基于UHPLC-Q Exactive Orbitrap/MS结合多元统计方法分析不同基原淫羊藿化学成分的差异

目的:建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UHPLC-Q Exactive Orbitrap/MS)结合多元统计分析技术对5种不同基原淫羊藿化学成分差异分析的方法。方法:对5种基原30批淫羊藿样品的UHPLC-Q Exactive Orbitrap/MS全扫描数据进行多元统计分析。利用SIMCA软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)。结果:5种基原淫羊藿的化学成分具有差异性,根据相关参考文献及谱图信息,共鉴定出27种化学成分。所建立的OPLS-DA模型具有良好的数据描述能力和预测能力。柔毛淫羊藿化学成分具有显著性差异,而朝鲜淫羊藿与箭叶淫羊藿,淫羊藿与巫山淫羊藿之间的化学成分及含量具有相似性。经过筛选与分析,确定8种差异化学成分。结论:建立的方法可分析出5种基原淫羊藿化学成分的差异性,操作简便,方法准确,可为不同基原淫羊藿的质量控制及开发应用提供理论依据。

玉竹多糖对顺铂诱导小鼠急性肾损伤的作用及其铁死亡机制

目的:探讨玉竹多糖(POP)对顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)模型小鼠的作用,并阐明其可能的作用机制。方法:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、POP组和铁死亡诱导剂Erastin联合POP组(Erastin+POP组),每组10只。POP组和Erastin+POP组小鼠灌胃POP(400 mg·kg^(-1)),第7天时,模型组、POP组和Erastin+POP组小鼠均腹腔注射顺铂(20 mg·kg^(-1))制备AKI模型,对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水,Erastin+POP组小鼠提前1 d (即实验第6天)腹腔注射Erastin (40 mg·kg^(-1))。9 d后处死小鼠,收集血清和肾组织,试剂盒检测各组小鼠血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平及肾组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平,HE染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现,免疫组织化学染色法检测各组小鼠肾组织中铁死亡抑制蛋白1(FSP1)、铁蛋白重链1 (FTH1)和谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)蛋白表达水平,Western blotting法检测各组小鼠肾组织中肾脏核因子E2相关因子2 (Nrf2)和血红素氧合酶1 (HO-1)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠血清中Scr和BUN水平均明显升高(P<0.01),肾组织中MDA水平明显升高(P<0.01),GSH水平明显降低(P<0.01);多数肾小管管腔扩张,上皮细胞肿胀,空泡变性,上皮细胞脱落,管腔内可见蛋白样管型;肾组织中FSP1、FTH1、GPX4、Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,POP组小鼠血清中Scr和BUN水平均明显降低(P<0.01),肾组织中MDA水平降低(P<0.01),GSH水平升高(P<0.01);肾小管管腔扩张,上皮细胞肿胀,空泡变性,上皮细胞脱落均有减少;肾组织中FSP1、FTH1、GPX4、Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与POP组比较,Erastin+POP组小鼠血清中Scr和BUN水平均明显升高(P<0.01),肾组织中MDA水平明显升高(P<0.05),GSH水平明显降低(P<0.01);肾组织病理损伤明显加重;肾组织中FSP1、FTH1、GPX4、Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:POP可减轻顺铂诱导的小鼠AKI,其机制可能与POP抑制顺铂引起的铁死亡有关。

白囊耙齿菌多糖结构及抗肾小球系膜细胞的增殖活性研究

为表征白囊耙齿菌多糖结构并筛选出具有抗肾小球系膜细胞(GMC)增殖作用的活性多糖,研究活性多糖对GMC异常增殖及细胞外基质分泌的影响。实验采用碱提醇沉法提取粗多糖(PC),经离子交换色谱柱纯化、SePhadex G-50凝胶柱分离得到耙齿菌多糖PCP-1、PCP-2。通过苯酚硫酸法、BCA法等测定其含量,甲基化,IR分析进行结构表征。采用MTT法、ELISA法考察对GMC增殖的影响。结果表明,PCP-1和PC-2的总糖含量分别为98.05%、96.92%,酸性糖及蛋白质含量几乎为零;PCP-1主要由Man、Glc和Gal组成,具有多分枝结构,包含吡喃糖类型的结构,具备α和β两种构型;而PCP-2仅由Glc组成,没有分支,为α-构型吡喃聚糖。具有抗GMC增殖活性的均一多糖为PCP-1,可保护LPS诱导的GMC增殖,减少LN、FN蛋白的释放。

