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PHGDH对胃癌细胞BGC823增殖和化疗药物敏感性的影响
被引量:
4
1
作者
李婷宇
郭昊
+3 位作者
刘海明
易晓芳
聂勇战
樊代明
《中华肿瘤防治杂志》
CAS
北大核心
2017年第8期518-523,共6页
目的磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)催化糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸生成3-磷酸羟基丙酮酸,将糖酵解中间产物引入丝氨酸生物合成途径,它在包括乳腺癌和结肠癌等多种肿瘤中表达升高。本研究旨在探讨PHGDH的表...
目的磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)催化糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸生成3-磷酸羟基丙酮酸,将糖酵解中间产物引入丝氨酸生物合成途径,它在包括乳腺癌和结肠癌等多种肿瘤中表达升高。本研究旨在探讨PHGDH的表达对胃癌细胞(BGC823)增殖以及对化疗药物顺铂敏感性的影响。方法免疫组织化学染色检测PHGDH蛋白在75例配对的胃癌和癌旁正常组织中的表达情况;siRNA转染胃癌细胞BGC823干扰PHGDH表达,蛋白质印迹法验证siRNA对PHGDH蛋白表达的干扰效率;CCK-8法和平板克隆实验检测PHGDH基因沉默对胃癌细胞BGC823增殖和克隆形成能力的影响;流式细胞术检测PHGDH基因沉默对BGC823细胞周期的影响;流式细胞术检测凋亡评估PHGDH基因沉默对胃癌细胞BGC823对化疗药物顺铂反应性的影响。结果 PHGDH在胃癌组织中的阳性表达率为72.0%(54/75),显著高于癌旁正常组织的41.3%(31/75),差异有统计学意义,χ~2=14.36,P<0.01;在转染siRNA后,实验组BGC823-siPHGDH细胞中的PHGDH/β-actin蛋白表达相对灰度比值为0.09±0.02,显著低于阴性对照组的0.70±0.05和空白对照组的0.74±0.06,差异有统计学意义,F=62.35,P<0.01;CCK-8实验结果显示,细胞铺板后5d,BGC823-Mock、BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞各组在第5天时BGC823细胞增长倍数分别为11.13±0.35、11.30±0.72和5.58±0.66,差异有统计学意义,F=48.61,P<0.01;平板克隆形成实验结果显示,细胞培养14d后,BGC823-Mock、BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞形成的克隆数分别为182.67±11.85、173.33±7.26和28.33±10.93,差异有统计学意义,F=71.85,P<0.01;细胞周期检测结果显示,阴性对照组BGC823-siNC的G_0/G_1期细胞百分比为(70.3±2.4)%,实验组BGC823-siPHGDH的G_0/G_1期细胞百分比为(87.5±1.3)%,说明实验组BGC823-siPHGDH的G_0/G_1期细胞增多,PHGDH基因沉默引起胃癌细胞发生G_0/G_1细胞周期阻滞;细胞凋亡检测结果显示,经1μg/mL的顺铂处理BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞24h后,BGC823-siNC凋亡率为(28.8±2.5)%,BGC823-siPHGDH组为(45.0±5.1)%,提示PHGDH基因沉默能够增加胃癌细胞BGC823对顺铂的敏感性。结论 PHGDH基因沉默抑制胃癌细胞BGC823的增殖,引起细胞周期阻滞,增加对化疗药物顺铂的敏感性,这不仅为胃癌临床治疗提供一个新的靶点,而且为肿瘤代谢在肿瘤发生和发展中的作用提供了新的实验证据。
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关键词
胃癌
PHGDH基因
细胞增殖
顺铂
肿瘤代谢
原文传递
题名
PHGDH对胃癌细胞BGC823增殖和化疗药物敏感性的影响
被引量:
4
1
作者
李婷宇
郭昊
刘海明
易晓芳
聂勇战
樊代明
机构
第四军医
大学
西京消化病医院.肿瘤
生物
学国家重点实验室
吉林大学计算机与技术学院生物识别与信息安全技术研究室
出处
《中华肿瘤防治杂志》
CAS
北大核心
2017年第8期518-523,共6页
基金
国家自然科学基金(81430072
61471181)
文摘
目的磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)催化糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸生成3-磷酸羟基丙酮酸,将糖酵解中间产物引入丝氨酸生物合成途径,它在包括乳腺癌和结肠癌等多种肿瘤中表达升高。本研究旨在探讨PHGDH的表达对胃癌细胞(BGC823)增殖以及对化疗药物顺铂敏感性的影响。方法免疫组织化学染色检测PHGDH蛋白在75例配对的胃癌和癌旁正常组织中的表达情况;siRNA转染胃癌细胞BGC823干扰PHGDH表达,蛋白质印迹法验证siRNA对PHGDH蛋白表达的干扰效率;CCK-8法和平板克隆实验检测PHGDH基因沉默对胃癌细胞BGC823增殖和克隆形成能力的影响;流式细胞术检测PHGDH基因沉默对BGC823细胞周期的影响;流式细胞术检测凋亡评估PHGDH基因沉默对胃癌细胞BGC823对化疗药物顺铂反应性的影响。结果 PHGDH在胃癌组织中的阳性表达率为72.0%(54/75),显著高于癌旁正常组织的41.3%(31/75),差异有统计学意义,χ~2=14.36,P<0.01;在转染siRNA后,实验组BGC823-siPHGDH细胞中的PHGDH/β-actin蛋白表达相对灰度比值为0.09±0.02,显著低于阴性对照组的0.70±0.05和空白对照组的0.74±0.06,差异有统计学意义,F=62.35,P<0.01;CCK-8实验结果显示,细胞铺板后5d,BGC823-Mock、BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞各组在第5天时BGC823细胞增长倍数分别为11.13±0.35、11.30±0.72和5.58±0.66,差异有统计学意义,F=48.61,P<0.01;平板克隆形成实验结果显示,细胞培养14d后,BGC823-Mock、BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞形成的克隆数分别为182.67±11.85、173.33±7.26和28.33±10.93,差异有统计学意义,F=71.85,P<0.01;细胞周期检测结果显示,阴性对照组BGC823-siNC的G_0/G_1期细胞百分比为(70.3±2.4)%,实验组BGC823-siPHGDH的G_0/G_1期细胞百分比为(87.5±1.3)%,说明实验组BGC823-siPHGDH的G_0/G_1期细胞增多,PHGDH基因沉默引起胃癌细胞发生G_0/G_1细胞周期阻滞;细胞凋亡检测结果显示,经1μg/mL的顺铂处理BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞24h后,BGC823-siNC凋亡率为(28.8±2.5)%,BGC823-siPHGDH组为(45.0±5.1)%,提示PHGDH基因沉默能够增加胃癌细胞BGC823对顺铂的敏感性。结论 PHGDH基因沉默抑制胃癌细胞BGC823的增殖,引起细胞周期阻滞,增加对化疗药物顺铂的敏感性,这不仅为胃癌临床治疗提供一个新的靶点,而且为肿瘤代谢在肿瘤发生和发展中的作用提供了新的实验证据。
关键词
胃癌
PHGDH基因
细胞增殖
顺铂
肿瘤代谢
Keywords
gastric cancer
PHGDH
cell proliferation
cisplatin
cancer metabolism
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PHGDH对胃癌细胞BGC823增殖和化疗药物敏感性的影响
李婷宇
郭昊
刘海明
易晓芳
聂勇战
樊代明
《中华肿瘤防治杂志》
CAS
北大核心
2017
4
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