基于网络药理学及分子对接技术研究向海雁鹅血的抗肺癌活性成分

对向海雁鹅血抗肺癌的活性成分、潜在作用靶点及信号通路进行研究,并应用分子对接技术探索其抗肺癌可能的作用机制。利用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS/MS)分析向海雁鹅血活性物质的成分;采用网络药理学筛选靶点,分析信号通路,构建向海雁鹅血活性物质“成分-靶点-通路”网络;利用细胞增殖检测(CCK-8)细胞活力测定法检测向海雁鹅血提取物对4种人癌细胞活力影响;运用分子对接核心靶点与向海雁鹅血活性成分;实时定量聚合酶链反应检测(qPCR)检测向海雁鹅血提取物对人肺癌A549细胞p-AKT1的mRNA表达的影响。结果分析出Pro、H-Asn-Asp-Asp-Met-OH、Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr-Asp、和Ala-Trp-Met-AspPhe-Val 4种向海雁鹅血活性成分;获得相关靶点258个,其中核心靶点46个;GO基因富集分析涉及AKT1、IL1BS、SRC等关键靶点;KEGG信号通路富集涉及癌症信号通路等;向海雁鹅血提取物对4种人癌细胞的细胞活力均有抑制,其中对人肺癌A549细胞的抑制效果最明显;向海雁鹅血活性成分的核心靶点与肺癌靶点相映射结果显示是通过AKT1、IL1BS、SRC等关键靶点起到抑制A549的作用;分子对接结果显示:H-Asn-Asp-AspMet-OH与ATK1的结合能最高;qPCR检测结果显示,向海雁鹅血提取物能够显著减低A549细胞p-AKT1的mRNA的含量水平。向海雁鹅血活性物质通过多靶点、多通路的形式诱导人肺癌A549细胞凋亡,为向海雁鹅血抗肺癌的活性物质研究与开发提供了新的思路和方向。

白囊耙齿菌多糖结构及抗肾小球系膜细胞的增殖活性研究

为表征白囊耙齿菌多糖结构并筛选出具有抗肾小球系膜细胞(GMC)增殖作用的活性多糖,研究活性多糖对GMC异常增殖及细胞外基质分泌的影响。实验采用碱提醇沉法提取粗多糖(PC),经离子交换色谱柱纯化、SePhadex G-50凝胶柱分离得到耙齿菌多糖PCP-1、PCP-2。通过苯酚硫酸法、BCA法等测定其含量,甲基化,IR分析进行结构表征。采用MTT法、ELISA法考察对GMC增殖的影响。结果表明,PCP-1和PC-2的总糖含量分别为98.05%、96.92%,酸性糖及蛋白质含量几乎为零;PCP-1主要由Man、Glc和Gal组成,具有多分枝结构,包含吡喃糖类型的结构,具备α和β两种构型;而PCP-2仅由Glc组成,没有分支,为α-构型吡喃聚糖。具有抗GMC增殖活性的均一多糖为PCP-1,可保护LPS诱导的GMC增殖,减少LN、FN蛋白的释放。

儿童抗病毒颗粒质量标准研究

本研究采用薄层色谱(TLC)法分别对儿童抗病毒颗粒中的大青叶、黄芩、柴胡进行定性鉴别,并运用高效液相法测定大青叶中靛玉红的含量,从而建立儿童抗病毒颗粒的质量标准控制方法。通过TLC法能够清晰地显示出大青叶、柴胡和黄芩的特征斑点,且阴性对照无干扰;靛玉红在0.806μg/mL^12.264μg/mL范围内呈现良好的线性关系,平均回收率为100.07%,RSD值为0.90%。本方法结果准确可信,操作简单可行,为儿童抗病毒颗粒的质量控制提供了理论基础。

多越冬芽发育的生理解析--基于HPLC-MS/MS法的内源植物激素分析

为阐明人参多越冬芽发育形成多茎的生理机制,采用HPLC-MS/MS法对两种类型人参植株在越冬芽发育过程中根茎部位主要内源激素含量进行了检测,分析了各种激素含量变化规律以及激素间相互作用对越冬芽发育数量的影响.结果表明:人参多越冬芽发育是生长素、细胞分裂素相互作用的结果,根茎中低浓度生长素、高浓度细胞分裂素有利于多越冬芽发育;越冬芽发育时活性细胞分裂素是以核苷分子形式存在的tZR、cZR、iPR;赤霉素间接参与越冬芽发育过程,脱落酸拮抗细胞分裂素,对越冬芽发育起抑制作用.根茎中高CKs/IAA值和低浓度赤霉素有利于多越冬芽发育形成多茎.

延边地区桑黄菌人工段木栽培技术

本文从桑黄菌培养基的配制、二、三级菌种的制备、菌段的制备、场地选择与大棚的建设、出菇管理、病虫害防治、越冬管理、采收与加工方面介绍了桑黄菌人工栽培技术,旨在为延边地区发展桑黄菌产业提供理论基础和技术支撑。