养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马神经元的保护作用

目的研究慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠海马区局部脑血流量(rCBF)改变及细胞凋亡情况,探讨养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马神经细胞的保护机制。方法将36只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、养血清脑颗粒组,每组12只。采用双侧颈总动脉缺血再灌注法制作血管性痴呆大鼠模型。养血清脑颗粒组术前10 d及术后每天用养血清脑颗粒灌胃4.8 g/kg,共灌胃45 d。Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习以及记忆能力,HE染色法观察大鼠海马CA1区病理组织形态学变化,免疫组织化学法检测大鼠海马区的caspase-3阳性神经元细胞,蛋白印迹检测大鼠海马区凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达含量的变化。激光多普勒血流仪测量大鼠海马脑血流变化。结果 Morris水迷宫检测结果表明,养血清脑颗粒组平均潜伏期明显低于模型对照组(P<0.05)。大鼠脑组织HE染色结果表明,养血清脑颗粒能够改善海马CA1区神经元形态异常。免疫组化染色发现,养血清脑颗粒组大鼠神经细胞caspase-3表达明显低于模型对照组(P<0.05)。养血清脑颗粒能够提高细胞中Bcl-2蛋白表达量,降低Bax蛋白表达(P<0.05),养血清脑颗粒能明显增加大鼠脑血流量(P<0.05)。结论养血清脑颗粒能够增加实验大鼠海马局部脑血流量,抑制海马神经细胞凋亡。

电化学发光免疫法和放射免疫法检测血清甲状腺激素的对比分析

甲状腺功能紊乱是内分泌科常见疾病,甲状腺激素水平检测是临床常用的检测项目,RIA作为传统的检测手段[1],将抗体用放射性碘元素标记来检测血清中甲状腺素。但因其需手工加样、操作过程繁琐,且检测过程中可能出现放射性污染、放射性元素的衰减影响检测结果,精准度相对降低[2],在临床检验中的应用受到一定限制。新一代标记免疫检测技术ECLIA,由电化学发光(ECL)和免疫测定法结合而成[3],具有检测迅速,灵敏度高等特点,

临床血常规检验中不同采血方式的结果分析

血常规通过检测人体血液中白细胞、红细胞、血小板等指标可揭示炎症、血液性疾病的发生和进展情况,是临床诊断中最为基础、必不可少的常规检查手段。在临床疾病的筛查、诊疗等方面发挥着重要作用,血常规分析仪可对红细胞、白细胞、血小板及血红蛋白等参数进行分析,它的诞生,提高了血常规检验工作效率和质量，而在实践中发现静脉以及指尖不同方式采集到的血液标本血常规的检测结果不同。

小细胞肺癌患者外周血中Th9细胞水平检测及其临床意义

目的:检测小细胞肺癌(SCLC)患者血清中白细胞介素9(IL-9)的水平和外周血中Th9的细胞比例,探讨Th9在SCLC疾病进展过程中的作用。方法:选择20例局限期SCLC患者(局限期SCLC组)、16例扩散期SCLC患者(扩散期SCLC组)和10名健康对照者(健康对照组)。ELISA法检测各组研究对象血清中IL-9水平,流式细胞术检测各组研究对象外周血Th9细胞在CD4+T细胞中所占比例。结果:SCLC组患者外周血中Th9细胞比例高于健康对照组(t=3.731,P<0.01),局限期SCLC患者外周血中Th9细胞比例低于扩散期SCLC组(t=2.825,P<0.01)。SCLC组患者血清IL-9水平高于健康对照组(t=4.001,P<0.01),局限期SCLC组患者血清中IL-9水平低于扩散期SCLC组(t=3.089,P<0.01);结论:Th9可能通过分泌IL-9直接促进SCLC的疾病进展,外周血中Th9细胞和IL-9可能成为评价小细胞肺癌的分子标志。