基于网络药理学及分子对接技术研究向海雁鹅血的抗肺癌活性成分

对向海雁鹅血抗肺癌的活性成分、潜在作用靶点及信号通路进行研究,并应用分子对接技术探索其抗肺癌可能的作用机制。利用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS/MS)分析向海雁鹅血活性物质的成分;采用网络药理学筛选靶点,分析信号通路,构建向海雁鹅血活性物质“成分-靶点-通路”网络;利用细胞增殖检测(CCK-8)细胞活力测定法检测向海雁鹅血提取物对4种人癌细胞活力影响;运用分子对接核心靶点与向海雁鹅血活性成分;实时定量聚合酶链反应检测(qPCR)检测向海雁鹅血提取物对人肺癌A549细胞p-AKT1的mRNA表达的影响。结果分析出Pro、H-Asn-Asp-Asp-Met-OH、Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr-Asp、和Ala-Trp-Met-AspPhe-Val 4种向海雁鹅血活性成分;获得相关靶点258个,其中核心靶点46个;GO基因富集分析涉及AKT1、IL1BS、SRC等关键靶点;KEGG信号通路富集涉及癌症信号通路等;向海雁鹅血提取物对4种人癌细胞的细胞活力均有抑制,其中对人肺癌A549细胞的抑制效果最明显;向海雁鹅血活性成分的核心靶点与肺癌靶点相映射结果显示是通过AKT1、IL1BS、SRC等关键靶点起到抑制A549的作用;分子对接结果显示:H-Asn-Asp-AspMet-OH与ATK1的结合能最高;qPCR检测结果显示,向海雁鹅血提取物能够显著减低A549细胞p-AKT1的mRNA的含量水平。向海雁鹅血活性物质通过多靶点、多通路的形式诱导人肺癌A549细胞凋亡,为向海雁鹅血抗肺癌的活性物质研究与开发提供了新的思路和方向。

人参皂甙Rh_2对小鼠EAC的诱导再分化作用

本项研究首次采用人参皂甙Rh_2研究,对EAC小鼠生命延长期的影响,进而揭示了人参皂甙Rh_2能够提高荷癌宿主机体免疫功能,改善宿主体质的作用,为人参皂甙Rh_2的进一步深入研究提供实验数据.

儿童抗病毒颗粒质量标准研究

本研究采用薄层色谱(TLC)法分别对儿童抗病毒颗粒中的大青叶、黄芩、柴胡进行定性鉴别,并运用高效液相法测定大青叶中靛玉红的含量,从而建立儿童抗病毒颗粒的质量标准控制方法。通过TLC法能够清晰地显示出大青叶、柴胡和黄芩的特征斑点,且阴性对照无干扰;靛玉红在0.806μg/mL^12.264μg/mL范围内呈现良好的线性关系,平均回收率为100.07%,RSD值为0.90%。本方法结果准确可信,操作简单可行,为儿童抗病毒颗粒的质量控制提供了理论基础。

吸附树脂双波长扫描法测定人参茎叶皂甙

本文研究了应用多孔吸附树脂处理人参茎叶甲醇提取物,再经TLC层析,用cs—930双波长薄层扫描仪测定人参茎中皂甙含量分析方法。本法检测人参茎叶中皂甙含量,精确度高,重现性较好。

