。结论:AZFc区缺失患者绝大多数为新生突变,且新生突变与垂直传递患者无明显差别;AZFc区缺失近、远端缺失断点多集中于复制子b2和b4。