浆细胞性乳腺炎患者外周血CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞变化

目的:观察浆细胞性乳腺炎(Plasma cell mastitis,PCM)患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(CD4+CD25+CD127-Treg)数量和功能变化,以探讨PCM免疫病理机制。方法:将58例浆细胞乳腺炎患者分成三组:其中急性组13例(22%)、亚急性组25例(43%)和慢性组20例(34%)。并设正常对照组20例及乳腺癌对照组16例。以流式细胞术检测各型PCM患者外周血中CD4+CD25+CD127-Treg细胞百分率;实时荧光定量RT-PCR检测转录因子Foxp3表达及ELISA检测TGF-β水平。结果:三组PCM组与正常组相比,外周血CD4+CD25+CD127-Treg数量,外周血PBMC中Foxp3表达及血浆TGF-β水平均下降(P<0.05),其中急性PCM组下降最为明显(P<0.01),乳腺癌组三项指标均升高(P<0.05)。结论:浆细胞性乳腺炎患者的CD4+CD25+CD127-Treg数量及功能有所下降。

miR-126对结肠癌细胞生物学行为的影响及其在调控结肠癌EMT转化中的作用

目的:观察miR-126在不同转移潜能的人结肠癌细胞系中的表达情况及其对结肠癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响并探讨可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测结肠癌细胞系(SW480、SW620及HCT116)中miR-126的表达量。通过脂质体瞬时转染法将miR-126过表达(miR-126 mimics),并设置阴性对照组,然后采用CCK8法检测细胞的增殖能力,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell侵袭小室实验检测细胞的侵袭能力,Western blot实验检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达量的变化。结果:相对于低转移潜能的结肠癌细胞株SW480,miR-126在高转移潜能的SW620和HCT116细胞中的表达降低。过表达miR-126可使SW620细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,E-cadherin蛋白表达增加,Vimentin蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:低表达的miR-126与结肠癌的转移密切相关,miR-126影响结肠癌细胞生物学行为的作用可能是通过调控EMT进程实现的。

人工常规精液分析与计算机辅助精液质量分析的相关研究

精液质量是反映男性生育力最直接、最主要的指标，对于男性不育患者的精液质量进行分析是首要检测项目，可以提供较为直观的诊断依据。以往常常采用经典的人工常规精液分析（SRA）方法进行检测，近年来，计算机技术迅速发展，计算机辅助精子分析（CASA）技术也逐渐普及，为了对男性不育患者精液质量各项检测项目提供更准确的数据，本研究采用SRA法和CASA法对精液的主要指标进行分析，现报道如下。

养血清脑颗粒改善血管性痴呆大鼠海马神经元氧化损伤的机制

目的探讨血管性痴呆(VD)大鼠海马氧化损伤状况及养血清脑颗粒对VD大鼠脑保护的作用机制。方法将36只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(假手术组)、模型对照组、养血清脑颗粒组,每组12只。采用双侧颈总动脉缺血再灌注法制作VD大鼠模型。养血清脑颗粒组术前10 d及术后每天用养血清脑颗粒灌胃4.8 g/kg,共灌胃45 d。Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习以及记忆能力。生物化学法检测海马超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和胆碱酯酶(AchE)活性。流式细胞法检测大鼠脑组织中凋亡细胞百分率。结果 Morris水迷宫检测结果表明,养血清脑颗粒可以改善认知能力(P<0.05)。与模型对照组比较,养血清脑颗粒组大鼠海马MDA降低,SOD上调,AchE的活性降低,凋亡细胞比例降低(P<0.05)。结论养血清脑颗粒能改善VD大鼠的学习记忆能力,保护胆碱能系统,清除自由基,减轻脑组织细胞凋亡。

microRNA-199a/b-3p表达与肝细胞癌临床预后的相关性

目的:检测肝癌组织中micro RNA-199a/b-3p的表达变化,探讨mi R-199a/b-3p表达与肝细胞癌临床预后的相关性。方法:通过荧光定量检测法检测肿瘤组织与相应癌旁组织中mi R-199a/b-3p的表达变化,分析其与临床病例参数的相关性。结果:肝细胞癌患者肿瘤组织中mi R-199a/b-3p表达水平较癌旁组织均显著下调(P<0.05);发生转移患者的肝癌组织中mi R-199a/b-3p表达低于未转移患者;mi R-199a/b-3p高表达肝细胞癌患者的无瘤生存时间优于低表达患者(P<0.05)。结论:mi R-199a/b-3p低表达可能与肝细胞癌转移及预后不良相关。