简述人参与西洋参的区别

人参、西洋参同为五加科人参属植物。人参主产于我国东北,有300多年的栽培历史。西洋参原产于加拿大、美国,近年来已在我国华东、东北等地区引种成功。这二种植物的形态特征有许多相似之处,不仔细区别极易混淆,许多地方引种失误,造成了不必要的经济损失。此外,二者在药材性状,加工方法及管理作用等方面也存在一定差异,有必要进行对照鉴别。

人参茎叶皂甙对蒜苗生长作用的试验

以4种浓度的人参茎叶皂甙培养液(1、0.1、0.01和0.001g/100ml)及水对照培养大蒜,结果0.01%和0.001%浓度的皂甙液与对照相比能促进萌发,对根的生长则无明显影响;而1%和0.1%的皂甙液则显著地抑制蒜苗和根的生长。

发挥科技优势 拓宽研究领域 增强研究所活力

吉林省人参研究所在各项工作中以党的十三届四中、五中和六中全会精神为指南,坚持。“四项基本原则”和“改革开放”的总方针,深入治理整顿,进一步完善了以“五自一包”为主要形式的科研体制改革,把风险、竞争机制引入研究所管理体系,有效地调动了全体科技人员的积极性。全所上下团结一致,齐心协力,克服资金短缺,能源不足和基础薄弱等各种不利因素的影响。

鹿茸多肽预处理通过miR-133a调控TGF-β/Smad信号通路对TBHP诱导心肌H9c2细胞损伤的保护作用

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)预处理对叔丁基过氧化氢(TBHP)诱导大鼠心肌H9c2细胞损伤的保护作用,阐明VAP对miR-133a/转化生长因子β(TGF-β)/Smad轴的作用及其机制。方法:将H9c2心肌细胞分为空白对照组、空白血清组、TBHP组、TBHP+低剂量(100 mg·kg^(-1))VAP组、TBHP+高剂量(400 mg·kg^(-1))VAP组和miR-133抑制剂(miR-133 inhibitor)组。空白对照组不做任何处理,其余各组细胞经VAP处理24 h后,给予200μmol·L^(-1)TBHP处理;miR-133inhibitor组细胞转染miR-133 inhibitor 24 h,给予400 mg·kg^(-1)VAP处理24 h,并给予200μmol·L^(-1)TBHP处理。MTT法检测各组H9c2细胞存活率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞培养上清液中肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组H9c2细胞中miR-133表达水平,Western blotting法检测各组H9c2细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)和Smad4蛋白表达水平。结果:MTT法检测,与TBHP组比较,TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞存活率升高(P<0.05),miR-133inhibitor组H9c2细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA法检测,与空白对照组比较,TBHP组H9c2细胞中cTnT、cTnI和CK-MB水平升高(P<0.05);与TBHP组比较,TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞中cTnT、cTnI和CK-MB水平降低(P<0.05)。RT-qPCR法检测,与空白对照组比较,TBHP组H9c2细胞中miR-133a表达水平降低(P<0.05);与TBHP组比较,TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞中miR-133a表达水平升高(P<0.05或P<0.01),miR-133 inhibitor组H9c2细胞中miR-133a表达水平明显降低(P<0.01)。Western blotting法检测,与空白对照组比较,TBHP组H9c2细胞中TGF-β1、p-Smad2/3和Smad4蛋白表达水平升高(P<0.05);与TBHP组比较,TBHP+低剂量VAP组和TBHP+高剂量VAP组H9c2细胞中TGF-β1、p-Smad2/3和Smad4蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:VAP预处理通过miR-133a调控TGF-β/Smad信号通路保护TPHP诱导的大鼠心肌H9c2细胞损伤。

多越冬芽发育的生理解析--基于HPLC-MS/MS法的内源植物激素分析

为阐明人参多越冬芽发育形成多茎的生理机制,采用HPLC-MS/MS法对两种类型人参植株在越冬芽发育过程中根茎部位主要内源激素含量进行了检测,分析了各种激素含量变化规律以及激素间相互作用对越冬芽发育数量的影响.结果表明:人参多越冬芽发育是生长素、细胞分裂素相互作用的结果,根茎中低浓度生长素、高浓度细胞分裂素有利于多越冬芽发育;越冬芽发育时活性细胞分裂素是以核苷分子形式存在的tZR、cZR、iPR;赤霉素间接参与越冬芽发育过程,脱落酸拮抗细胞分裂素,对越冬芽发育起抑制作用.根茎中高CKs/IAA值和低浓度赤霉素有利于多越冬芽发育形成多茎.