两种常用尿常规检验方法的结果比较

尿常规检验项目在临床上十分重要,随着检验方法的改进以及先进医疗仪器的应用,临床上对检验结果的要求也越来越高,尿液的排出与血液循环、器官功能关系密切,且对水、酸碱度及电解质平衡均具有重要意义,故通过对尿液的量、性状、成分等进行分析,能够有效诊断疾病。尿液常规检查为临床上检测中三大检验项目之一,随着医疗科技的不断发展,除传统的手工镜检法,全自动尿干化学分析仪检测尿液的方法逐步被临床广泛使用。

慢性乙型肝炎患者外周血CD8^+T细胞TCR Vβ基因亚家族克隆化的研究

目的:分析慢性乙型肝炎(CHB)患者CD8+T细胞TCR Vβ基因亚家族克隆化特征。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增8例CHB患者外周血CD8+T细胞TCR Vβ基因22个亚家族的CDR3区,基因扫描技术对TCR Vβ亚家族的克隆化进行鉴定。结果:基因扫描显示所有8例CHB患者CD8+T细胞TCR Vβ基因亚家族均出现一个或一个以上单克隆或寡克隆增生。Vβ8、Vβ11、Vβ12出现单克隆增生的频率相对较高。8例健康者TCR Vβ基因亚家族均为多克隆。结论:CHB患者外周血CD8+T细胞TCR Vβ亚家族存在克隆性增生。

血清和卵泡液抗苗勒管激素在IVF-ET中的检测价值

目的探讨非多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中血清和卵泡液抗苗勒管激素(AMH)与临床结果的预测价值。方法选取进行IVF-ET患者(非PCOS原因不孕)共103例,根据获卵数分为低获卵组、正常组、高获卵组。检测自然月经周期第3天、取卵日和移植日血清AMH值以及卵泡液AMH值。依据统计学方法分析获卵数及临床妊娠与AMH水平的关系。结果低获卵组、正常组、高获卵组三组间窦卵泡数、总胚胎数在各组间比较均具有统计学差异(P<0.05);三组自然月经周期第3天、取卵日和移植日血清AMH值以及卵泡液AMH水平存在差异,均为低获卵组<正常组<高获卵组,组间成对比较差异具有统计学意义(P<0.05);卵泡液AMH水平妊娠组高于非妊娠组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清和卵泡液AMH水平可作为预测获卵数的指标,而卵泡液AMH水平高低与临床妊娠具有相关性,可作为预测妊娠结局的指标。

抑制c-FLIP_L表达增强rhTRAIL蛋白杀伤肺癌A549细胞的研究

目的:探讨抑制c-FLIPL表达增强rhTRAIL蛋白杀伤肺癌A549细胞株的可行性。方法:构建c-FLIPL序列特异性siRNAs表达载体并转染A549细胞抑制c-FLIPL基因表达,化学抑制剂他莫昔芬抑制c-FLIPL蛋白表达。RT-PCR和Western blot法检测c-FLIPL的mRNA和蛋白表达的变化。Western blot法检测caspase-8的活化情况。流式细胞仪检测A549细胞凋亡率,MTT法检测联合应用RNAi+rhTRAIL和他莫昔芬+rhTRAIL对A549细胞的杀伤活性。结果:特异性siRNA片段能显著降低A549细胞中c-FLIPL的mRNA水平和蛋白水平。他莫昔芬可以显著抑制c-FLIPL蛋白的表达。两者均可以实现caspase-8的活化,并促进rhTRAIL对A549细胞诱导凋亡作用,凋亡率从2.52%提高到64.5%和59.2%(P<0.05),他莫昔芬和siRNA均可显著促进rhTRAIL蛋白对A549细胞的增殖抑制作用,抑制率分别提高到73.2%和69.5%(P<0.05)。结论:靶向抑制FLIP蛋白表达能增加A549细胞对rhTRAIL诱导细胞凋亡的敏感性,有利于促进rhTRAIL蛋白在治疗NSCLC方面的研究应用。