水飞蓟的栽培技术

水飞蓟〔Silybum marianum(L.)Gacrtn.〕别名乳蓟,为菊科植物。原产地中海沿岸,我国自1973年引种栽培,生长良好,它是保肝药用植物,种子中含有水飞蓟素(黄酮),可改善肝功能,保护肝细胞膜,治疗急慢性肝炎及肝硬变等症。种子含油约20％,可供食用,又可促进胆固醇代谢,能治疗肺结核病。花盛期可放蜂酿蜜,质优味美。油渣,制药后的残余,可喂养猪鸡。叶花美观。

参红补血颗粒对气滞血瘀型血管内皮功能障碍小鼠血管内皮的保护作用及其机制

目的:探讨参红补血颗粒(SBG)对气滞血瘀型血管内皮功能障碍(VED)模型小鼠血管内皮的保护作用和对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、核因子κBp65(NF-κB p65)及细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达水平的影响,阐明其相关作用机制。方法:将60只昆明小鼠随机分为正常对照组、VED组、阳性对照组(0.62 g·kg^(-1)·d^(-1)血府逐瘀胶囊)、低剂量SBG(3 g·kg^(-1)·d^(-1))组、中剂量SBG(6 g·kg^(-1)·d^(-1))组和高剂量SBG(9 g·kg^(-1)·d^(-1))组,每组10只。除正常对照组外,其他各组小鼠采用冰水浴游泳法构建气滞血瘀型VED模型,连续给药造模21 d。观察各组小鼠行为表现,血液流变仪检测各组小鼠全血黏度,苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠肺和胸主动脉组织病理形态表现,ELISA法检测各组小鼠血清血管性血友病因子(vWF)、血栓调节蛋白(TM)、ICAM-1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平,试剂盒检测各组小鼠血清一氧化氮(NO)水平和胸主动脉组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为正常对照组,叔丁基过氧化氢(TBHP)组,低、中和高剂量SBG组,除正常对照组外,其他4组HUVECs采用TBHP诱导HUVECs建立氧化损伤模型,采用MTT法检测各组HUVECs存活率,Western blotting法检测各组HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,VED组小鼠抓力值和自主活动次数明显降低(P<0.05),全血黏度明显升高(P<0.05);与VED组比较,阳性对照组和低、中及高剂量SBG组小鼠抓力值均明显升高(P<0.05),小鼠全血黏度明显降低(P<0.05),阳性对照组和高剂量SBG组小鼠自主活动次数明显升高(P<0.05)。HE染色,与正常对照组比较,VED组小鼠肺组织出现明显的毛细血管扩张和淤血,并且组织伴有大量炎性细胞浸润;与VED组比较,阳性对照组和不同剂量SBG组小鼠肺泡壁毛细血管扩张和淤血的程度减轻,炎性细胞浸润数量明显减少,并呈剂量依赖性;与正常对照组比较,VED组小鼠胸主动脉内壁结构紊乱,出现缺损和脱落;与VED组比较,阳性对照组和不同剂量SBG组小鼠血管内膜的脱落损伤情况改善,内膜相对完整。与正常对照组比较,VED组小鼠血清vWF、TM、ICAM-1、TNF-α和IL-6水平明显升高(P<0.05),血清NO水平以及动脉组织中GSH-Px和SOD活性明显降低(P<0.05);与VED组比较,阳性对照组和高剂量SBG组小鼠血清vWF、TM、ICAM-1、TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.05),血清NO水平以及动脉组织中GSH-Px和SOD活性明显升高(P<0.05)。与正常对照组比较,TBHP组HUVECs存活率明显降低(P<0.05),HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平升高(P<0.05);与TBHP组比较,高剂量SBG组HUVECs存活率明显升高(P<0.05),HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:SBG可通过抑制氧化应激,缓解炎症反应,达到保护气滞血瘀型VED小鼠血管内皮的作用。

龙胆草野生变家植栽培技术

龙胆草(Gentiana Scabra Bse)为龙胆科多年生草本植物,主产于东北三省、江苏等地。别名:龙胆草、胆草根。做为中药龙胆草之上品的东北龙胆(Gentiana mansgurica)是东北的地道药材之一。

老参地利用初探

我国人参生产一直沿用伐林迹地栽参,土地利用率很低,只能栽播一茬人参。老参地大部分废弃,造成极大的资源浪费。所以研究解决老参地栽参问题是当前发展人参生产的迫切问题。

在改革中求进取求发展

吉林省人参研究所座落在美丽富饶的长白山脚下,是科、工、贸紧密结合的人参专业技术开发机构,是目前国内唯一的省级人参专业研究所。一九八三年建所以来,我们自立更生,艰苦创业,白手起家,使研究所从无到有、由小到大,现已发展成为具有人参栽培、加工、制剂、化学、药理和技术开发等研究室及制药厂、保健制品厂和生产经营技术开发公司等门类齐全、技术先进、检测能力较强的、初具规模的人参研究中心。我所在全省科研系统率先改革,科研实行“五自一包”(自由组合、自选课题、自订计划、自筹资金、自找门户的科研经济承包责任制)。八八年创收六十万元。几年来,

氧化苦参碱对顺铂诱导的急性肝损伤模型小鼠的保护作用及机制

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对顺铂诱导后急性肝损伤模型小鼠的保护作用及机制。方法40只雄性C57BL/6小鼠,体质量18~22 g,随机分为空白组、模型组、OMT组和SIRT1抑制剂(EX-527)组。OMT组和EX-527组分别灌胃氧化苦参碱水溶液[150 mg/(kg·d)],空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续给药9 d。EX-527组于第6天腹腔注射EX-527(10 mg/kg),第7天时,除空白组腹腔注射生理盐水外,其余各组均按照20 mg/kg腹腔注射顺铂建立小鼠急性肝损伤模型,48 h后处死小鼠。收集血清及肝组织,试剂盒检测各组血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平及小鼠肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察各组肝组织病理形态学变化,免疫组织化学染色法检测各组肝组织中铁蛋白重链(FTH)1、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)4和铁死亡抑制蛋白(FSP)1的蛋白表达水平,Western印迹检测各组肝组织中SIRT1蛋白的表达水平。结果与空白组对比,模型组血清AST、ALT水平明显升高,肝脏中MDA含量明显升高,SOD和CAT含量明显降低(P<0.01);HE染色结果可见肝脏结构损伤,免疫组化结果显示模型组FTH1、GPX4和FSP1蛋白表达明显降低(P<0.05),Western印迹结果显示肝脏中模型组SIRT1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与模型组对比,OMT组血清中AST、ALT水平明显减少,肝脏中MDA含量明显减少,SOD及CAT含量明显升高(P<0.01);HE染色结果可见肝脏形态恢复正常,免疫组化结果显示OMT组FTH1、GPX4和FSP1蛋白表达明显减少(P<0.05),Western印迹结果显示,OMT组SIRT1蛋白水平明显上升(P<0.05)。与OMT组对比,EX-527组血清AST、ALT水平明显上升(P<0.01),MDA含量明显上升(P<0.05),而SOD及CAT含量明显下降(P<0.01);HE染色结果可见肝细胞在EX-527组中排列紊乱且细胞边缘较为模糊,免疫组化结果显示,FTH1、GPX4和FSP1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),Western印迹结果显示小鼠肝脏中SIRT1蛋白表达水平均明显下降(P<0.05)。结论OMT能够通过抑制SIRT1蛋白表达,有效减轻顺铂诱导后的小鼠急性肝损伤。