microRNA-199a/b-3p对乳腺癌细胞运动能力的影响

目的:探讨microRNA-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞运动能力的机制。方法:在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,转入miR-199a/b-3p mimcs,免疫印迹法检测PAK4的表达量变化;迁移和侵袭实验检测,超表达miR-199a/b-3p和干扰PAK4表达对乳腺癌迁移侵袭的影响;细胞膜皱起检测,超表达miR-199a/b-3p和干扰PAK4表达对乳腺癌细胞细胞膜皱起的影响。结果:在MDA-MB-231细胞中,超表达miR-199a/b-3p或干涉内源PAK4蛋白表达,均能下调细胞的迁移率、侵袭率和平均细胞膜皱起面积。结论:miR-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞运动能力部分是通过抑制PAK4表达实现的,且miR-199a/b-3p具有抗乳腺癌迁移药物开发的潜质。

人参二醇组皂苷对内毒素休克大鼠脑皮质损伤的保护作用

目的探讨内毒素休克时大脑皮质损伤状况及人参二醇组皂苷对大鼠脑保护作用机制。方法将28只Wistar成年大鼠随机分为实验对照(control)组,内毒素休克(LPS)组,地塞米松(LPS+DEX)组和人参二醇组皂苷(LPS+PDS)组。大鼠静脉注射内毒素制作内毒素休克大鼠模型。生物化学法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。蛋白印迹检测大鼠核转录因子(NF)-κB蛋白P65亚基表达含量的变化。ELISA法检测脑组织内白细胞介素(IL-1β),肿瘤坏死因子(TNF-α)和IL-6水平。结果与LPS组比较,LPS+DEX组和LPS+PDS组大鼠脑组织MDA含量降低,SOD活性上调,NF-κB蛋白表达降低,IL-1β,TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.05)。结论 PDS能够下调内毒素休克脑组织中NF-κB蛋白表达,改善自由基和炎症因子对脑组织的损伤作用,对中枢神经系统具有保护作用。

微小RNA-126在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的观察微小RNA-126(miR-126)在结肠癌组织中的表达情况,并分析miR-126的表达与结肠癌患者临床病理特征之间的关系。方法收集2015年1月至2018年9月吉林省人民医院行结肠癌根治术或肠镜下结肠息肉切除术102例患者的手术标本,包括结肠癌70例、腺瘤性息肉32例。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测腺瘤组织、结肠癌及其癌旁组织中miR-126的表达。以结肠癌组织miR-126平均表达值为界,将结肠癌病例分为高表达组和低表达组,分析miR-126表达与患者临床特征及病理参数的关系。结果 miR-126在腺瘤型息肉组织中的表达(0. 75±0. 09)明显低于癌旁组织(1. 00),而在高、中、低分化结肠癌组织中的表达[(0. 47±0. 04)、(0. 36±0. 12)、(0. 29±0. 07)]明显低于腺瘤型息肉组织(P <0. 05或P <0. 01)。以miR-126平均表达值(0. 37±0. 03)为界将结肠癌患者分为高表达组(19例)和低表达组(51例),miR-126的低表达与肿瘤分化程度、TNM分期、是否发生淋巴结转移及远处转移具有明显相关性具有明显相关性(P <0. 05或P <0. 01)。结论 miR-126在结肠癌中低表达,其可能作为抑癌基因与结肠癌的发生和进展有关。

干扰PAK4表达对肝细胞癌迁移侵袭的影响

目的:探讨利用microRNA-199a/b-3p干扰PAK4表达抑制肝细胞癌迁移侵袭的机制。方法:在HEK293T细胞中转入miR-199a/b-3p mimcs和pmir GLO-PAK4 3'UTR,荧光素酶报告法检测miR-199a/b-3p对PAK4的抑制作用。在肝细胞癌SMMC-7721细胞中,转入miR-199a/b-3p mimcs,免疫印迹法检测PAK4的表达量变化;迁移和侵袭实验检测,miR-199a/b-3p对肝细胞癌迁移侵袭的影响,干扰PAK4表达后肝细胞癌迁移侵袭的影响。结果:在SMMC-7721细胞中,miR-199a/b-3p通过与PAK4 3'UTR结合抑制PAK4 mRNA翻译,导致PAK4表达降低,并通过抑制PAK4表达抑制肝细胞癌迁移侵袭。结论:miR-199a/b-3p能抑制肝细胞癌细胞迁移侵袭,具有抗肝细胞癌药物开发的潜质。

腹腔灌注艾迪注射液治疗癌性腹水临床观察

肿瘤晚期患者常合并恶性积液,肝癌、胃癌、肠癌、卵巢癌等肿瘤晚期均易出现恶性腹腔积液,肿瘤晚期患者一般状态较差,KPS评分一般在30~90分,部分患者已不能耐受化疗、放疗等。腹腔灌注中药毒副作用相对较小,患者耐受性好。

MAGE-1与IL-18基因重组质粒转染的树突状细胞诱导体内抗肿瘤作用研究

目的:研究MAGE-1与IL-18基因重组质粒转染树突状细胞在体内诱导的抗肿瘤作用。方法:将重组质粒转入DC中构建DC疫苗,免疫肝癌荷瘤小鼠,观察被免疫小鼠的成瘤情况和生存时间。结果:DC疫苗免疫的荷瘤小鼠比对照组肿瘤生长受抑制,生存时间延长,其中共表达疫苗(pcmIL-18-MAGE)-DC组效果最佳(P<0.05),对MAGE(+)肝癌杀伤作用明显。结论:MAGE-1与IL-18基因重组质粒转染的树突状细胞疫苗在体内可产生抗肿瘤效果。

异体CIK联合血浆置换干预晚期原发性肝癌的临床研究

目的研究异体CIK联合血浆置换临床治疗肝癌的效应和机制。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),加入细胞因子诱导成CIK细胞,体外培养扩增。病例均给予内科综合支持治疗情况下,随机分为异体CIK细胞治疗组和异体CIK+血浆置换治疗组。应用ELISA法比较二组治疗前后血浆中IFN-γ、IL-4、IL-10、TGF-β、VEGF的浓度变化;流式细胞术检测二组治疗前后患者外周血中CD3+和CD4+细胞比例、CD4+/CD8+比值、CD8+细胞比例;比较二组患者的生存质量、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)。结果二组异体CIK的抗肿瘤免疫效应均上调,异体CIK+血浆置换治疗组免疫上调显著,与同时下调IL-4、IL-10和TGF-β、VEGF的血浆浓度有关(P<0.05);流式细胞术检测发现,治疗后的患者外周血中CD3+、CD4+细胞比例和CD4+/CD8+比值明显上升,CD8+细胞比例下降,以异体CIK+血浆置换治疗组更为显著(P<0.05);PFS长于单纯异体CIK细胞治疗组(P<0.05),OS无延长(P>0.05);生活质量显著优于异体CIK细胞治疗组(P<0.01)。结论通过应用异体CIK细胞过继免疫治疗+血浆置换方案,可抑制和清除免疫抑制性细胞和免疫抑制因子,上调CIK细胞免疫效应及数量,可抑制原发性肝癌进展,改善患者生活质量。